Исследователя в Нью-Йорке и Гуанчжоу, Китай прикладной быстр-разрабатывая технология microarray углевода для того чтобы изучить деактивированную деятельность при SARS-coronavirus (SARS-CoV) вакционную и открынную autoimmunogenic этого заново определенного людского вирусного патогена.
Используя glycan microarrays, исследователя характеризовали деятельность при углевода binding SARS-CoV нейтрализуя антитела выпытанную деактивированной вакциной SARS вирусной и находили:
- Нежелательная реактивность autoantibody присутствовал в антителах обезвреживания SARS-CoV
- аутоиммунная реактивность направлена к сложному углеводу обильного людского гликопротеида сыворотки, ASOR (asialo-orosomucoid)
- lectin PHA-L определен по мере того как специфический иммунологический зонд для того чтобы обнаружить этот сложный углевод
- этот lectin пятнает SARS-CoV-зараженные клетки специфически и интенсивно.
Авторы сказали то основанное на этих заключениях они «имеют достаточное иммунологическое доказательство что вирусн-выраженная структура углевода ответствена для индукции анти--ASOR аутоиммунитета в вакцинированных животных. Эти замечания поднимают заботы на людской пользе вирус-основанной целым вакцины SARS которую производят клеткой Vero E6 обезьяны.»
Они принять, что оно слишком рискованы для того чтобы ввести вс-вирусную вакцину SARS к людским вопросам в виду того что свое иммунологическое свойство остает в большинстве uncharacterized. Они сказали: «Необходимо исключить нежелательную autoimmunogenic работу этой подготовки деактивированных SARS-CoV. Возможно определить альтернативную линию клетки или genetically доработать линию клетки Vero E6 путем изменять свое тропа glycosylation, таким образом производя вакцины с увеличенной эффективностью без autoimmunogenic деятельности.»
Wang и Lu замечают что экспириментально подходы начатые в их исследовании вероятно применимы для иммунологической характеризации других вирусных патогенов.
Исследование сделанное на Колумбийском Университете и Университете Сунь Ятсен
Co-равные авторы бумаги «блоков Glycan водят к открытию autoimmunogenic деятельностей SARS-CoV» Denong Wang, которое было головкой функционального разделения геномики Центра Генома Колумбийского Университета, Коллежа Врачей & Хирургов, Нью Йорк, Нью Йорк; и Jiahai Lu, Адъюнкт-Профессор на Школе Общественных Здравоохранений на Университете Сунь Ятсен, Гуанчжоу, Китае.
Lu также на попечении вакционной программы SARS-CoV для Провинции Гуандун.
Wang недавно двинул его лабораторию microarray углевода к Отделам Генетик, Неврологии и Неврологических Наук, Медицинского Факультета Стэнфордского Университета, Пало-Альто, Калифорнии.
Исследование было сперва опубликованное он-лайн в Статьях Американского Физиологопсихологического Общества в Давлении 25-ое мая и появляется в вопрос Июля 2004 Физиологопсихологической Геномики, одного из 14 журналов содержа почти 4.000 статьей однолетн, опубликованного APS.
Эксперименты и результаты
В 2002, лаборатория Wang развила практически bioarray платформу, которая использует нитроцеллюлоз-покрынные стеклянные вставки как субстрат для того чтобы лишить подвижности антигены углевода. Эта процедура соответствующа для конструкции высок-объём блоков углевода используя существующий microarray пятная приборы. Его группа сообщила что ряд углевод-содержа макромолекул определенных структурных конфигураций, включая полисахариды, естественные glycoconjugates, и mono и олигосахариды соединил к молекулам несущей, применима для этой bioarray платформы.
Используя эту технологию, группа Wang построила glycan блок для показа собрания антигенов углевода, включая микробные и завод-выведенные полисахариды, так же, как клетчатые glycan сложные углеводы. Для того чтобы удлинить репертуар разнообразных структур углевода на блоке, они специально включили вещества A, B, O, Левис, I, и антигены I, их прекурсоры и структурные производные группы крови которые были воспитаны последним Профессором Elvin A. Kabat и другими Колумбии.
Wang и Lu верили что просматривающ антитело «fingerprints» иммунизировано или зараженные вопросы используя блок обширн-ряда glycan специфический иммунологический подход к исследовать доказательство вирусного выражения соответствуя сложных углеводов. С этой романной экспириментально стратегией, они характеризовали антитела обезвреживания SARS-CoV и обнаруживали значительно уровни антител IgG к людскому гликопротеиду ASOR сыворотки в антителах анти--SARS-CoV лошади. Однако, была никакая обнаруженная реактивность к agalacto-orosomucoid, (AGOR) производная от ASOR антитела, которое отличает от ASOR единственно отсутствием терминальной выпарки сахара galactosyl.
Поэтому, исследователя учитывали что анти--ASOR реактивность антитела вероятно специфическа для moieties сахара ASOR, и что терминальная галактоза (Gal) способствует значительно к реактивности углевода binding. Эти «обломок-удары» вели путь к быстрому идентификации специфических иммунологических зондов которые были затем прикладной для того чтобы определить выражают ли SARS-CoV-зараженные клетки обезьяны антигенные структуры которые передразнивают сложные углеводы на людском гликопротеиде.
Вопрос о аутоиммунных реакциях в патогенезе SARS
Выражение ASOR-как сложных углеводов coronaviruses ранее неузнаваемо. ASOR обильный людской гликопротеид сыворотки и ASOR-тип сложные углеводы также выражен другими гликопротеидами хозяина. Таким Образом людская иммунная система вообще non-отзывчива к этим структурам углевода «собственной личности». Однако, когда подобные moieties сахара будут выражены вирусным гликопротеидом, их конфигурация группы смогла отличать значительно от тех показанных клетчатое glycan, таким образом производящ романную структуру «non-собственной личности» антигенную.