Es ist eine althergebrachte Frage: Gerade Kann die Tat des Beobachtens eines Experimentaffektes die Ergebnisse, Entsprechend einer neuen Studie durch Rockefeller-Hochschulwissenschaftler, wenn das Experiment eine Leuchtstofffarbe verwendet, die Acridinorange genannt wird, die Antwort ist ja widerhallen.“
Zellen verwenden einen Prozess, der Exocytosis, um die membrangebundenen Bäschen zu entbinden genannt wird, die von den Proteinen, von den Neurotransmittern und von anderen Molekülen zu ihrer äußeren Membran und jenseits voll sind. Unter anderem sind diese kleinen chemischen Pakete für Zelle-zuzellennachrichtenübermittlung wesentlich. So haben die Forscher, die an besserem Verständnisexocytosis interessiert werden, Acridinorange verwendet, um die Bäschen zu beschriften, um den Prozess zu beobachten. Weil die Farbe in den mehrfachen Bäschen eingeschlossen erhält und seine Fluoreszenz nach Freigabe von den Bäschen erhöht, hat das resultierende charakteristische Blinken als einen Stempel von Exocytosisbildern gegolten.
Aber die Forschung, die in den Verfahren der National Academy Of Sciences Von Sanford Simon, Kopf des Labors der Zellulären Biophysik und Professor des wissenschaftlichen Mitarbeiters Jyoti Jaiswal veröffentlicht wird, zeigt, dass das orange Blinken des charakteristischen Acridins nicht das exklusive Ergebnis des Exocytosis überhaupt ist. Stattdessen veranlaßte Leuchte vom Mikroskop auch Bäschen, in einem Prozess zu bersten, der als Zerstörung bekannt ist. „Tun Nicht nur die Farbenmoleküle sich konzentrieren in den Bäschen, aber, bei höheren Konzentrationen, hat sie, dass Leuchte Acridinorange veranlassen kann, sie aufzulösen,“ Jaiswal sagt gewusst. Die Bäschen durch ein Mikroskop Gerade betrachten hat das Potenzial, Lipidmembranen zu stören.
Beim Handeln eines Experimentes im Jahre 1992, verwendete Simon Acridinorange, um Exocytosis und Säge zu studieren, gerade was er erwartete. „Für 20 bis 30 Sekunden, war Ich ekstatisch,“ sagt er. „Aber andererseits stellte Ich fest, dass es nicht notwendigerweise bedeutete, dass wir Exocytosis betrachteten. Wir vielleicht erstellten gerade photodamage.“ Sein Labor hat seit dem andere Mittel verwendet, den Prozess zu studieren.
Dann Kalzium-startete eine neue Reihe Papiere, in denen die Autoren Acridinorange verwendeten, um zu erforschen, Exocytosis in den Astrocytes, weckte Simon- und Jaiswal's-Misstrauen. Astrocytes sind kleine, sternförmige Gliazellen, die ein Teil des Netzes der neuralen Anlage Stützsind; weil ihre Rolle in der Gehirnphysiologie und in der neuralen Regelung nur gerade anfängt adressiert zu werden, ist Verständnisexocytosis in diesen Zellen besonders wichtig. So taten die Rockefeller-Forscher ihre eigenen Experimente mit Acridinorange. Sie fanden, dass, als sie durch das Mikroskop schauten, sie helle Blinken der Farbe tatsächlich sehen konnten, die schauten, als ob die Bäschen mit der Plasmamembran der Zelle fixierten. Aber, als sie den Mikroskopbereich auf einen anderen Bereich der Zelle verschoben, sahen sie eine andere Aufregung von Feuerwerken, Beweis, dass Leuchte vom Mikroskop die orange-gefüllten Bäschen des Acridins aufforderte aufzulösen.
Dieses setzt die frühere Acridinorange, Exocytosisexperimente in Frage, Jaiswal sagt. „Unter Verwendung des orange Acridins bedeutet, dass die Last auf der Person ist, die das Experiment tut, um zu prüfen, dass, was sie, bezüglich des Sehens sind Fusion.“ Und das war genau, was er und Simon fortfuhren, zu tun. Um zwischen Exocytosis und Darstellung-induzierter Zerstörung zu unterscheiden, beachtet Simon dass es wichtig ist die Ergebnisse mengenmäßig zu bestimmen. So fügten die zwei Forscher eine Kombination von experimentellen und mathematischen Techniken zusammen, die dann verwendet werden konnten, um zwischen Bäschen zu unterscheiden, die von denen auflösen, die mit der Membran fixieren. Indem sie Leuchtstoff das Bäschenmembranprotein mit einer anderen, unschädlichen Markierung und dem Mengenmäßig bestimmen beschrifteten, wie die Partikel zerstreuten, waren sie in der Lage, zwischen den zwei Prozessen zu unterscheiden und, dass Kalzium-gestarteter Exocytosis in den Astrocytes auftritt, gerade nicht zum übertriebenen Grad zu finden, den es unter Verwendung der Acridinorange erschienen war.
Tatsächlich waren Jaiswal und Simon sogar, eins der mindestens Astrocyteorganellen unten festzustecken, die diese Art von Exocytosis durchmachen können: Lysosomen. Exocytosis dieser membrangebundenen Fächer bekannt bereits, um eine Rolle in der Immunität zu spielen und verletzte Zellen Heilens, also stellen die neuen Ergebnisse eine andere Allee zur Verfügung, damit Forscher ausüben. „Es gibt bereits ein Gehäuse der Literatur auf Lysosom Exocytosis und seinen Rollen, und wir haben, wie es geregelt hat,“ Jaiswal sagen betrachtet. „Jetzt, alle, die Literatur zur Astrocytebiologie relevant geworden ist, auch.“
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