Paraan para sa pagmamarka ng mga molecule upang makilala ang mga alterations gene at metabolic shifts

Pisikal alterations ng DNA sa chromosomes ay maaaring maging sanhi ng malubhang sakit tulad ng Down sindrom, Prader-Willi sindrom, o kanser.

Gayundin, ang mga pagbabago sa physiological kapaligiran ng mga cell, na may mga gamot o toxins, halimbawa, maaari baguhin ang kanilang mga metabolic output. Upang subaybayan ang mga proseso, ang mga siyentipiko ay kailangan paraan upang markahan ang mga genes at ang kanilang mga produkto sa protina. Ang release ng buwan na ito ng Cold Spring Harbor protocol (www.cshprotocols.org) tampok malayang magagamit na pamamaraan para sa pagmamarka ng mga molecule upang makilala ang mga alterations gene at metabolic shifts.

Ang unang paraan ( http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/10/pdb.prot4743 ) ay naglalarawan kung paano lumaki ang mga cell mula sa bacteria, lebadura, insekto, o mammals sa mga media na naglalaman ng mga matatag isotope nitrogen- 15. Bilang mga cell lumago, gumawa sila ng nagbubuhat proteins na kasama ang nitrogen-15, isang marker na distinguishes ang bagong nabuo metabolic produkto mula sa mga pre-umiiral na na mga. Ang mga pagkakaiba sa pagitan ng mga cell na ito at "normal" na mga cell (lumaki sa media nang walang nitrogen-15) ay maaaring quantified gamit ang isang pamamaraan na tinatawag na mass spectrometry.

Upang makilala ang mga istraktura na mga tampok at abnormalities sa chromosomes, ang mga siyentipiko ay kailangan na i-tag ang mga probes sa DNA sa mga visual na marker. Ang ikalawang malayang magagamit na pamamaraan ( http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/10/pdb.prot4730) naglalarawan kung paano i-label ang DNA probes sa fluorescent marker ng ​​anim na iba't ibang kulay, na span sa nakikitang spectrum. Ng mga may label na na DNA probes ay maaaring gamitin nang sabay-sabay sa Isda (fluorescent sa lugar ng kinaroroonan paghahalo ng lahi) eksperimento, na kung saan ang mga probes magbigkis sa mga tiyak na chromosomal rehiyon ng interes. Ang mga makulay chromosomes ay maaaring makita sa ilalim ng isang mikroskopyo.

http://www.cshl.org