Ang National Institutes of Health (NIH) ngayon iginawad ng isang hanay ng mga matulungin na kasunduan, totaling ng hanggang sa $ 52 milyon sa limang taon, upang ilunsad ang Knockout Mouse Project.
Ang layunin ng programang ito ay upang bumuo ng isang komprehensibong at publiko magagamit na mapagkukunan ng mga mutations ng knockout sa ang mouse genome. Ang Mice knockout na ginawa mula sa mapagkukunan na ito ay lubos na kapaki-pakinabang para sa pag-aaral ng tao sakit.
Ang Mouse NIH Knockout Project ay gumagana malapit sa iba pang malakihan pagsisikap ng mga knockouts na underway sa Canada, na tinatawag na ang North American kondisyon Mouse Mutagenesis Project (NorCOMM), at sa Europa, na tinatawag na European kondisyon Mouse Mutagenesis Program (EUCOMM). Ang layunin ng lahat ng mga programang ito ay upang lumikha ng isang pagbago sa bawat isa sa humigit-kumulang 20,000 protina-coding ng mga genes sa ang mouse genome.
"Knockout Mice ay malakas na tool para sa paggalugad ng pag-andar ng mga genes at sa paglikha ng mga modelo ng hayop ng tao sakit. Sa pamamagitan ng pagpapagana ng mas maraming mga mananaliksik sa pag-aaral ang mga knockouts, ito trans-NIH hakbangin ay mapabilis ang aming mga pagsisikap upang isalin ang mga pangunahing natuklasan sa pananaliksik sa mga bagong diskarte para sa pagpapabuti ng tao kalusugan , "sinabi NIH Director Elias A. Zerhouni, MD" Ito ay nakakaganyak na ang maraming mga bahagi ng NIH sumali magkasama upang suportahan ang proyektong ito, at na ang Mouse NIH Knockout Project ay gumagana kamay-in-kamay sa iba pang mga internasyonal na pagsisikap. ang pang-agham pagtutulungan ng magkakasama sa nito pinakamahusay. "
Knockout Mice ang mga linya ng Mice kung saan ang mga tiyak na genes ay ganap na disrupted, o "knocked out." Maparaan pagkagambala ng bawat ng 20,000 mga genes sa genome mouse ay payagan ang mga mananaliksik upang matukoy ang papel ng bawat gene sa normal na pisyolohiya at pag-unlad. Kahit na mas mahalaga, ang mga mananaliksik ay gumamit ng mga Mice sa knockout upang bumuo ng mas mahusay na mga modelo ng minana ng mga tao sakit tulad ng kanser, sakit sa puso, neurological disorder, diabetes at labis na katabaan. Kamakailang mga advances sa recombinant DNA teknolohiya, pati na rin ang pagkumpleto ng mouse genome sequence, ngayon gumawa ng proyektong ito magagawa.
NIH ngayon ay iginawad limang taon matulungin mga kasunduan na totaling hanggang sa $ 47,200,000 sa dalawang grupo para sa paglikha ng mga linya knockout ang Mice. Tatanggap ng mga parangal ay
Regeneron parmasyutiko, Inc, sa Tarrytown, NY, at isang collaborative koponan mula sa bata Hospital Oakland Research Institute (CHORI) sa Oakland, Calif., ang School of Beterinaryo Medicine, University of California, Davis (UC Davis); at ang Wellcome Trust Sanger Institute sa Hinxton, England.
Sa karagdagan, ang NIH iginawad ng isa pang limang taon na matulungin na kasunduan totaling $ 2.5 milyon sa Jackson Laboratory sa Bar Harbor, Maine para sa pagtatatag ng isang NIH Knockout Mouse Project data center koordinasyon. Panghuli, NIH iginawad matulungin mga kasunduan sa University of Pennsylvania sa Philadelphia at sa Samuel Lunenfeld Research Institute of Mount Sinai Hospital sa Toronto upang mapagbuti ang kahusayan ng mga pamamaraan para sa paglikha ng mga linya ng knockout. Mga kasunduan sa kabuuang mga $ 2.5 milyong at tumakbo para sa tatlong at dalawang taon, ayon sa pagkakabanggit.
"Building ng isang genome-malawak na library ng mga knockouts ay nangangailangan ng kasanayan ng mga mananaliksik mula sa maraming iba't-ibang disiplina. Kami ay tiwala na ang mga multi-institusyon koponan namin pulled magkasama ay matugunan na hamon at maghatid ng mga ito magkano-kinakailangan na mapagkukunan sa kamay ng mga pandaigdigang pananaliksik komunidad, "sabi ni James Battey, MD, Ph.D., direktor ng sa National Institute sa kabingihan at Iba pang mga Communication Karamdaman (NIDCD) at co-silya ng trans-NIH Genomic Resources Paggawa Group.
Upang petsa, ang mga akademikong mga mananaliksik sa buong mundo ng mouse knockouts ng halos 4,000 genes. Sa karagdagan, ang isang random na diskarte ng pagkagambala ay ginamit sa pamamagitan ng International Consortium Gene Trap mutate 8000 genes mouse. Dahil sa ilang mga overlap sa pagitan ng mga pagsisikap, mga tungkol sa 15,000 genes ay mananatiling na knocked out sa ang mouse genome.
