Nieuwe methodes om specifieke proteïnen te creëren en te ontdekken

In hun inheemse vorm, zijn duizenden geassorteerde proteïnen in ons lichaam vrijwel niet te onderscheiden.

De Wetenschappers die de eigenschappen en de functies van specifieke proteïnen willen onderzoeken, evenals de activiteiten van individuele genen, moeten zich op chemische markeringen baseren om te manipuleren en hen visualiseren. De versie van Deze maand van de Koude Protocollen van de Haven van de Lente benadrukt methodes om specifieke proteïnen, evenals te creëren en te ontdekken voor het kenmerken van de activiteiten van specifieke genen tijdens embryonale ontwikkeling. Twee van de methodes zijn vrij beschikbare online.

Één van de vrij beschikbare methodes beschrijft hoe te om een kleine markering, genoemd GST (glutathione- S - transferase), aan een specifieke proteïne van belang vast te maken. Dit wordt verwezenlijkt door bacteriën te kweken die de opeenvolging van DNA voor de markering GST naast het gen voor de proteïne van belang bevatten. Wanneer de bacteriën groeien, drukken zij de „GST fusieproteïne uit,“ die uit een markering GST in bijlage aan de gewenste proteïne bestaat. Gebruikend een chemisch product (glutathione) dat specifiek aan GST bindt, de GST fusieproteïnen kan gemakkelijk meer in detail worden gesekwestreerd en worden bestudeerd.

Om de activiteit van een bepaald gen tijdens embryonale ontwikkeling te testen, kunnen de muizen worden gebouwd om een „geroepen die verslaggevers“ proteïne te produceren - galactosidase, die als volmacht voor de proteïne functioneert normaal door het gen van belang wordt geproduceerd. De tweede beschikbare methode beschrijft vrij een strategie om die transgenic muisembryo's te bevlekken worden gebouwd om uit te drukken - galactosidase proteïne. Zodra bevlekt, de weefsels met - galactosidase produceert een briljant blauw pigment, toestaand onderzoekers om te visualiseren waar en wanneer een gen van belang tijdens embryonale ontwikkeling wordt uitgedrukt.

http://www.cshl.org