Diagnóstico e tratamento do vírus de Nipah

As infecções com vírus de Nipah podem afectar os reservatórios do ser humano e os animais. A presença de vírus de Nipah é confirmada usando diversos níveis de teste, que inclui primeiramente o isolamento viral, amplificação do serology e do ácido nucleico (o último é sabido igualmente como diagnósticos moleculars).

Vírus de Nipah, infecção zoonotic recentemente emergente com síndrome respiratória aguda e encefalite severa, ilustração 3D. Crédito de imagem: Kateryna Kon/Shutterstock
Vírus de Nipah, infecção zoonotic recentemente emergente com síndrome respiratória aguda e encefalite severa, ilustração 3D. Crédito de imagem: Kateryna Kon/Shutterstock

Isolamento

A seguridade biológica em nível (BSL) - 4 laboratórios é exigida para o isolamento e a propagação do vírus de Nipah devido a seu efeito mortal intenso. O isolamento preliminar pode ser realizado usando amostras suspeitadas para a confirmação da infecção nos laboratórios BSL-3 se as precauções estritas como especificado são seguidas com, para assegurar a segurança dos operadores.

Contudo, se o espécime é positivo para o ADN viral pelo teste da imunofluorescência das pilhas contaminadas fixadas com acetona, o líquido da cultura deve ser transferido imediatamente a um laboratório BSL-4.

Diversos laboratórios da alta segurança que cumprem os critérios BSL-4 vieram até o negócio com manifestações de Nipah em países em vias de desenvolvimento em virtude de seu potencial transformar-se uma manifestação fatal. Estes incluem:

  • O laboratório de referência do OIE para Henipaviruses em Geelong para a pesquisa animal na região do Pacífico asiático
  • Instituto nacional da virologia, ICMR, em Pune (Índia) e no laboratório da doença animal da alta segurança, Bhopal (Índia) para facilidades do isolamento do vírus humano e animal
  • ICDDRB e IEDCR em colaboração com os centros para o controlo e prevenção de enfermidades (CDC), EUA

Serology

Diversos métodos estão no uso para o diagnóstico serologic.

ELISA viral da captação do antígeno (ensaio enzima-ligado da imunoabsorção) pode processar amostras na produção alta ao ser eficaz na redução de custos, e é uma boa escolha para a selecção da amostra. Por outro lado, ELISA anticorpo-baseado monoclonal da captação do antígeno permite a detecção viral, mas pode igualmente distinguir Nipah de Hendravirus, um outro vírus altamente patogénico na mesma família.

Estes métodos são baseados no uso dos antígenos do lysate da pilha que são obtidos dos centros como o acima, e podem ser executados somente nos laboratórios BSL-4.

Para obter em torno desta edição, os antígenos alternativos foram desenvolvidos sob a forma das proteínas de recombinação, tais como o ELISA de recombinação da proteína de N.

Além, há uma técnica nova de ELISA do sanduíche da antígeno-captação baseada no anticorpo polyclonal do coelho à vacina do ADN da proteína de NiV-G, que é provável ajudar no diagnóstico rápido de NiV novo que não pode ser detectado por métodos convencionais do PCR. Além disso, uma técnica nova da neutralização do soro é baseada no uso de partículas do pseudotype.

Métodos da amplificação do ácido nucleico

A infecção com vírus de Nipah pode igualmente ser detectada usar o diagnóstico molecular com testes tais como a reacção em cadeia da polimerase do transcriptase do tempo real ou de outra maneira do reverso (RT-PCR), e RT-PCR aninhado duplex. Os resultados são confirmados pela seqüência dos produtos da amplificação do ADN.

Coleção das amostras, do teste múltiplo e dos testes padrões do anticorpo

Um paciente com uma história clínica suspeito da infecção de Nipah deve ser testado com testes múltiplos. Durante a fase adiantada, os testes do isolamento do vírus e do tempo real RT-PCR são realizados nos cotonetes tomados da garganta e o nariz, líquido cerebrospinal, urina e sangue. Nos estados avançados, a detecção de IgM e de IgG que usa o teste serological (ELISA) é feita. Se os dados pacientes antes que estes testes estiverem executados, amostras de tecido da autópsia podem ter que ser tomado para que o teste immunohistochemical confirme a presença do vírus.

Quando nós usamos o serology para o diagnóstico da infecção de Nipah, os anticorpos de IgM são detectáveis durante os primeiros cinco dias da doença sintomático em aproximadamente 66% dos pacientes.

  • Nos pacientes que sobreviveram, em 2 semanas IgM e IgG eram universal positivo.

Em 2-3 meses do início, os níveis de IgM começados cair e tornaram-se negativos em todos os sobreviventes em 2 anos, quando

  • A positividade de IgG permaneceu inalterada em todos os pacientes em 2 anos.
  • Assim, um paciente que seja inicialmente negativo de NiV pelo teste do anticorpo pode desenvolver níveis detectáveis de anticorpos de IgM em 2 semanas ou de mais após o início da doença.

Tratamento

Sendo um vírus novo com mutações freqüentes, nenhum tratamento específico está disponível neste momento para a infecção do vírus de Nipah. O cuidado de suporte é imperativo para aperfeiçoar a sobrevivência. A transmissão pessoal é documentada em manifestações recentes, que encarrega do uso de precauções e de métodos padrão dos cuidados da barreira ao tratar ou ao diagnosticar um exemplo suspeitado ou confirmado da infecção de Nipah. Isto é importante que a metade dos pacientes em uma manifestação estêve encontrada quase para ter contratado nosocomially o vírus.

O Ribavirin foi a única droga antivirosa até agora para mostrar a eficácia contra o vírus de Nipah, mas mais estudos são exigidos para confirmar este que encontra qual é baseado pela maior parte in vitro em estudos, com poucos estudos humanos.

Uma outra droga que está sendo testada é um analog do nucleoside da purina já aprovado em Japão para o tratamento de tensões de virus da gripe novas, mas foi mostrada para ser activa contra vírus de Hendra e de Nipah in vitro.

Um outro método que está sendo investigado é imunização passiva usando o anticorpo monoclonal humano aumentado contra a G-glicoproteína do vírus de Nipah, que mostrou o benefício significativo nos estudos.

Fontes

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Last Updated: Aug 23, 2018

Dr. Liji Thomas

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Dr. Liji Thomas

Dr. Liji Thomas is an OB-GYN, who graduated from the Government Medical College, University of Calicut, Kerala, in 2001. Liji practiced as a full-time consultant in obstetrics/gynecology in a private hospital for a few years following her graduation. She has counseled hundreds of patients facing issues from pregnancy-related problems and infertility, and has been in charge of over 2,000 deliveries, striving always to achieve a normal delivery rather than operative.

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