חוקרים בניו יורק, גואנגזו, סין microarray ליישם במהירות בפיתוח טכנולוגיה פחמימות ללמוד מומת הסארס, קורונה (SARS-CoV) חיסון וגילה פעילות autoimmunogenic של הפתוגן זיהו לאחרונה זה נגיפי האדם.
שימוש microarrays glycan, החוקרים אפיינו את הפעילות מחייב הפחמימות של הסארס-CoV נוגדנים מנטרלים שהושרו על ידי מומת הסארס חיסון ויראלי ומצא:
- תגובתיות autoantibody רצויה נוכח הסארס-CoV נוגדנים נטרול
- תגובתיות אוטואימוניות מכוונת הפחמימות המורכבות של גליקופרוטאין בשפע בסרום אדם, עשור (asialo-orosomucoid)
- לקטינים PHA-L מזוהה בדיקה אימונולוגית ספציפית כדי לזהות זה פחמימה מורכבת
- זה כתמים לקטינים הסארס-CoV תאים הנגועים ספציפי באופן אינטנסיבי.
החוקרים אמר כי בהתבסס על ממצאים אלה הם "יש ראיות מספיקות לכך אימונולוגית מבנה ויראלי, הביע פחמימות אחראי אינדוקציה של אוטואימוניות אנטי עשור בבעלי חיים מחוסנים. תצפיות אלו מעלים חששות בנוגע לשימוש האדם של כל וירוס מבוססי הסארס חיסון זה מיוצר על ידי תאים Vero E6 קוף ".
הם רואים שזה מסוכן מדי להכניס כולו נגיפי הסארס החיסון בבני אדם מאז רכוש החיסונית שלה נשאר uncharacterized ברובו. הם אמרו: "זה הכרחי כדי למנוע פעילות בלתי רצויה autoimmunogenic הכנה זו של מומת הסארס-CoV ניתן לזהות קו תאים חלופיים או גנטית לשנות את קו Vero E6 התא על ידי שינוי מסלול glycosylation שלה, ובכך לייצר חיסונים עם. יעילות משופרת ללא פעילות autoimmunogenic ".
וואנג לו לציין כי גישות ניסיוניות שפותחו במחקר שלהם חלים סביר לאפיון אימונולוגית של פתוגנים ויראליים אחרים.
מחקר שנעשה באוניברסיטת קולומביה סון יאט סן אוניברסיטת
שיתוף שווה כותבי העיתון "מערכים glycan להוביל לגילוי של פעילויות autoimmunogenic של הסארס-CoV" הם Denong וואנג, שהיה ראש אגף הגנומיקה התפקודית של אוניברסיטת קולומביה מרכז הגנום, מכללת רופאים מנתחים &, ניו יורק, ניו יורק; ו Jiahai לו, פרופסור חבר בבית הספר לבריאות הציבור באוניברסיטת סון יאט סן, גואנגזו, סין.
לו גם אחראי על תוכנית הסארס-CoV את החיסון עבור מחוז גואנגדונג.
וואנג עבר לאחרונה microarray הפחמימות שלו במעבדה של מחלקות לגנטיקה, לנוירולוגיה נוירולוגיות למדעים, אוניברסיטת סטנפורד הספר לרפואה, בפאלו אלטו, קליפורניה.
המחקר פורסם לראשונה באינטרנט מאמרים האגודה פיזיולוגיים של לחץ אמריקאי מאי 25 ו מופיע בגיליון יולי 2004 של Genomics פיזיולוגיים, אחד 14 כתבי עת המכיל כמעט 4,000 מאמרים בשנה, שפורסם על ידי APS.
ניסויים ותוצאות
בשנת 2002, במעבדתו של וואנג פיתחה פלטפורמה bioarray מעשית, אשר מנצל nitrocellulose מצופה שקופיות הזכוכית המצע לשתק אנטיגנים פחמימות. הליך זה מתאים לבניית תפוקה גבוהה של פחמימות באמצעות מערכים microarray הקיים באיתור התקנים. הקבוצה שלו דיווחו כי מגוון של פחמימות המכיל מקרומולקולות של תצורות מבניות שונות, כולל סוכרים, glycoconjugates טבעי, מונו ו אוליגוסכרידים מצמידים את מולקולות המוביל, הרלוונטיים עבור פלטפורמה זו bioarray.
שימוש בטכנולוגיה זו, הקבוצה של וואנג נבנה מערך glycan להציג אוסף של אנטיגנים פחמימות, סוכרים, כולל חיידקים הצמחי, כמו גם הסלולר glycan פחמימות מורכבות. כדי להרחיב את הרפרטואר של מבנים פחמימות מגוונים על מערך, הם כללו בעיקר בקבוצת חומרים דם A, B, O, לואיס, לי, ואני אנטיגנים, מבשרי שלהם נגזרים מבניים אשר טופחו על ידי המנוח קולומביה פרופסור אלווין א Kabat ו אחרים.
וואנג האמין לו לסרוק את הנוגדן "טביעות אצבע" של נושאים לחסן או נגועים באמצעות מערך רחב טווח glycan היא גישה חיסוניות ספציפיות לבחון את הראיות הביטוי ויראלי של פחמימות מורכבות המקביל. עם אסטרטגיה זו ניסיוני הרומן, הם מאופיינים הסארס-CoV נוגדנים נטרול ו זוהה רמות משמעותיות של נוגדנים IgG כדי עשור גליקופרוטאין אדם בסרום אנטי-SARS CoV נוגדנים סוס. עם זאת, לא היה תגובתיות לגילוי נוגדנים ל-agalacto orosomucoid (AGOR), נגזרת של עשור, השונה עשור אך ורק על ידי בהעדר שאריות galactosyl מסוף סוכר.
לכן, החוקרים לקחו בחשבון כי תגובתיות נגד עשור נוגדן ספציפי סביר עבור moieties סוכר של עשור, וכי גלקטוז מסוף (גל) תורם באופן משמעותי תגובתיות מחייב פחמימות. אלה "שבב הלהיטים" הביאו את הדרך זיהוי מהיר של בדיקות חיסוניות ספציפיות יושמו לאחר מכן כדי לקבוע אם הסארס-CoV תאים הנגועים קוף מבטא מבנים antigenic המחקים את פחמימות מורכבות על גליקופרוטאין האדם.
שאלה על התגובות אוטואימונית הסארס בפתוגנזה
הביטוי של עשור כמו פחמימות מורכבות על ידי נגיפי קורונה היא לא מוכרים קודם לכן. עשור הוא גליקופרוטאין בשפע בסרום האדם עשור סוג פחמימות מורכבות באים לידי ביטוי גם גליקופרוטאינים לארח אחרים. לכן את מערכת החיסון האנושית היא בדרך כלל לא מגיבים מבנים אלה "עצמי" פחמימות. עם זאת, כאשר moieties סוכר דומים באים לידי ביטוי על ידי גליקופרוטאין ויראלי, בתצורת אשכול שלהם עשויות להיות שונות באופן משמעותי מאלה המוצגים על ידי glycan הסלולר, ובכך לייצר רומן "לא עצמי" מבנה antigenic.