Het Bekijken van kleurstof-ingepakte blaasjes veroorzaakt hen om te exploderen

Het is een al lang bestaande vraag: Kan enkel de handeling van het waarnemen van een experiment de resultaten, Volgens een nieuwe studie door Rockefeller is de Universitaire beïnvloeden wetenschappers, als het experiment een fluorescente kleurstof genoemd acridine sinaasappel gebruikt, het antwoord ja het weergalmen.“

De Cellen gebruiken een proces genoemd exocytosis om verbindend blaasjeshoogtepunt van proteïnen, neurotransmitters en andere molecules aan hun buitenmembraan te leveren en verder. Onder andere, zijn deze kleine chemische pakketten essentieel voor cel-aan-cel mededeling. Zo hebben de onderzoekers geinteresseerd in betere begripexocytosis acridine sinaasappel gebruikt om de blaasjes te etiketteren in een poging om het proces waar te nemen. Omdat de kleurstof opgesloten in veelvoudige blaasjes wordt en zijn fluorescentie op vrijmaking van de blaasjes verhoogt, is de resulterende kenmerkende flits beschouwd als een stempel van exocytosis beeldspraak.

Maar het onderzoek dat in de Werkzaamheden van de Nationale Academie van Wetenschappen door Sanford Simon, hoofd wordt gepubliceerd van het Laboratorium van Cellulaire Biofysica, en onderzoekmedewerker Professor Jyoti Jaiswal, toont aan dat de kenmerkende acridine oranje flits het exclusieve resultaat van exocytosis helemaal niet is. In Plaats Daarvan, veroorzaakte het licht van de microscoop ook blaasjes om in een proces te barsten dat als lysis wordt bekend. „Niet alleen doe het concentraat van kleurstofmolecules in blaasjes maar bij hogere concentraties, heeft het dat het licht acridine sinaasappel kan veroorzaken lyse hen,“ Jaiswal zegt geweten. Enkel heeft het bekijken de blaasjes door een microscoop het potentieel om lipidemembranen te onderbreken.

Terwijl het doen van een experiment in 1992, gebruikte Simon acridine sinaasappel aan studieexocytosis en zag enkel wat hij dacht. „20 tot 30 seconden, was Ik extatisch,“ hij zegt. „Maar anderzijds realiseerde Ik dat het niet noodzakelijk betekende wij exocytosis bekeken. Wij misschien creeerden enkel photodamage.“ Zijn laboratorium heeft sindsdien andere middelen gebruikt om het proces te bestuderen.

Dan wekte een recente reeks documenten, waarin de auteurs acridine sinaasappel gebruikten om calcium-teweeggebrachte exocytosis in astrocytes te onderzoeken, de verdenkingen van Simon en van Jaiswal. Astrocytes is kleine, star-shaped glial cellen die deel van het de steunnetwerk van het neurale systeem uitmaken; omdat hun rol in hersenenfysiologie en neurale regelgeving slechts enkel begint worden gericht, is het begrip van exocytosis in deze cellen bijzonder belangrijk. Dat deden de onderzoekers Rockefeller hun eigen experimenten met acridine sinaasappel. Zij vonden dat toen zij door de microscoop keken zij, inderdaad, heldere flitsen van kleurstof konden zien die eruit zagen alsof de blaasjes met het het plasmamembraan van de cel smolten. Maar toen zij het microscoopgebied naar een verschillend gebied van de cel verplaatsten, zagen zij een andere vlaag van vuurwerk, bewijs dat het licht van de microscoop de acridine oranje-gevulde blaasjes ertoe aanzette lyse.

Dit zet de vroegere acridine sinaasappel, exocytosis experimenten in vraag, zegt Jaiswal. „Gebruikend acridine oranje middelen dat de verantwoordelijkheid op de persoon is die het experiment doen bewijzen dat welk zij, aangaande het zien fusie.“ zijn En dat was precies welk hij en Simon gingen doen. tussen exocytosis en weergave-veroorzaakte lysis te onderscheiden, merkt Simon op dat het belangrijk is om de resultaten te kwantificeren. Zo brachten de twee onderzoekers een combinatie experimentele en wiskundige technieken samen die dan konden worden gebruikt om tussen blaasjes te onderscheiden die van die lysing die met het membraan smelten. Door de proteïne van het blaasjemembraan met een verschillende, nondisruptive teller fluorescently te etiketteren, en te kwantificeren hoe de deeltjes verspreidden, konden zij tussen de twee processen onderscheid maken en vinden dat calcium-teweeggebrachte exocytosis in astrocytes voorkomt, niet enkel aan de overdreven graad het acridine sinaasappel gebruikend had geleken.

In feite, konden Jaiswal en Simon zelfs minstens één van de astrocyteorganellen in het nauw drijven die dit soort exocytosis kunnen ondergaan: lysosomes. Exocytosis van deze verbindende compartimenten is reeds gekend om een rol in immuniteit en helende gewonde cellen te spelen, zodat verstrekken de nieuwe bevindingen een andere weg voor onderzoekers om te achtervolgen. „Er is reeds een lichaam van literatuur op lysosome exocytosis en zijn rollen, en wij hebben hoe het heeft geregeld,“ Jaiswal zeggen bekeken. „Nu, is al dat literatuur relevant voor astrocytebiologie, ook.“ geworden

http://www.rockefeller.edu/