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Uma vista geral do Hemagglutination

O Hemagglutination é um ensaio serological para identificar um vírus suspeitado e para detectar anticorpos correspondentes. O ensaio usa glóbulos vermelhos como uma fonte de antígenos.

hemagglutination

Crédito de imagem: Nordic de Soleil/Shutterstock.com

Que é hemagglutination?

O Hemagglutination é uma reacção que cause a aglutinação de glóbulos vermelhos na presença de alguns vírus envolvidos, tais como o virus da gripe. Particularmente, uma glicoproteína no hemagglutinin viral da superfície a saber interage com os glóbulos vermelhos, conduzindo à aglutinação de glóbulos vermelhos e à formação de uma estrutura.

Na ausência de um vírus do envolvimento, glóbulos vermelhos precipitados na parte inferior de um recipiente, formando um ponto vermelho-colorido. Contudo, na presença de um vírus, os grupos vermelhos do glóbulo são dispersados, não formando nenhum ponto vermelho-colorido. Este é o princípio básico de um ensaio do hemagglutination.

Como executar um ensaio do hemagglutination?

Para executar o ensaio do hemagglutination, as amostras biológicas que contêm partículas virais em série são diluídas (diluição 2-fold) e dispensadas em cada um bem de uma placa de microtiter de 96 poços. As partes alíquota seguintes, vermelhas do glóbulo são adicionadas a cada um bem. O princípio básico é aquele após alguma diluição, o ponto vermelho aparecerá na parte inferior do poço.

A diluição a mais alta de uma amostra dada em que se aglutinando é visto é considerada como o titer do hemagglutination. Multiplicando a dobra da diluição, o titer viral pode ser determinado. Geralmente, 1 unidade do hemagglutinin corresponde a 104 partículas virais pelo mililitro da amostra.

O Hemagglutination é um ensaio amplamente utilizado para detectar e titrating o virus da gripe. Um benefício principal deste ensaio é que nenhum equipamento especializado é necessário executar o teste. Embora venha com sensibilidade relativamente mais baixa, o ensaio pode ser usado para a detecção robusta e rápida de vírus.

Que é um ensaio da inibição do hemagglutination?

O ensaio da inibição do Hemagglutination (HIA) é usado para detectar e titrate os anticorpos desenvolvidos contra um vírus. Em HIA, uma ausência de hemagglutination é observada para detectar a presença de anticorpos em uma amostra dada. Mechanistically, vírus-contendo amostras são incubados com as amostras de série-diluídas do soro. Isto permite a interacção entre o antígeno viral e os anticorpos. Mais tarde, as partes alíquota vermelhas do glóbulo são adicionadas à mistura de reacção. Os vírus que têm formado já um complexo com anticorpos serão incapazes de ligar aos glóbulos vermelhos. Isto marca a ausência de hemagglutination.

No caso de um vírus hemagglutinating conhecido, HIA pode ser usado para detectar anticorpos. Inversamente, no caso de um vírus desconhecido, um painel de anticorpos conhecidos pode ser usado para identificar o vírus.  

Embora considerado como um teste rápido e fácil para detectar anticorpos, HIA vem com determinadas desvantagens. Por exemplo, o ensaio não pode ser usado para detectar os anticorpos que não são cruz-reactivos ao subtipo viral específico testado. Neste caso, HIA deve incluir todos os subtipos possíveis de um vírus para detectar eficazmente anticorpos. Isto não é sempre possível para conduzir.

Além disso, há outros aspectos de respostas imunes adaptáveis contra um vírus, incluindo respostas de célula T e respostas do anticorpo dirigidas contra componentes virais diferentes da proteína do hemagglutinin. Estes componentes do sistema imunitário não podem ser detectados usar HIA.

Que é um ensaio passivo do hemagglutination?

No ensaio passivo do hemagglutination, os glóbulos vermelhos recolhidos geralmente dos carneiros, o pintainho, ou o ser humano são revestidos com o antígeno e incubados com amostras biológicas para detectar a presença de anticorpos correspondentes.

Durante a incubação, os antígenos actuais na amostra competem com o antígeno anexado aos glóbulos vermelhos ligando com anticorpos correspondentes que estão igualmente actuais na amostra. Mais tarde, o grau de hemagglutination é avaliado para detectar anticorpos.

Inversamente, os glóbulos vermelhos podem ser revestidos com um anticorpo refinado para detectar o antígeno microbiano em uma amostra dada. Isto é chamado hemagglutination passivo reverso. Neste método, os glóbulos vermelhos anticorpo-revestidos são incubados com amostras decontenção, e o grau de hemagglutination é avaliado para detectar o antígeno.

Hemagglutination para a dactilografia de sangue

Antes da transfusão de sangue, a dactilografia de sangue do ABO e do Rh é executada para verificar a compatibilidade entre o doador e os tipos de sangue do receptor. Além dos micróbios patogénicos, os tipos de sangue do não-auto podem igualmente induzir a produção do anticorpo.

Para testar os tipos de sangue do doador e do receptor, os anticorpos de recombinação desenvolvidos contra antígenos de A, de B, de O, e de Rh são misturados com os glóbulos vermelhos do doador e do receptor, e o hemagglutination é determinado. Em palavras simples, uma amostra de sangue Um-positiva aglutinará com anti-Um e os anticorpos anti-Rh.

Uma análise do cruz-fósforo é realizada igualmente após a determinação do tipo de sangue. Neste caso, os glóbulos vermelhos do doador são incubados com o soro do receptor. No soro do receptor, a presença de anticorpos contra os glóbulos vermelhos do doador conduzirá ao hemagglutination.

Tipos de sangue

Crédito de imagem: Cerejas/Shutterstock.com

Fontes

Last Updated: Oct 16, 2020

Dr. Sanchari Sinha Dutta

Written by

Dr. Sanchari Sinha Dutta

Dr. Sanchari Sinha Dutta is a science communicator who believes in spreading the power of science in every corner of the world. She has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree and a Master's of Science (M.Sc.) in biology and human physiology. Following her Master's degree, Sanchari went on to study a Ph.D. in human physiology. She has authored more than 10 original research articles, all of which have been published in world renowned international journals.

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