Usando ácidos nucleicos esféricos para seguir e tratar a doença

Thought LeadersDr. Chad MirkinDirectorInternational Institute for Nanotechnology

Uma entrevista com Dr. Chade Mirkin, Universidade Northwestern, conduziu daqui até abril Cashin-Garbutt, MILIAMPÈRE (Cantab)

Que são ácidos nucleicos esféricos (SNAs)? Que consiste e como ele difere dos ácidos nucleicos lineares?

Os ácidos nucleicos Esféricos são as estruturas que são feitas tomando um molde do nanoparticle e usando a química para arranjar costas curtos do ADN ou do RNA na superfície daquelas partículas. O núcleo esférico do nanoparticle cria um regime esférico do ADN ou do RNA, similar às bolas pequenas minúsculas de ácidos nucleicos.

Mesmo que as seqüências possam ser idênticas, as propriedades de ácidos nucleicos esféricos são muito diferentes dos ácidos nucleicos lineares. Por exemplo, ADN do ligamento de SNAs ou RNA complementar muito mais firmemente do que ácidos nucleicos lineares.

Isto significa que no contexto da detecção e do uso de SNAs como pontas de prova do diagnóstico, você pode usar uma concentração mais baixa de um alvo do ácido nucleico, por exemplo, associado com uma doença dada. E Assim, estas transformaram-se a base para a sensibilidade alta e igualmente pontas de prova muito altas da selectividade, em ferramentas diagnósticas moleculars.

Como pode SNAs ser usado para a detecção de infecções?

há uma tecnologia chamada o sistema que foi comercializado por Nanosphere, uma empresa que de Verigene Eu tinha enfiado, que foi vendido então a Luminex. O sistema de Verigene é usado para classificar as assinaturas associadas com a doença, doença infecciosa em particular, e nas concentrações muito baixas, significando em pontos muito adiantados do tempo, medir a presença de uma infecção particular. Por exemplo, no sangue.

Isto é importante porque pode então ser usado, por exemplo, para diagnosticar pacientes com sepsia, onde poder diagnosticar é muito cedo realmente importante porque para cada hora que um paciente vai undiagnosed e não tratado, a possibilidade da mortalidade aumenta substancialmente.

A Tecnologia como esta está mudando a maneira que os diagnósticos moleculars são realizados. É uma ferramenta diagnóstica médica do ponto--cuidado muito simples e rápido que permita a detecção de maneira das infecções bacterianas antes dos testes convencionais. Não é necessário atravessar o processo de cultivar a amostra, que tomam uns muitos tempos e, aumentam conseqüentemente o risco paciente.

Tão finalmente, você tem uma ferramenta que seja melhor para o paciente porque você obtem um diagnóstico exacto mais adiantado e melhor para o doutor, porque o doutor não está prescrevendo supèrflua muitos antibióticos desnecessários, desperdiçando o dinheiro, e contribuindo à resistência antibiótica. Em Lugar De a ferramenta pode ser usada para figurar para fora quem têm uma infecção bacteriana e quem não faz;  o tratamento apropriado com medidas eficazes então pode ser tomado.

Que a síntese do SNA envolve?

No caso de desenvolver uma etiqueta biológica, um nanoparticle do ouro é usado para o molde, e o SNA é feito trazendo o molde em contacto com as costas curtos do ADN que podem quimicamente lhe ser ancoradas. No caso do ouro, os grupos de ancoragem são tiolatos.

Nós desenvolvemos um processo que permitisse que você carregue o ADN ou o RNA na superfície de uma partícula às extensões muito altas. A razão que é importante é que força a orientação e dá à arquitetura amba sua forma esférica e igualmente as propriedades que Eu tenho mencionado.

Nanoparticles do Ouro produzidos pela ablação do laser na água pesada. A barra da Escala denota vinte nanômetros (20 o nanômetro)

Pode você por favor esboçar sua próximo conversa em Pittcon 2017 no ` Nano-Permitido Ferramentas In vitro e In vivo Diagnósticas para Seguir e Tratar a Doença'? Que bio-ensaios você estará focalizando sobre?

