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微小的萤光探测阐明在活细胞的蛋白质交往

Published on November 13, 2007 at 4:10 AM · No Comments

当荧光长期用于标记生物分子时,新技术被开发在耶鲁允许研究员使用微小的萤光探测迅速地检测和识别在活细胞内的蛋白质交往,当避免现有的方法的生物中断,根据在本质化学制品生物时的报表。

蛋白质通常标记使用 “绿色萤光蛋白质的”变形 (GFP),但是这些蛋白质非常大并且经常是含毒物的居住细胞。 他们也倾向于综合,使他们难从事与和监控程序。 此新的方法使用一个小的分子散发的荧光,而不是大蛋白质。 它产生研究员一个较不制造混乱的方式获取复杂联络的图象在单个蛋白质的被折叠的地区或合伙企业之间的在一个活细胞的蛋白质之间。

“我们的途径绕过许多问题与萤光蛋白质相关,因此我们能图象在活细胞的蛋白质交往”,说高级作者 Alanna Schepartz化学米尔顿哈里斯教授和霍华德・休斯医疗学院教授在耶鲁。 “使用这些分子我们可以区分从正确地折叠并且检测在活细胞的蛋白质合伙企业的那些的替代或 misfolded 蛋白质”。

每蛋白质是 “折叠”创建的一个三维结构氨基酸其线性链子。 通常仅一形状 “为每蛋白质运作”。 蛋白质采取的特殊形状取决于其氨基酸和在这个细胞内的其他进程。

使用小的分子, Schepartz 和她的小组构想了他们新的标记的系统,称 “profluorescent” biarsenal 染料。 当他们束缚对在蛋白质内时的一个特定氨基酸标签顺序这些分子容易地输入细胞并且变得萤光。 当这些化合物用于大约十年束缚唯一蛋白质时,这是,第一次他们用于识别蛋白质之间的交往。

他们基因上用细胞设计并且表示的研究员的方法是分裂这种染料的氨基酸标签成二个部分,设置这个标签的每个部分离得很远蛋白质链子。 然后他们监控了细胞显示在这种染料。 那里蛋白质正确地折叠了,这个标签的二个部分一起来,并且萤光化合物限制并且打开了。 除非蛋白质通常,折叠了没有信号。

“检测此方法可能提供重要答案到蛋白质如何选择他们的在这个细胞内的合作伙伴 - 可能是非常与那些不同的选择在试管做”, Schepartz 说。 她强调此技术不监控蛋白质折叠的进程 -,但是, “相当看到”到时存在的蛋白质相应一致。

“在原理,我们的技术可能用于瞄准,并且选择性地撤销在细胞的特定蛋白质复杂,比如疗法,或者形象化相应一致在非常高分辨率诊断目的”, Schepartz 说。 她推测技术可能适用于识别蛋白质 misfolding 在象阿耳茨海默氏的或帕金森的 neurodegenerative 疾病的检测方法。

http://www.yale.edu/