Advertencia: Esta página es una traducción de esta página originalmente en inglés. Tenga en cuenta ya que las traducciones son generadas por máquinas, no que todos traducción será perfecto. Este sitio Web y sus páginas están destinadas a leerse en inglés. Cualquier traducción de este sitio Web y su páginas Web puede ser imprecisa e inexacta en su totalidad o en parte. Esta traducción se proporciona como una conveniencia.

Un análisis sensible de Pseudovirus para revisar los anticuerpos SARS-CoV-2

El seguro y la flexibilidad de pseudoviruses como herramientas virológicas han soportado su uso en fijar la eficacia y el seguro de vacunas y de agentes terapéuticos contra el coronavirus nuevo 2 (SARS-CoV-2) de la neumonía asiática.

SARS-CoV-2

SARS-CoV-2. Haber de imagen: Kateryna Kon/Shutterstock.com

Ventajas de un sistema del pseudovirus

Pseudoviruses es herramientas excelentes para estudiar la novela y los virus altamente patógenos que requerirían de otra manera instalaciones del laboratorio de un nivel más alto de la seguridad biológica (BSL) de 3 o 4. además de evitar la exposición a los virus altamente contagiosos, el sistema del pseudovirus también se asocian a varias ventajas incluyendo la producción y la facilidad rápidas de la cuantificación.

Además, los virus de la progenie son solamente capaces de experimentar un único ciclo de la réplica, de tal modo fomentan soportar el seguro de este sistema.

¿Cuáles son pseudoviruses?

Pseudoviruses se hace de los componentes que han originado a partir de dos diversos virus. El componente superficial de la glicoproteína es del virus previsto para el estudio, mientras que el genoma de la base interna se deriva típicamente de un virus del vesiculo o de virus.

Algunos ejemplos de los virus que se han utilizado para ofrecer el genoma de la base interna para la generación de los pseudoviruses SARS-CoV-2 incluyen el virus vesicular del virus de la estomatitis vesicular (VSV), así como varios diversos retrovirses incluyendo el virus de inmunodeficiencia humana (HIV), el virus murine de la leucemia (MLV), y el virus felino de la leucemia (FLV).

El sistema del pseudovirus para la investigación

Hasta la fecha, pseudovirus-basado el genoma de la base de un pseudovirus se altera para suprimir las proteínas del virus responsables de facilitar la réplica, incluyendo la glicoproteína nativa. En lugar, una proteína-codificación del reportero para una enzima, tal como luciferase, u otro tipo de proteína fluorescente es incorporada.

Pseudoviruses, por lo tanto, infecta las células susceptibles solamente una vez y no puede experimentar la réplica adicional. Sin embargo, sobre la infección del pseudovirus, la proteína del reportero se expresa con una actividad que se pueda cuantificar sensible según las necesidades.

Para la infección acertada del pseudovirus, las células deben expresar los receptores pertinentes que atan la glicoproteína superficial para permiso el asiento del pseudovirus y. El tener en cuenta la infección de un pseudovirus puede por lo tanto ofrecer los caminos virales apropiados del asiento que son necesarios estudiar el virus contagioso del interés.

Retos en estudiar SARS-CoV-2

En diciembre de 2019 un coronavirus nuevo conocido como SARS-CoV-2 originó en Wuhan, China, y se extendió posteriormente en el globo dando por resultado un pandémico de la enfermedad 2019 del coronavirus (COVID-19). Debido a la naturaleza altamente patógena y transmisible de SARS-CoV-2, pautas de la CDC recomiende que cualquier trabajo de laboratorio realizado con SARS-CoV-2 se debe realizar en un nivel más alto de la seguridad biológica de BSL-3 o -4.

Sin embargo, ambos BSL-3 y -4 laboratorios se limitan a algunas instituciones. Esta limitación restringe la prueba en grande de la eficacia de vacunas y los anticuerpos monoclonales terapéuticos apuntados contra SARS-CoV-2 clavan (s) la glicoproteína. Una opción sería emplear pseudoviruses de SARS-CoV-2 S.

Sistemas de Pseudovirus para estudiar SARS-CoV-2

Desde la aparición de SARS-CoV-2, varias diversas aproximaciones pseudovirus-basadas se han utilizado para estudiar esta enfermedad y para evaluar la eficacia de ciertos agentes terapéuticos. En un estudio reciente, un análisis pseudovirus-basado de la neutralización (PBNA) fue desarrollado para evaluar la neutralización de ciertos anticuerpos contra SARS-CoV-2.

Abreviadamente, el sistema de VSV fue utilizado y confirmado para visualizar la proteína del pico SARS-CoV-2 en la superficie de la partícula de VSV con análisis de la Occidental-mancha blanca /negra. /Once el virus pseudotyped S SARS-CoV-2 fue generado, un total de setenta y cuatro humanos y cuarenta y seis muestras del suero del ratón fueron probadas para evaluar la especificidad del análisis.

