Uma técnica para detectar prião no tecido, desenvolvida nos últimos anos por cientistas de UCSF, é significativamente mais sensível do que os procedimentos diagnósticos usados actualmente para detectar as partículas letais nas amostras de tecido de cérebro dos pacientes, de acordo com um estudo executado por uma equipe de UCSF.
Encontrar indica que a técnica diagnóstica, conhecida como o immunoassay conformação-dependente (CDI), deve ser estabelecida como a aproximação padrão para biópsias do cérebro dos pacientes suspeitados de ter a doença, eles diz. A equipe está explorando se o CDI pôde ser adaptado para detectar prião no sangue e no músculo.
Encontrar sugere essa confiança nos métodos actuais para detectar prião no tecido de cérebro humano -- exame microscópico do tecido para os vacuoles indicadores que formam nos neurónios e no immunohistochemistry (IHC), que envolve detectar prião em secções do cérebro usando anticorpos proteína-específicos do prião -- pode ter conduzido a um diagnóstico inferior da doença nos pacientes nos últimos anos, dizem. (O diagnóstico definitivo de A da doença nos seres humanos está feito somente na autópsia, quando um neuropathologist puder analisar regiões múltiplas do cérebro para os vacuoles e evidência dos prião por IHC, e se calcular que somente 50 por cento de casos humanos são autopsiados, na parte porque muitos patologistas não querem arriscar a infecção durante a autópsia.)
No estudo, a equipe comparou a capacidade do CDI e das duas técnicas diagnósticas tradicionais para detectar prião em várias amostras do cérebro de 28 pacientes diagnosticados na autópsia como tendo um de diversos formulários humanos da doença -- doença de Creutzfeldt-Jakob esporádica, familiar ou iatorgênica (CJD). Quando o CDI detectou o sinal bioquímico para prião em 100 por cento das amostras estudadas, os testes tradicionais não detectaram o prião em uma elevada percentagem dos casos. Por exemplo, em uma experiência que se centrasse sobre 18 regiões do cérebro de oito pacientes com CJD esporádico, o CDI detectou prião em 100 por cento das amostras, quando IHC as detectou em 22 por cento e em exame do tecido da rotina em 17 por cento.
“Em aproximadamente 80 por cento das regiões diferentes do cérebro examinadas, prião não foram detectados consistentemente por IHC ou pela histologia rotineira esse vacuolation da medida. Ao contrário, o CDI era sempre positivo em todas as regiões do cérebro,” diz o autor principal do estudo, Jiri Safar, DM, professor da adjunção do associado da neurologia e um membro do Instituto de UCSF para Doenças de Neurodegenerative, que é dirigido autor por Stanley superior B. Prusiner, DM, professor de UCSF da neurologia e da bioquímica.
“Estes resultados indicam que a histologia e o immunohistochemistry devem já não ser usados para ordenar para fora a doença do prião em amostras da biópsia do único-local,” dizem Safar. “O desempenho superior do CDI em diagnosticar a doença do prião sugere que o CDI esteja usado nas avaliações diagnósticas futuras da doença do prião, particularmente para biópsias do cérebro do único-local durante a vida”
“Se as técnicas tradicionais são usadas na autópsia, devem ser aplicadas a muitos corticais e amostras subcortical,” diz o co-autor Stephen J. DeArmond, DM, PhD, professor de UCSF da neuropatologia.
Além Disso, quando o estudo examinou a eficácia do CDI em comparação com as duas técnicas usadas rotineiramente por neuropathologists para detectar prião no tecido de cérebro humano, os estudos precedentes em UCSF indicam que o CDI é igualmente significativamente mais sensível do que a análise Ocidental da mancha, a tecnologia usada com o IHC para detectar prião no tecido de cérebro do gado suspeitado de ter a encefalopatia espongiforme bovina (BSE). Que IHC e a análise Ocidental da mancha são métodos relativamente insensíveis, pesquisadores diga, apoios sua afirmação em curso que o CDI deve igualmente ser usado para avaliar o tecido de cérebro do gado.
“Os estudos relatados aqui são prováveis mudar profunda a aproximação ao diagnóstico da doença do prião em ambos os seres humanos e rebanhos animais,” diz Safar.
Mais amplamente, os cientistas dizem, a sensibilidade alta do CDI sugere que aquela CDI-como testes poderia igualmente provar útil para diagnosticar outras doenças neurodegenerative, tais como a Doença de Alzheimer, a doença de Parkinsons e as demências fronto-temporais, que, como doenças do prião, envolvem os vários formulários da proteína que misprocessing. Estas doenças são diagnosticadas actualmente pela análise neuropathological e pelo immunohistochemistry.
“Se o immunohistochemistry subestima a incidência de umas ou várias destas doenças neurodegenerative comuns é desconhecida, mas o CDI poderia derramar a luz nestas doenças,” diz o co-autor Bruce Miller, DM, UCSF A.W. e Professor Distinguido Clausen de Mary Margaret da Neurologia e director do Centro da Memória e do Envelhecimento de UCSF.
Encontrar será imprimido em linha e na cópia o 1º de março de 2005 nas Continuações da Academia Nacional das Ciências.