Это давний вопрос: можно просто акт наблюдения влияют на результаты, в соответствии с новое исследование ученых Рокфеллеровского университета, эксперимент, если эксперимент использует флуоресцентного красителя, называется Акридин, оранжевый, оглушительный Да.»
Клетки использовать процесс под названием Экзоцитоз для привязанных мембраны везикулы белков, нейротрансмиттеры и другие молекулы для их внешней мембраны и за его пределами. Среди прочего эти маленькие химические пакеты являются жизненно важное значение для ячейки для сотовой связи. Так что исследователей, заинтересованных в лучшего понимания Экзоцитоз используют Акридин оранжевый для обозначения пузырьков в попытке наблюдать за процессом. Потому что краситель получает, оказавшихся в несколько пузырьков и увеличивает его Флуоресценция после освобождения из пузырьков, результате характерной flash считается отличительной Экзоцитоз изображений.
Но исследования опубликованы в работе Национальной академии наук , Сэнфорд Симон, руководитель лаборатории биофизики клеточных и научный сотрудник профессор Джиоти Джайсвал, показывает, что характерным Акридин оранжевый флэш-не является исключительно результатом Экзоцитоз вообще. Вместо этого свет от Микроскоп также вызывает везикулы всплеск в процесс, известный как лизис."Не только сделать красителях молекулы сосредоточиться в везикулы но, в более высоких концентрациях, известно, что свет может привести к Акридин оранжевый лизировать их,"говорит Джайсвал. Просто глядя на везикулы через Микроскоп может нарушить липидов мембран.
Во время эксперимента в 1992 году, Симон используется Акридин оранжевый для изучения Экзоцитоз и увидел, как раз то, что он ожидает."На 20-30 секунд, я был в восторге,"говорит он.»Но потом я понял, что это не обязательно означает, что мы смотреть Экзоцитоз. Мы возможно только создание photodamage». С тех пор его лаборатории использовала другие средства для изучения процесса.
Затем недавней серии документов, в которых авторы использовали Акридин оранжевый для изучения кальция сработал Экзоцитоз в astrocytes, вызвала Симон и Джайсвал на подозрения. Astrocytes являются небольшие, звезда образный глиальных клеток, которые являются частью системы Организации нейронной сети поддержки; поскольку их роль в физиологии мозга и нейронные регулирование только начинают решаться, Экзоцитоз понимания в этих клетках имеет особенно важное значение. Поэтому исследователи Рокфеллера сделал свои собственные эксперименты с Акридин оранжевый. Они нашли что когда они смотрели через Микроскоп они могли бы, действительно, увидеть яркие вспышки красителя, которые выглядели как будто везикулы фьюзинг с ячейки плазматической мембраны. Но когда они переехали Микроскоп поля в другую область клетки, они видели другой шквал фейерверки, доказательство, что свет от Микроскоп был запроса оранжевый заполнены везикулы Акридин чтобы лизировать.
Это ставит ранее Акридин оранжевый, Экзоцитоз эксперименты в вопрос, Джайсвал говорит.С помощью Акридин оранжевый означает, что возлагается на лицо делает эксперимент доказать, что то, что они вновь видеть фьюжн. " И это именно то, что он и Симон отправился делать. С тем чтобы различия между Экзоцитоз и изображений индуцированных лизис, Симон отмечает, что важно для количественного определения результатов. Таким образом два исследователя воедино сочетание экспериментальных и математических методов, которые можно затем использовать для проведения различий между пузырьков, которые лизировать от тех, которые фьюзинг с мембраны. Fluorescently маркировки мембранных белков пузырьки с другой, надежного маркер, и количественного определения как частицы рассеяны, они смогли проводить различие между этими двумя процессами и обнаружил, что кальций сработал Экзоцитоз происходит в astrocytes, просто не в чрезмерной степени представлялось, с помощью Акридин оранжевый.
В самом деле, даже смогли Сцепляющий вниз по крайней мере один из Астроциты органеллы, которые могут пройти этот вид Экзоцитоз Джайсвал и Симон: lysosomes. Экзоцитоз этих привязанных мембранных отсеков уже известна играть определенную роль в иммунитет и лечение раненых клетки, поэтому еще одним направлением для исследователей проводить новые выводы.»Уже существует свод литературы по Лизосома Экзоцитоз и его роли, и мы посмотрели на как оно регулируется,"говорит Джайсвал."Теперь все что литература стала отношение к Астроциты биологии, слишком".
http://www.Rockefeller.edu/