Nuovi metodi per la creazione e la rilevazione delle proteine specifiche

Nel loro modulo indigeno, migliaia di proteine assortite nel nostro organismo sono virtualmente indistinguibili.

Gli Scienziati che vogliono esaminare i beni e le funzioni delle proteine specifiche come pure le attività di diversi geni, devono contare sui tag chimici per manipolare e visualizzarli. La versione di Questo mese dei Protocolli Freddi del Porto della Sorgente evidenzia i metodi per la creazione e la rilevazione delle proteine specifiche come pure per la caratterizzazione delle attività dei geni specifici durante lo sviluppo embrionale. Due dei metodi sono liberamente accessibili in linea.

Uno dei metodi liberamente disponibili descrive come fissare un piccolo tag, chiamato GST (glutatione S - transferasi), ad una proteina specifica di interesse. Ciò è compiuta crescente i batteri che contengono la sequenza del DNA per il tag di GST adiacente al gene per la proteina di interesse. Quando i batteri si sviluppano, esprimono “la proteina di fusione di GST,„ che consiste di un tag di GST fissato alla proteina desiderata. Facendo Uso di un prodotto chimico (glutatione) quel lega specificamente a GST, le proteine di fusione di GST possono essere sequestrate e studiate facilmente più dettagliatamente.

Per verificare l'attività di determinato gene durante lo sviluppo embrionale, i mouse possono essere costruiti per produrre una proteina “del reporter„ chiamata - galattosidasi, che funziona come proxy per la proteina prodotta normalmente dal gene di interesse. Il secondo metodo disponibile descrive liberamente una strategia per la macchiatura degli embrioni transgenici del mouse costruiti per esprimere - la proteina della galattosidasi. Una Volta Che macchiato, i tessuti con - i prodotti della galattosidasi un pigmento blu brillante, permettendo che i ricercatori visualizzino dove e quando un gene di interesse è espresso durante lo sviluppo embrionale.

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