Em Pittcon Eu estarei centrando-me sobre dois tipos diferentes de bio-ensaios:

  • Baseados no sistema de Verigene
  • Uma nova tecnologia que permita que uma meça o ácido nucleico intra-celular visa -- mRNA

Ambas As tecnologias são baseadas em SNAs, que são as estruturas que podem incorporar uma pilha viva, o ligamento a um alvo particular, neste caso um alvo do mRNA, e induzem ou liberam uma entidade fluorófora da sinalização que ilumine acima a pilha.

Isto permite que você meça então pela primeira vez, o índice genético de pilhas vivas. Além do que a medição do índice genético, as pilhas podem ser diferenciadas basearam em níveis da expressão do mRNA. O lugar do RNA dentro da pilha pode igualmente ser medido, que está excitando especialmente porque ninguém pôde nunca fazer até agora isso em pilhas vivas.

Isto é especialmente interessante porque quando acoplado com uma tecnologia goste do cytometry de fluxo, você podem classificar as pilhas baseadas em diferenças genéticas. O Millipore é uma empresa que comercialize esta tecnologia e produza muitas variações destes tipos de arquiteturas, de modo que os pesquisadores possam começar a olhar, por exemplo, para populações raras da pilha e a seleccionar pilhas de circulação do tumor, na presença das pilhas saudáveis.

Esta transforma-se uma maneira de estudar as pilhas e o número deles. Igualmente permite que você isole-os de modo que você possa os estudar após o facto. Você pode puxá-los longe das populações da pilha da maioria, cultivá-las, e usá-las para compreender as origens de diferenças genéticas. Por exemplo, vista como as pilhas de uma paciente que sofre de cancro respondem aos tipos diferentes de terapêutica.

Esta é uma etapa principal para a medicina personalizada e o aumento de nossas capacidades no que diz respeito a sondar sistemas celulares. É igualmente potencialmente útil para a selecção alta da droga da produção, onde você pode olhar como os tipos diferentes de molécula da droga activam ou suprimem tipos diferentes de genes. Você pode obter um readout visual neste caso, com base no uso desta tecnologia, nós refere como a tecnologia do nano-alargamento. O Millipore comercializou um formulário dos nanoflares que referem como Smart-alargamentos.

Que será o foco de sua segunda conversa em Pittcon 2017, Ácidos Nucleicos Esféricos do ` como Agentes Poderosos de Immunomodulation para a Terapia do Cancro'?

As estruturas do SNA igualmente representam a base para uma classe nova inteira de terapêutica do ácido nucleico. Há três artérias centrais da revelação da droga:

  • Moléculas Pequenas

Os Benefícios são conhecidos, aspirin que é um grande exemplo.

  • Biologics

Sete das dez drogas superiores são baseadas no biologics; estes são anticorpos, arquiteturas proteína-baseadas. Têm muitas vantagens e capacidades que vão além do que as moléculas pequenas oferecem.

  • Medicinas do ácido Nucleico

As pequenas notícias Aqui curtos do ADN ou do RNA são usadas para tratar a doença e atacá-la em suas raizes genéticas.

As drogas Antisentido são baseadas no ADN e usadas para embeber acima o mRNA nas pilhas e para parar a tradução desse RNA e a produção de proteínas que nós associamos com a doença. A ideia atrás de antisentido é que você pode regular as pilhas de uma pessoa e converter uma pilha insalubre em uma pilha saudável batendo para baixo a produção de um tipo específico de proteína.

Veio Então avante a tecnologia do siRNA - um conceito similar no sentido que você está batendo para baixo a produção de tipos específicos de proteínas, mas através dos caminhos diferentes. A ideia de desenvolver a medicina genética é realmente o conceito de um tipo de medicina digital, onde em vez todas as vezes de você precise uma droga que nova você não procura uma molécula pequena nova, você muda a seqüência do ADN ou do RNA que está sendo usado baseado em uma compreensão de caminhos biológicos.

De um ponto de vista conceptual, estas eram tecnologias realmente poderosas. Conduziram à revelação de muitas aproximações comerciais mas tiveram sucesso limitado. A razão que é, para realizar verdadeiramente a medicina digital você precisa coisas múltiplas no jogo. Um é você tem que poder sintetizar o ADN e o RNA, e dois, você tem que poder compreender caminhos.

Estas duas edições têm sido superadas agora; nós sabemos como sintetizar o ADN e o RNA, e agradecimentos ao projecto de genoma humano, nós igualmente sabemos muito sobre os caminhos da doença e atacar tipos diferentes de caminhos para tratar a doença. Mas o terço, e talvez a maioria de exigência importante, são a capacidade para obter o ADN ou o RNA ao local que importa. E isso é o lugar onde a maioria de tentativas foram insuficiente.