Ang NIH programa, kasama sa NorCOMM at EUCOMM, balak sa malapit coordinate ang kanilang mga pagsisikap upang maiwasan ang kalabisan at ma-maximize ang kahusayan ng pagbuo ng mga knockouts para sa lahat ng mga genes sa ang mouse genome. Bukod dito, sa US, Canada at European group ay nakatuon sa paggawa ng kanilang mga data at mga mapagkukunan mabilis at lantaran magagamit sa mga mananaliksik sa buong mundo.
"Ang mga internasyonal na proyekto ay palitan ng impormasyon at coordinate ang kanilang mga pagsisikap sa halos parehong paraan na ang mga koponan mula sa maraming mga bansa collaborated sa International Human Genome Project," sabi ni Colin Fletcher, Ph.D., isang programa ng direktor sa National Human Genome Research Institute ( NHGRI), na mangasiwa sa pamamahala ng tatlong sa limang mga matulungin na kasunduan na bumubuo sa core ng Knockout Mouse Project.
Sa ilalim ng nito matulungin kasunduan, ang koponan ay humantong sa pamamagitan ng Pieter deJong, Ph.D., CHORI, kasama KC Kent Lloyd, DVM, Ph.D., UC Davis, at Allan Bradley, Ph.D. FRS, at William Skarnes, Ph.D., sa Wellcome Trust Sanger Institute, mga plano upang systematically lumikha ng mouse embryonic stem (es) na mga linya ng cell kung saan 5,000 mga genes ay knocked out sa pamamagitan ng gene-target. Ang VelociGene division ng Regeneron, na humantong sa pamamagitan ng David Valenzuela, Ph.D. at George D. Yancopoulos, MD, Ph.D., ay layunin sa isang iba't ibang mga hanay ng mga 3,500 mga genes. Parehong grupo ay gamitin ang impormasyon mula sa mga tapos na mouse genome sequence sa disenyo ng mga target ng mga vectors, na kung saan ay binuo sa pamamagitan ng malakihan, automated na mga teknolohiya. Ang pinagsamang koleksyon ng mouse es cell sa knockouts sa 8500 mga genes ay kapaki-pakinabang para sa paggawa ng mga Mice ng knockout.
Iba pang mga mananaliksik ay magagawang upang makakuha ng mga cell ng es at ang mga vectors, na kung saan ay maaaring gamitin sa matulin at mahusay na upang gumawa ng mga live na linya ng Mice knockout para sa paggamit sa mga pag-aaral biomedical. Sa panahon ng unang bahagi ng proyekto, ang es linya ng cell at vectors na ginagamit upang mutate ang genes ay magagamit mula sa mga grantees na ginawa sa kanila. Sa karagdagan, ang NIH ay naghahanda sa isyu ng panghihingi para sa isang programa upang ipatupad ang isang Knockout Mouse repositoryo ng Project, na pinondohan sa susunod na taon at kung saan ang lahat ng mga materyales na ito ay magagamit sa buong pang-agham na komunidad.
Isa pang mahalagang bahagi ng pagsisikap ay ang koleksyon at koordinasyon ng mga data. Sa ilalim ng pamumuno ng Martin Ringwald, Ph.D., ang Jackson Laboratory ay magse-set up ng isang Data Center koordinasyon para sa mga Proyekto ng Knockout Mouse. Ang sentro ay mangolekta ng impormasyon na magpapahintulot sa ang pananaliksik na komunidad upang subaybayan ng pag-iiskedyul at pag-unlad ng produksyon ng knockout. Sentro ay maglingkod bilang isang sentral na mapagkukunan ng impormasyon para sa lahat ng magagamit na pampublikong mutants knockout at isama sa iba pang mga database na naglalaman ng sequence ng DNA ng mouse, ang karagdagang impormasyon sa mga genetika ng mouse at impormasyon sa pisikal at biochemical mga katangian ng Mice knockout.
Sa ilalim ang dalawang matulungin mga kasunduan na pinangangasiwaan ng sa National Institute sa Drug Abuse (NIDA), Klaus Kaestner, Ph.D., at ang kanyang mga kasamahan sa University of Pennsylvania ay tumutok sa pagbuo ng mga paraan upang lumikha ng mga linya es cell na angkop para sa mataas na throughput gene targeting o tigil sa C57BL / 6, ang pilay ng mouse ginamit pinaka-tinatanggap ng pang-agham na komunidad. Sila ay sumali sa pagsisikap na ito sa pamamagitan ng Andras Nagy, Ph.D., at ang kanyang mga kasamahan sa Samuel Lunenfeld Research Institute. Sa karagdagan, Regeneron ay makakatanggap ng mga pondo sa optimize ang umiiral es cell linya para sa C57BL / 6 pilay at ang pagmamay-ari na daluyan ng paglago, ang parehong na kung saan ay ibinigay sa CHORI-humantong koponan para sa paggamit sa Project Knockout Mouse.
"Pagbuo ng mga linya ng es cell na maaaring magamit upang gumawa ng mga mutants sa C57BL / 6 pilay ay isang mahalagang hakbang na pasulong sa capitalizing sa malawak na halaga ng impormasyon na nakuha mula sa mga taon ng pananaliksik na nagawa sa pilay mouse na ito," sabi ni NIDA Director Nora D. Volkow, MD