Metoder för att markera molekylar för att identifiera genförändringar och metabolic förskjutningar

Läkarundersökningförändringar av DNA i kromosomer kan orsaka allvarliga sjukdomar liksom det Down Syndrome, Prader-Willi syndromet eller cancer.

Jämväl kan ändringar till den fysiologiska miljön av celler, med droger eller toxins, till exempel, förändra deras tillverkade metabolic. Att spåra dessa bearbetar, forskarebehovsväg att markera gener och deras proteinprodukter. Denna månad frigörare av Förkylning Fjädrar för HamnProtokoll (www.cshprotocols.org) för särdrag tillgängliga metoder fritt för att markera molekylar för att identifiera genförändringar och metabolic förskjutningar.

Den första metoden (http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/10/pdb.prot4743) beskriver hur man växer celler från bakterier, jäst, kryp eller däggdjur i massmedia som innehåller den stabila isotopen nitrogen-15. Som cellerna växer, bildade de begynnes proteiner för jordbruksprodukter, som inkluderar nitrogen-15, en markör, som skiljer nyligen, metabolic produkter från pre-existerande. Skillnaderna mellan dessa celler och ”det normala” celler (som är fullvuxna i massmedia utan nitrogen-15) kan därefter kvantifieras genom att använda en kallad teknik samlas spectrometry.

Att identifiera strukturella särdrag och abnormalities i kromosomer behöver forskare att märka DNA-sonder med visuellt hjälpmedelmarkörer. För understödja den tillgängliga metoden fritt (http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/10/pdb.prot4730) beskriver hur man märker DNA-sonder med fluorescerande markörer av sex olika färgar, som spänner över den synliga spectrumen. Dessa märkte DNA-sonder kan användas samtidigt i experiment för FISKEN (som var fluorescerande i situhybridization), som sondröran till specifika chromosomal regioner av intresserar under. De färgrika kromosomerna kan därefter beskådas under ett mikroskop.

http://www.cshl.org