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Diagnóstico intestinal de Cryptosporidiosis

O cryptosporidiosis intestinal é considerado um problema de saúde público principal. O parasita responsável para esta circunstância é transmitido através do alimento ou da água contaminado pelos oocysts sporulated dos parasita do género Cryptosporidium. Este organismo apicomplexan entérico do protozoário contamina pilhas epiteliais intestinais e causa a diarreia transiente em indivíduos saudáveis. Contudo, pode ser responsável para a diarreia crônica e séria nos pacientes com desordem adquirida da imunodeficiência (AIDS) ou outras imunodeficiência.

Uma miríade das técnicas foi empregada para detectar a infecção com os parasita de Cryptosporidium nos seres humanos e nos animais. Estes incluem:

  • exame da fezes para a presença de oocysts
  • histologia e exame ultrastructural detalhado do material da biópsia para a identificação de fases do ciclo de vida
  • a detecção de antígenos de Cryptosporidium
  • a detecção de seu material genético por técnicas moleculars

Métodos tradicionais

Clàssica, o diagnóstico do laboratório do cryptosporidiosis intestinal é conseguido por umas ou várias das seguintes técnicas:

  • a demonstração de oocysts de Cryptosporidium em espécimes do tamborete
  • a demonstração de parasita de Cryptosporidium em espécimes da biópsia de umas entranhas pequenas ou no líquido intestinal
  • encontrando o antígeno de Cryptosporidium em espécimes do tamborete

Os oocysts maduros de Cryptosporidium são redondos, o µm 4-6 em tamanho, e facilmente identificável pelo método de mancha ácido-rápido de Kinyoun alterado; não obstante, alguns oocysts de Cryptosporidium não podem ser manchados apropriadamente usando este método, e conseqüentemente presente como “Ghost-como os corpos” que podem ser avaliados somente por pessoais experientes do laboratório.

A fim maximizar a recuperação dos oocysts, recomenda-se que as amostras de tamborete estejam concentradas antes da avaliação microscópica. Pelo menos três espécimes do tamborete devem ser interrogados antes que um resultado negativo esteja relatado, mesmo que os estudos mostrem que a primeira amostra é bastante para o diagnóstico exacto na maioria dos casos.

A biópsia pequena das entranhas e o líquido intestinal são usados raramente para o diagnóstico do cryptosporidiosis intestinal, mas o ensaio enzima-ligado da imunoabsorção (ELISA) e o ensaio da imunofluorescência são empregados rotineiramente. As últimas duas técnicas são métodos altamente sensíveis e específicos, e são conseqüentemente convenientes para selecionar o grande número de amostras materiais dentro de um curto período de tempo.

Métodos moleculars

Os métodos do diagnóstico da infestação parasítica que são baseados na mancha e no exame microscópico estão sendo substituídos extensamente com as técnicas moleculars que são específicas para um micróbio patogénico do interesse. Um destes é a reacção em cadeia da polimerase (PCR) que tem o benefício da sensibilidade e da especificidade aumentadas no diagnóstico do cryptosporidiosis intestinal. Isto tem restringido a aplicabilidade presentemente nos ajustes do baixo-recurso ou do ponto--cuidado devido a seu custo, as exigências da infra-estrutura, assim como a necessidade para a competência técnica alta.

Quando o PCR foi empregado para detectar a espécie de Cryptosporidium em amostras clínicas, a predominância nas amostras de tamborete de sul - as crianças africanas com diarreia foram encontradas para ser 20%. O organismo foi encontrado em três quartos de pacientes de AIDS com diarreia de Uganda. Geralmente, o diagnóstico de Cryptosporidium usando o PCR tem uma sensibilidade que se realize entre 97% e 100% e uma especificidade de 100%.

Combinação de técnicas como uma aproximação óptima

ELISA e os ensaios da imunofluorescência são altamente sensíveis e específicos, e o PCR é mesmo melhor nestes respeitos. Contudo, o método de mancha tem a vantagem de detectar a infecção activa, ao contrário destes métodos que não podem discriminar entre infecções activas e não-activas. Além, os métodos de mancha são menos complicados e menos caros, embora seu uso signifique que alguns casos do cryptosporidiosis intestinal irã0 undiagnosed devido a sua inerente mais baixa sensibilidade.

Conseqüentemente uma combinação de manchar métodos com as técnicas de ELISA ou de PCR seria a “bandeira de ouro” e assegurar-se-ia de que as infecções com parasita de Cryptosporidium não fossem undiagnosed. Finalmente, como a incidência do cryptosporidiosis intestinal é evidente mais alta em pacientes seropositivos, monitorar oocysts de Cryptosporidium naqueles indivíduos ajuda em fornecer um tratamento mais eficaz.

Fontes

Last Updated: Feb 26, 2019

Dr. Tomislav Meštrović

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Dr. Tomislav Meštrović

Dr. Tomislav Meštrović is a medical doctor (MD) with a Ph.D. in biomedical and health sciences, specialist in the field of clinical microbiology, and an Assistant Professor at Croatia's youngest university - University North. In addition to his interest in clinical, research and lecturing activities, his immense passion for medical writing and scientific communication goes back to his student days. He enjoys contributing back to the community. In his spare time, Tomislav is a movie buff and an avid traveler.

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