Os ciclos de vida de muitos vírus incluem uma fase do auto-conjunto em que um motor molecular poderoso deve embalar o genoma do ADN no escudo pré-formado do vírus (o capsid). Como controla este repto intrincado foi sujeito ao debate, mas nós sabemos que as passagens do ADN no escudo do capsid através de um canal formado por uma estrutura chamaram o conector. Os Cientistas especularam que a rotação do complexo do conector pôde alimentar o ADN no capsid enquanto gira.
Na pesquisa nova publicada em linha esta semana no acesso aberto gire a Biologia de PLoS, os pesquisadores Thorsten Hugel, o presente de Jens Michaelis, de Craig Hetherington, e de Carlos Bustamante sua investigação detalhada em como o bacteriófago f29 do Bacillus-subtilis comprime seu ADN no capsid depois da réplica.
Usando seu sistema inovativo, Hugel e os colegas podiam observar capsids porque embala seu ADN para testar directamente a hipótese da rotação do conector. Encontraram que é mais do que provavelmente não o mecanismo por que o ADN é embalado. Pesquisadores a polarização combinada eles da fluorescência da único-molécula com “a pinça magnética” para colar a extremidade do capsid o mais distante do furo a uma corrediça usando anticorpos, e então prolonga o ADN que está sendo empacotado no sentido oposto anexando um grânulo magnético a sua extremidade fraca e aplicando um campo magnético. Importante, igualmente etiquetaram o complexo do conector com as moléculas de tintura fluorescente assim que poderiam observar seu movimento usando a espectroscopia da polarização da fluorescência da único-molécula.
Os pesquisadores olharam então o movimento do conector durante o ADN que empacota em seis mutantes f29. Após ter anexado as moléculas fluorescentes ao complexo do conector, ajustaram os mutantes para trabalhar o ADN de empacotamento em uma câmara do fluxo. Enquanto os conectores funcionaram, os pesquisadores brilharam a luz homogênea polarizada neles e gravaram o teste padrão da fluorescência produzido em dois canais perpendicularmente a um outro.