Isto é o lugar onde os ácidos nucleicos esféricos são muito importantes. As estruturas do SNA, que têm o equivalente não natural, podem interagir com os sistemas naturais completamente diferentemente do ADN e do RNA nativos de que são derivadas. Quase cada pilha dactilografa dentro seu corpo, a não ser glóbulos vermelhos maduros, reconhece SNAs e interioriza-os ràpida sem a necessidade para agentes do transfection.

Isto é particularmente interessante porque, por exemplo, pôr o ADN ou o RNA normal desnata dentro e os pôr sobre sua pele não os fará ir em suas células epiteliais; mas com ácidos nucleicos esféricos pegá-los-ão ràpida. Esta descoberta abre conseqüentemente a capacidade para criar medicinas tópicas, as medicinas locais, que permitem que você trate muitas doenças.

E nós temos olhado assim esta capacidade em termos dos novos tipos tornando-se de tratamentos para a doença de pele.  Há sobre 200 doenças com uma base genética conhecida. Um pode começar a pensar sobre a criação da terapêutica para o olho, a orelha, o pulmão, a bexiga, e os dois pontos através das aproximações similares.

As propriedades fundamentais de SNAs fazem ácidos nucleicos relevantes para tratar uma vasta gama de problemas médicos nao endereçáveis com os ácidos nucleicos convencionais. As primeiras construções do SNA estão em experimentações humanas para tratar a psoríase.

Como podia SNAs ser usado em vacinas do cancro?

Uma Outra aplicação que nós temos pesquisado é o uso das estruturas como reguladores poderosos do sistema imunitário. SNAs incorporará pilhas imunes, pilhas dendrítico, e se a seqüência está correcta, activarão pedágio-como os receptors, de modo que você possa tomar um animal, ou um paciente em princípio, e activam selectivamente seu sistema imunitário.

Isto permite a criação de formulários novos das vacinas, por exemplo, onde você pode treinar o corpo de uma pessoa para lutar um tipo específico de cancro. Este é o que está acontecendo agora, nós tem uma série inteira de candidatos da droga baseados nesta aproximação, e Eu estarei falando primeiramente sobre o cancro da próstata em Pittcon.

Em princípio as vacinas como esta podiam ser desenvolvidas para tratar muitos tipos diferentes de cancros, incluindo o cancro do cérebro, a bexiga, os dois pontos, e a melanoma.

Que fase da revelação estão as vacinas do cancro do SNA actualmente e que obstáculos ainda precisam de ser superados?

O trabalho vacinal do cancro está a ponto apenas de entrar em ensaios clínicos humanos este ano. A tecnologia foi controlada extensivamente nos animais e provada ser segura, por exemplo, nos primatas.

As experimentações humanas são extremamente importantes. Com uma vacina do cancro, você está modulando o sistema imunitário de uma pessoa e há um risco de criar respostas auto-imunes.

Que são os passos seguintes em sua pesquisa?

Para mim, é toda sobre a compreensão do que faz estas estruturas tão especiais e continuando a compreender como nós podemos construir formulários diferentes de ácidos nucleicos esféricos, e usa as propriedades originais delas para resolver problemas graves na medicina e outras áreas de pesquisa.

Nós sabemos actualmente porque os ácidos nucleicos esféricos são interiorizados ou somos uma pesquisa mais adicional necessário para compreender inteiramente isto?

No momento em que, nós acreditamos que estão reconhecidos pelo que são chamadas os receptors do SCAVENGER; estas são estruturas comuns a muitos tipos da pilha, e são usadas para mover a carga dentro e fora das pilhas.

Foram mostrados igualmente para reconhecer muito mais firmemente e ligar aos ácidos nucleicos esféricos do que ácidos nucleicos lineares, e tão eficazmente nós temos, na parte acidentalmente, descoberto e projetado uma arquitetura que seja reconhecida pela maquinaria biológica natural, os receptors do SCAVENGER que conduzem a sua internalização em uma pilha.

Há diversos papéis que exploram este para tipos diferentes das pilhas, e toda nossa pesquisa é até aqui consistente com essa conclusão.

Que são você que olha para a frente em Pittcon 2017?

