Métodos para marcar moléculas para identificar alterações genéticas e as mudanças metabólicas

Alterações físicas do DNA nos cromossomos pode causar doenças graves como a síndrome de Down, síndrome de Prader-Willi, ou câncer.

Da mesma forma, mudanças no ambiente fisiológico das células, com drogas ou toxinas, por exemplo, pode alterar sua produção metabólica. Para acompanhar estes processos, os cientistas precisam de maneiras para marcar genes e seus produtos protéicos. Liberação deste mês de Cold Spring Harbor Protocolos ( www.cshprotocols.org ) apresenta métodos disponíveis gratuitamente para marcação de moléculas para identificar alterações genéticas e mudanças metabólicas.

O primeiro método ( http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/10/pdb.prot4743 ) descreve como cultivar células de bactérias, fungos, insetos, mamíferos ou em meios contendo o isótopo estável de nitrogênio 15. Como as células crescem, produzem proteínas que incluem nascentes de nitrogênio-15, um marcador que distingue recém-formado produtos metabólicos do pré-existentes. As diferenças entre essas células e "normal" células (crescido em meio sem nitrogênio-15) pode então ser quantificado usando uma técnica chamada espectrometria de massa.

Para identificar as características estruturais e anormalidades nos cromossomos, os cientistas precisam tag sondas de DNA com marcadores visual. O segundo método livremente disponível ( http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/10/pdb.prot4730 ) descreve como rótulo sondas de DNA com marcadores fluorescentes de seis cores diferentes, que abrangem todo o espectro visível. Estas sondas DNA rotulados podem ser usados ​​simultaneamente em FISH (hibridização fluorescente in situ) experimentos, durante os quais as sondas específicas se ligam a regiões cromossômicas de interesse. Os cromossomos coloridos podem ser vistos sob um microscópio.

http://www.cshl.org