Técnicas da Biologia Molecular

Pelo Dr. Ananya Mandal, DM

A biologia Molecular é uma área da biologia estada relacionada com o processo de transcrição do gene para render o RNA, a tradução de RNA em proteínas e o papel jogo daquelas proteínas na função celular. Desde por volta de 1960, os biólogos moleculars desenvolveram métodos para identificar, isolar, e manipular componentes moleculars nas pilhas que incluem o ADN, o RNA, e as proteínas.

Diversas técnicas usadas no campo da biologia molecular são descritas abaixo.

  • Reacção em cadeia da Polimerase (PCR) - Esta é uma das técnicas as mais importantes usadas na biologia molecular e é usada basicamente para copiar o ADN. O PCR permite que uma única seqüência do ADN seja amplificada em milhões de moléculas do ADN. O PCR pode igualmente ser usado para introduzir mutações dentro do ADN ou para introduzir locais especiais da enzima da limitação. Além, o PCR é usado para determinar se um determinado fragmento do ADN existe em uma biblioteca do cDNA. Os tipos Diferentes de PCR incluem PCR reverso da transcrição (RT-PCR) para a amplificação do RNA e PCR quantitativo (QPCR) para medir a quantidade de presente do RNA ou do ADN.
  • Clonagem da Expressão - Esta técnica ajuda cientistas a compreender a função da proteína. O ADN que codifica para uma proteína particular é clonado ou copiado usando o PCR em um vector da expressão chamado um plasmídeo. O plasmídeo é introduzido a uma pilha animal ou a uma pilha bacteriana. Este plasmídeo tem os elementos do promotor que podem estimular a expressão alta da proteína desejada de modo que sua actividade enzimático possa então ser examinada.
  • Electroforese do Gel - Esta é uma outra técnica importante usada na biologia molecular para separar o ADN, o RNA, e as proteínas baseadas em seu tamanho aplicando um campo elétrico porque o ADN é executado através do gel do agarose.
  • Macromolécula que borra e que sonda - os Processos tais como a mancha do sul, a mancha do norte, a mancha ocidental e a mancha oriental são usados para transferir o ADN ou proteínas do RNA em uma membrana de mancha (frequentemente depois que electroforese do gel) assim podem ser manchados ou radioativa etiquetado e então visualizado.
  • Disposições - os microarrays De um ADN ou a microplaqueta do ADN são uma coleção dos pontos do ADN montados em uma superfície contínua tal como uma corrediça do microscópio que possa ser usada para determinar simultaneamente níveis da expressão da proteína através de um grande número genes. A técnica pode igualmente ser usada às várias regiões genomic diferentes do genótipo.

Revisto por , BSc

Fontes

  1. http://www.cs.helsinki.fi/bioinformatiikka/mbi/courses/09-10/itb/Lectures_1509_and_1709.pdf
  2. http://www.esp.org/mol-bio.pdf
  3. http://www.fao.org/docrep/014/i1905e/i1905e00.pdf
  4. http://www.nyu.edu/projects/fitch/courses/moleccell/precellevo.pdf
  5. http://www.pasteur.fr/~tekaia/BCGA/Ch03_molbio.pdf

[Leitura Adicional: Biologia Molecular]

Last Updated: Oct 16, 2014

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