É honesta um local de encontro realmente emocionante para qualquer um interessado na química analítica, na instrumentação nova, ou nas técnicas novas associadas com essa instrumentação, e Assim, Eu aprecio particularmente as negociações da fronteira. Mas naturalmente, Eu igualmente aprecio o salão da expo e a vista de toda a nova tecnologia no indicador.

Que Pittcon Pode fazer para Você de AZoNetwork em Vimeo.

Onde podem os leitores encontrar mais informação?

  1. Cuteleiro, J.I.; Auyeung, E.; Mirkin, C.A. “Ácidos Nucleicos Esféricos,” J. Ser. Chem. Soc., 2012, 134, 1376-1391, doi: 10.1021/ja209351u.
  2. Alhasan, A.H.; Kim, D.Y.; Daniel, W.L.; Watson, E.; Meeks, J.J.; Thaxton, C.S.; Mirkin, Perfilamento da Disposição do microRNA do C.A. “Scanometric (Scano-RIM) de Marcadores do Cancro da Próstata que Usam o Nanoparticle Nucleico (SNA) Esférico do Ácido-Ouro Conjuga,” Anal. Chem., 2012, 84, 4153-4160, doi: 10.1021/ac3004055, PMCID; PMC3357313.
  3. Zheng, D.; Giljohann, D.A.; Chen, D.L.; Massich, M.D.; Wang, X. - Q; Iordanov, H.; Mirkin, C.A.; Paller, A.S. “Entrega Tópica de Conjugado Esféricos siRNA-baseados do Nanoparticle do Ácido Nucleico para o Regulamento do Gene,” Proc. Nacional. ACA. Sci. EUA, 2012, 109, 11975-11980, doi: 10.1073/pnas.1118425109, PMCID: PMC3409786.
  4. Jovens, K.L; Scott, A.W.; Hao, L.; Mirkin, S.E.; Liu, G.; Mirkin, C.A. “Ácidos Nucleicos Esféricos Ocos para o Regulamento Intracelular do Gene Baseado Em Escudos Biocompatible do Silicone,” Lett Nano., 2012, 12, 3867-3871, doi: 10.1021/nl3020846, PMCID: PMC3397824.
  5. Zhang, K.; Hao, L.; Hurst, S.J.; Mirkin, C.A. “Ácidos Nucleicos Esféricos Anticorpo-Ligados para a Escolha De Objectivos Celular,” J. Ser. Chem. Soc., 2012, 134, 16488-16491, doi: 10.1021/ja306854d, PMCID: PMC3501255.
  6. Choi, C.H.J.; Hao, L.; Narayan, S.P.; Auyeung, E.; Mirkin, C.A. “Mecanismo para o Endocytosis de Conjugado Esféricos do Nanoparticle do Ácido Nucleico,” Proc. Nacional. ACA. Sci., 2013, 110, 7625-7630, doi: 10.1073/pnas.1305804110, PMCID: PMC3651452.
  7. Jensen, S.A.; Dia, E.S.; Ko, C.H.; Hurley, L.A.; Luciano, J.P.; Kouri, F.M.; Merkel, T.J.; Luthi, A.J.; Patel, P.C.; Cuteleiro, J.I.; Daniel, W.L.; Scott, A.W.; Rotz, M.W.; Meade, T.J.; Giljohann, D.A.; Mirkin, C.A.; Stegh, A.H. “Conjugado Esféricos do Nanoparticle do Ácido Nucleico como uma Terapia RNAi-Baseada para Glioblastoma,” Transporte da Ciência. MED., 2013, 5, 209ra152, doi: 10.1126/scitranslmed.3006839, PMCID: PMC4017940.
  8. Pista, J.S.; McMahon, K.M.; Zhang, X.; Chen, X.; Mirkin, C.A.; Thaxton, C.S.; Kaufman; O D.B. “Knockdown da Intra-Ilhota IKKβ por Conjugado Esféricos do Ácido Nucleico Impede Ferimento Cytokine-Induzido e Aumenta a Sobrevivência do Enxerto,” a Transplantação, 2013, 96, 877-884, doi: 10.1097/TR.0b013e3182a4190e, PMCID: PMC3839058.
  9. Walter, S.R.; Jovens, K.L.; Holanda, J.G.; Gieseck, R.L.; Mirkin, C.A.; Geiger, F.M. “que Conta o Número de Íons do Magnésio Limitados Aos Oligonucleotides Superfície-Imobilizados do Thymine Que Compreendem Ácidos Nucleicos Esféricos,” J. Ser. Chem. Soc., 2013, 135, 17339-17348, doi: 10.1021/ja406551k.
  10. Alhasan, A.H.; Patel, P.C.; Choi, C.H.J.; Mirkin, C.A. “Exosome Encerrou Conjugado Esféricos do Nanoparticle do Ouro do Ácido Nucleico como Agentes Regulamentares Poderosos de MicroRNA,” Pequeno, 2014, 10, 186-192, doi: 10.1002/smll.201302143, PMCID: PMC3947239.
  11. Mirkin, C.A.; Stegh, A.H. “Ácidos Nucleicos Esféricos para a Medicina da Precisão,” Oncotarget, 2014, 5, 9-10, PMCID:  PMC3960185
