Forskare på Universitetar av Illinois har framkallat en metod för att odla däggdjurs- neurons i kammare som inte mycket är större än neuronsna sig själv.
De nya att närma sig fördjupa lifespanen av neuronsna på mycket låga tätheter, kliver ett nödvändigt in mot framkallning av en metod för att studera tillväxten och uppförandet av individhjärnceller.
Tekniken beskrivas denna månad i föra journal över av det Kungliga Samhället av Kemi - Labb på en Gå i flisor.
”Greeteds Detta ska att finna mycket positivt av neurosciencegemenskapen,”, sade Martha Gillette, som är en författare på studien och huvudet av cellen och den utvecklings- biologiavdelningen på Illinois. ”Är Detta driftig begränsar av vad du kan göra med neurons i kultur.”,
Att Växa livsdugliga däggdjurs- neurons på låg täthet i en konstgjord miljö är ingen lätt uppgift. Genom Att Använda postnatal neurons tillfogar endast till utmaningen, sade Gillette, därför att dessa celler är extremt känsliga till miljö- villkorar.
Alla neurons rely på en stödjatillförsel av proteiner, och annat ”trophic dela upp i faktorer” gåva i den extracellular vätskan. Dessa dela upp i faktorer avsöndras av neuronsna sig själv eller av serviceceller, liksom gliaen. Detta är därför neurons ansar för att göra bäst när de är fullvuxna på kicken - täthet och i närvaroen av andra hjärnceller. Men en tät eller komplex blandning av celler försvårar uppgiften av att karakterisera uppförandet av individneurons.
En teknik för att hålla neural kulturer vid liv är att växa cellerna i ett medel, som innehåller serumen, eller blodplasma. Detta ”, förorenar” förhöjningar viabilityen av celler som är fullvuxna på låg täthet, men den också kulturen, danande det som är svårt att bestämma vilka vikter producerades av cellerna och vilket kom från serumen.
De som hoppas för att förstå de cell- beskärningarna av trophic, dela upp i faktorer i den skulle hjärnan gynnar från en teknik som låter dem mäta det kemiskt tillverkar av individceller. Forskninglaget gjorde framsteg in mot detta mål, genom att tilltala några nyckel- hinder.
Först besegrar de skalapd forskarna storleksanpassa av denfyllda van vid hållen för kammare cellerna. Kemidoktoranden Matthew Stewart gjorde de små kammarna ut ur en gjuten gel av polydimethylsiloxane (PDMS). Den förminskande kammaren storleksanpassar också förminskande - vid flera beställer av storlek - beloppet av vätska runt om cellerna, sade att Bioteknik Centrerar direktören Jonathan Sweedler, en författare på studien. Denna ”miniatyrisering av ska experimentella arkitekturer” gör det lättare att identifiera och mäta vikterna som är utsläppt vid cellerna, därför att dessa ”releasates” är mindre som är utspädda.
”Om du kommer med väggarna in, och du gör en miljö som cell-storleksanpassas, kanaliserar är nu sådan att du tvinger releasatesna till fysiologiska koncentrationer, även på det jämnt av en singelcell,”, sade Sweedler.
Understödja forskarna ökade renheten av det materiella van vid bildar kammarna. Cell och utvecklings- biologidoktorandLarry Millet som är utsatta PDMSEN till en serie av kemiska bad till extraktimpurities som dödade cellerna.
Millet framkallade också en metod för gradvist att perfusing neuronsna med serum-fritt massmedia, en teknik som resupplies uttömda nutrients och tar bort cell- förlorada produkter. Perfusiontekniken låter forskarna till mot efterkrav och analyserar också andra cell- secretions - ett nyckel- till att identifiera de biochemical bidragen av individceller.