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小さい蛍光プローブは生体細胞の蛋白質の相互作用を照らします

Published on November 13, 2007 at 4:10 AM · No Comments

生物的分子に付けるのに蛍光性が長く使用されている間、エールで開発される新技術は既存の方法の生物的中断を、性質の化学薬品の生物学のレポートに従って避けている間研究者が急速に生体細胞内の蛋白質の相互作用を検出し、識別するのに小さい蛍光プローブを使用することを可能にします。

蛋白質は 「緑の蛍光蛋白質」の等価異形暗号を使用して一般に (GFP) 付きますが、これらの蛋白質は非常に大きく、頻繁に住むために有毒セルです。 それらはまた集約しがちでそれらと働くこと困難におよびモニタをさせます。 この新しい方法は大きい蛋白質よりもむしろ小さい分子によって、出る蛍光性を使用します。 それは研究者に個々の蛋白質の折られた領域または生きているセルの蛋白質間のパートナーシップ間の複雑な接触の画像を捕獲するより少なく分裂的な方法を与えます。

「私達が生体細胞の画像蛋白質の相互作用できるように、私達のアプローチエールで蛍光蛋白質と関連付けられる問題の多数を」は言いました化学の年長の著者 Alanna Schepartz、ミルトンハリス教授、およびハワード・ヒューズの医学の協会教授をバイパスします。 「これらの分子を使用して私達はおよびまた生きているセルの蛋白質のパートナーシップを検出するために」。正しく折られる私達からの代わりとなるか misfolded 蛋白質を区別してもいいです

各蛋白質はアミノ酸の線形鎖を 「折ることによって」作成される三次元構造です。 1 つの通常形だけ 「各蛋白質のために働きます」。 蛋白質が取る特定の形はアミノ酸とセル内の他のプロセスによって決まります。

Schepartz および彼女のチームは 「profluorescent」 biarsenal の染料と呼出された小さい分子を使用して新しい付くシステムを案出しました。 これらの分子は容易に蛋白質内の特定のアミノ酸の札シーケンスに結合するときセルを入力し、蛍光になります。 単一蛋白質を結合するのにこれらの混合物が約ディケイドの間使用されている間、これは蛋白質間の相互作用を識別するのに使用されていた時最初にあります。

研究者の作戦はセルに遺伝的に設計し、表現した蛋白質の鎖で札の各部分を離れて取付ける 2 部分に染料のためのアミノ酸の札を分割することでした。 それからそれらは染料 -- にさらされたセルを監察しました。 蛋白質が正しく折った一方、札の 2 部分は一緒に来、蛍光混合物は区切、つきました。 蛋白質が普通折らなかったらシグナルがありませんでした。

「提供蛋白質がセル内のパートナーをどのようにに選択するか検出のこの方法重要な洞察力をできます - それらと非常に異なるかもしれない選択は試験管で作りました」、は Schepartz を言いました。 彼女はこの技術が監視しないフォールディングのプロセスをが、ことを強調します -、むしろある特定時にある蛋白質の構造を 「見ます」。

「理論で、目標とするのに私達の技術が使用でき、療法のように非アクティブにするか、選択式にセルの特定の蛋白質の複合体をまたは構造を非常に高リゾリューションで診断目的で視覚化するため」、 Schepartz を言いました。 彼女は技術が Alzheimer またはパーキンソンのような neurodegenerative 病気で misfolding 蛋白質を識別する検出の作戦に適用できることを推測します。

http://www.yale.edu/