  12. Wu, X.A.; Choi, C.H.J.; Zhang, C.; Hao, L.; Mirkin, C.A. “Destino Intracelular de Conjugado Esféricos do Nanoparticle do Ácido Nucleico,” J. Ser. Chem. Soc., 2014, 136, 7726-7733, doi: 10.1021/ja503010a, PMCID: PMC4046773.
  13. Vermelho, J.L.; Hao, L.; Wu, X.A.; Briley, W.E.; Mirkin, C.A. “Ácidos Nucleicos Esféricos como uma Plataforma Divergente para Sintetizar Conjugado do RNA-Nanoparticle Com a Ligadura Enzimático,” ACS Nano, 2014, 8, 8837-8843, doi: 10.1021/nn503601s, PMCID: PMC4174098.
  14. Banga, R.J.; Chernyak, N.; Narayan, S.P.; Nguyen, S.T.; Mirkin, C.A. “Ácidos Nucleicos Esféricos Liposomal,” J. Ser. Chem. Soc., 2014, 136, 9866-9869, doi: 10.1021/ja504845f, PMCID: PMC4280063, PMCID: PMC4280063.
  15. Chinen, A.B.; Guan, C.M.; Mirkin, C.A. “Conjugado Esféricos do Nanoparticle do Ácido Nucleico Aumenta a Formação G-Quadruplex e Aumenta Interacções da Proteína de Soro,” Angew Chem., 2014, 54, 527-531, doi: 10.1002/anie.201409211, PMCID: PMC4314381.
  16. Radovic-Moreno, A.F.; Chernyak, N.; Mader, C.C.; Nallagatla, S.; Kang, R.; Hao, L.; Caminhante, D.A.; Halo, T.L.; Merkel, T.J.; Rische, C.; Ananatatmula, S.; Burkhart, M.; Mirkin, C.A.; Gryaznov, S.M. “Ácidos Nucleicos Esféricos Immunomodulatory,” Proc. Nacional. ACA. Sci, 2015, 112, 3892-3897, doi: 10.1073/pnas.1502850112, PMCID: PMC4386353.
  17. Narayan, S.P.; Choi, C.H.J.; Hao, L.; Calabrese, C.M.; Auyeung, E.; Zhang, C. Goor, O.J.G.M.; Mirkin, C.A. “A Tomada Celular Seqüência-Específica de Conjugado Esféricos do Nanoparticle do Ácido Nucleico,” Pequeno, 2015, 11, 4173-4182, doi: 10.1002/smll.2015100027, PMCID: PMC4560454.
  18. Zhang, C.; Hao, L.; Calabrese, C.M.; Zhou, Y.; Choi, C.H.J.; Xing, H.; Mirkin, C.A. “Ácidos Nucleicos Esféricos Biodegradáveis de Copolímero de Bloco da ADN-escova Permite o Regulamento Intracelular Agente-Livre do Gene do Transfection,” Pequeno, 2015, doi 10.1002/smll.201501573.
  19. Randeria, P.S.; Jones, M.R.; Kohlstedt, K.L.; Banga, R.J.; Olvera de la Cruz, M.; Schatz, G.C.; Mirkin, C.A. “Que Controles o Termodinâmica da Hibridação de Ácidos Nucleicos Esféricos?” JACS, 2015, 137, 3486-3489, doi: 10.1021/jacs.5b00670.
  20. Randeria, P.S.; Seeger, M.A.; Wang, X.Q.; Wilson, H.; Navio, D.; Mirkin, C.A.; Paller, A.S. “siRNA-baseou a Cura Esbaforido Danificada dos Ácidos Nucleicos Reverso Esférico em Ratos do Diabético pelo Knockdown da Sintase GM3,” PNAS, 2015, 112, 5573-5578, doi: 10.1073/pnas.1505951112, PMCID: PMC4426446.
  21. Vermelho, J.L.; Sita, T.L.; Hao, L.; Kouri, F.M.; Briley, W.E.; Stegh, A.H.; Mirkin, C.A. “Ácidos Nucleicos Ribozyme-Esféricos,” JACS, 2015, 137, 10528-10531, doi: 10.1021/jacs.5b07104.
  22. Barnaby, S.N.; Perelman, G.A.; Kohlstedt, K.L.; Chinen, A.B.; Schatz, G.C.; Mirkin, Química de Bioconjugate dos Ácidos Nucleicos Esféricos do RNA do C.A. do “Considerações (SNAs) Projecto para”, 2016, 27, 2124-2131, doi: 10.1021/acs.bioconjchem.6b00350, PMCID: PMC5034328.
  23. Wang, X.; Hao, L.; Bu, H. - F.; Scott A.W.; Tian K.; Liu, F.; DePlaen, I.G.; Liu, Y.; Mirkin, C.A.; Bronzeado, X. - D. “Ácido Nucleico Esférico que Visa MicroRNA-99b Aumenta a Expressão Genética MFG-E8 Intestinal e Restaura a Migração de Enterocyte em Ratos Sépticos Lipopolysacchardie-Induzidos,” os Relatórios Científicos, 2016, 6, doi 31687: 10.1038/srep31687.
  24. Sprangers, A.J.; Hao, L.; Banga, R.J.; Mirkin, C.A. “Ácidos Nucleicos Esféricos Liposomal para Regular Noncoding Longo RNAs no Núcleo,” Pequeno, 2017, doi: 10.1002/smll.201602753.