El límite de detección para este análisis fue encontrado para ser 22,1 para las muestras humanas y 43,2 para las muestras del ratón, con los valores del atajo fijados como 30 y 50 para las muestras del ser humano y del ratón, respectivamente. Tomado junto, este análisis fue encontrado para tener variaciones inferiores del coeficiente con 15,9% para el análisis del intra-análisis y 16,2% para el análisis del inter-análisis.

Neerukonda y los colegas también han desarrollado un análisis altamente sensible que emplea los pseudoviruses de SARS-CoV-2 S para revisar el suero o el plasma de los pacientes COVID-19 y de los individuos vacunados, así como evalúa la eficacia de anticuerpos monoclonales terapéuticos. En este estudio publicado en PlosOne, los investigadores establecieron los reactivos de la célula y del pseudovirus que producen altos rendimientos e infección del pseudovirus para facilitar la investigación masiva de la escala de anticuerpos y de inhibidores del asiento contra COVID-19.

Para confirmar la utilidad de este análisis de la investigación, los investigadores utilizaron una variedad de células estable 293T que expresa la enzima angiotensina-que convierte humana 2 (ACE2) y la proteasa 2 (TMPRSS2) de la serina de la transmembrana. El atascamiento de la proteína de S en la superficie de SARS-CoV-2 al receptor ACE2 de células media el asiento de este virus en las células de objetivo, así como cataliza la fusión de las membranas celulares virales y. TMPRSS2, así como los cathepsins B y L, son también críticos para el asiento eficiente de SARS-CoV-2 en las células, determinado dentro de las células epiteliales de los pulmones.

Notablemente, éste es un análisis VIH-basado que se ha encontrado para ser más ventajoso que VSV en términos de tiempo requerido para generar los pseudoviruses (2 días comparado con 5-6 días) y para conducto la investigación. Este SARS-CoV-2 PBNA lentiviral y sus reactivos está siendo utilizado actualmente por los investigadores y las dependencias de la salud pública por todo el mundo en una escala extraordinaria para evaluar el potencial de neutralización de inmunorespuestas vacuna-inducidas contra las variantes existentes y emergentes SARS-CoV-2.

Referencias:

  • Neerukonda, S.N., Vassell, R., Herrup, R., y otros (2021). Efectivoses de un análisis lentiviral bien-caracterizado de la neutralización del pseudovirus SARS-CoV-2 usando las células 293T con la expresión estable de ACE2 y de TMPRSS2. Doi 16 de PLOS UNO.: 10.1371/journal.pone.0248348.
  • Huang, S., Tai, C., Hsu, Y., y otros (2020). Fijar el uso de un sistema del pseudovirus para SARS-CoV-2 emergente y reaparecer subtipos del virus de gripe aviar H5 en el revelado vaccíneo. Gorrón biomédico 43(4); 375-387. doi: 10.1016/j.bj.2020.06.003.
  • Nie, J., Li, Q., Wu, J., y otros (2020). Efectivoses y validación de un análisis de la neutralización del pseudovirus para SARS-CoV-2. Microbios emergentes y infecciones 9(1); 680-686. doi: 10.1080/22221751.2020.1743767.

Last Updated: Apr 26, 2021

Benedette Cuffari

Written by

Benedette Cuffari

After completing her Bachelor of Science in Toxicology with two minors in Spanish and Chemistry in 2016, Benedette continued her studies to complete her Master of Science in Toxicology in May of 2018. During graduate school, Benedette investigated the dermatotoxicity of mechlorethamine and bendamustine; two nitrogen mustard alkylating agents that are used in anticancer therapy.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Cuffari, Benedette. (2021, April 26). Un análisis sensible de Pseudovirus para revisar los anticuerpos SARS-CoV-2. News-Medical. Retrieved on June 19, 2021 from https://www.news-medical.net/health/A-Sensitive-Pseudovirus-Assay-for-Screening-SARS-CoV-2-Antibodies.aspx.

  • MLA

    Cuffari, Benedette. "Un análisis sensible de Pseudovirus para revisar los anticuerpos SARS-CoV-2". News-Medical. 19 June 2021. <https://www.news-medical.net/health/A-Sensitive-Pseudovirus-Assay-for-Screening-SARS-CoV-2-Antibodies.aspx>.

  • Chicago

    Cuffari, Benedette. "Un análisis sensible de Pseudovirus para revisar los anticuerpos SARS-CoV-2". News-Medical. https://www.news-medical.net/health/A-Sensitive-Pseudovirus-Assay-for-Screening-SARS-CoV-2-Antibodies.aspx. (accessed June 19, 2021).

  • Harvard

    Cuffari, Benedette. 2021. Un análisis sensible de Pseudovirus para revisar los anticuerpos SARS-CoV-2. News-Medical, viewed 19 June 2021, https://www.news-medical.net/health/A-Sensitive-Pseudovirus-Assay-for-Screening-SARS-CoV-2-Antibodies.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.