Det är ett longstanding ifrågasätter: Precis Kan agera av observation av en experimentaffekt resultaten, Enligt en ny studie av Rockefeller Universitetarforskare, om experiment använder en fluorescerande färg som kallas acridineapelsinen, svaret är skalla ja.”,
Celler använder en processaa kallad exocytosis för att leverera membran-destinerade vesicles som är fulla av proteiner, neurotransmitters och andra molekylar till deras yttre membran och det okända. Bland annat är dessa lite kemiska paket livsviktiga för cell-till-cell kommunikation. Så har forskare som intresseras i bättre överenskommelseexocytosis, använt acridineapelsinen för att märka vesiclesna i ett försök att observera det processaa. Därför Att färgen får fångad i multipelvesicles och förhöjningar dess fluorescence på frigörare från vesiclesna, har det pråliga resulterande kännetecken varit ansett en kännemärke av exocytosisbildspråk.
Men forskning som publiceras i Förfarandena av MedborgareAkademin av Vetenskaper av Sanford Simon, huvudet av Laboratoriumet av Cell- Biophysics och forskningassistentprofessorn Jyoti Jaiswal, visar att karakteristiska den pråliga acridineapelsinen inte är artikel med ensamrättresultatet av exocytosis alls. I stället ljust från mikroskopet orsakade också vesicles till bristningen i ett processaa bekant som lysis. ”Gör Inte endast färgmolekylarna koncentrerar i vesicles, utan, på högre koncentrationer, har den bekant, att ljust kan orsaka acridineapelsinen för att lyse dem,” Jaiswal något att säga. När du ser Precis vesiclesna till och med ett mikroskop har det potentiellt som avbryter lipidmembran.
Fördriva göra ett experiment i 1992, använde sågar Simon acridineapelsinen till studieexocytosis och precis vad han förväntade. ”För 20 till 30 understöder, Mig var extatiskt,” honom något att säga. ”Men därefter realiserade Jag att det inte betydde nödvändigtvis att vi såg exocytosis. Vi skapade eventuellt precis photodamage.”, Hans labb har efter använt annat hjälpmedel till studien det processaa.
Därefter calcium-startade väckte en ny serie av legitimationshandlingar, som författarna använde acridineapelsinen för att undersöka i, exocytosis i astrocytes, Simon och Jaiswals misstankar. Astrocytes är lilla stjärna-formade glial celler som är delen av det neural systemets service knyter kontakt; därför att deras roll i hjärnphysiology och neural reglering är endast precis början som ska tilltalas, är överenskommelseexocytosis i dessa celler bestämt viktig. Så gjorde de Rockefeller forskarna deras egna experiment med acridineapelsinen. De grundar att, då de såg till och med mikroskopet de kunde, sannerligen, se ljust exponerar av färg att sett som, om vesiclesna fixerade med cellens plasmamembranet. Men, när de som är rörda mikroskopet, sätter in till ett olikt område av cellen, sågar de en annan kastby av fyrverkerier som är motståndskraftig, som ljust från mikroskopet meddelade de acridine apelsin-fyllda vesiclesna för att lyse.
Detta sätter den föregående acridineapelsinen, exocytosisexperiment in i ifrågasätter, Jaiswal något att säga. ”Genom Att Använda orange hjälpmedel för acridine att onusen är på personen som gör experiment för att bevisa att vad de, beträffande se är fusion.”, Och det var exakt vad han och Simon gick på att göra. För att göra åtskillnad mellan mellan exocytosis och avbilda-framkallad lysis noterar Simon att det är viktigt att kvantifiera resultaten. Så sätter de två forskarna tillsammans en kombination av experimentellt, och matematiska tekniker, som kunde därefter vara van vid, diskriminerar mellan vesicles som lysing från de, som fixerar med membranet. Genom fluorescerande att märka vesiclemembranproteinet med en olik nondisruptive markör och att kvantifiera, hur partiklarna skingrade, var de kompetent att skilja mellan tvåna bearbetar och grundar, att calcium-startad exocytosis uppstår i astrocytes, precis inte till den överdrivna graden som den hade verkat genom att använda acridineapelsinen.
I faktum var Jaiswal och Simon även kompetent att klämma fast besegrar en åtminstone av astrocyteorganellesna som kan genomgå denna sort av exocytosis: lysosomes. Exocytosis av dessa membran-destinerade rum är redan bekant att leka en roll, i immunitet och att läka sårada celler, så det nya rönet ger en annan aveny för att forskare ska förfölja. ”Finns Det redan en förkroppsliga av litteratur på lysosomeexocytosis och dess roller, och vi har sett, hur den har reglerat,” Jaiswal något att säga. ”Nu, alla, som litteratur har blivit relevant till astrocytebiologi, för.”,
http://www.rockefeller.edu/