Sobre o Dr. Chade MirkinChade A. Mirkin

O Dr. Chade A. Mirkin é o Director do Instituto Internacional para a Nanotecnologia e o Prof. de George B. Rathmann da Química, Engenharia Química e Biológica, Engenharia Biomedicável, Ciência & Engenharia de Materiais, e Medicina na Universidade Northwestern.

É um químico e um perito mundialmente famoso do nanoscience, que seja sabido para suas descoberta e revelação de ácidos nucleicos esféricos (SNAs) e biodetection SNA-baseado e esquemas terapêuticos, Mergulho-Pena Nanolithography (DPN) e metodologias nanopatterning modilhão-livres relativas, Litografia do Em-Fio (OWL), e Litografia Coaxial (CARVÃO), e contribuições para a síntese supramolecular da química e do nanoparticle.

É o autor sobre de 670 manuscritos e sobre 1.000 solicitudes de patente no mundo inteiro (290 emitidos), e é o fundador das empresas múltiplas, incluindo Nanosphere, AuraSense, e Exicure, que estão comercializando aplicações da nanotecnologia nas ciências da vida e na biomedicina.

Mirkin foi reconhecido com sobre os 100 nacionais e as concessões internacionais, incluindo o Prêmio 2016 de Dan David e o Prêmio inaugural de Sackler na Pesquisa da Convergência. Era um membro do Conselho do Presidente dos Conselheiros na Ciência & na Tecnologia (a Administração de Obama), e um muito de poucos cientistas a ser elegidos a todas as três Academias do Nacional dos E.U. É igualmente um Companheiro da Academia Americana das Artes e das Ciências e da Academia Nacional dos Inventores, entre outros.

Mirkin serviu nos Conselhos Consultivos Editoriais sobre de 20 jornais doutos, incluindo JACS, Angew. Chem., e Adv. Mater.; presentemente, é um Editor Associado de JACS. É o editor fundando do jornal Pequeno, e co-editou livros bestselling múltiplos.

Mirkin guardara um grau de B.S. de Dickinson Faculdade (1986, eleito no Beta Kappa da Phi) e um grau do Ph.D. do Penn. Estado Univ. (1989). Era um Companheiro Pos-doctoral do NSF no MIT antes de transformar-se um professor em Univ Do Noroeste. em 1991.