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ATR-FTIR para a única análise da pilha

Faixa clara a:

Fourier-transforme a espectroscopia infravermelha, FTIR. Crédito de imagem: Stocker/Shutterstock de Ken
Fourier-transforme a espectroscopia infravermelha, FTIR. Crédito de imagem: Stocker/Shutterstock de Ken

Que é ATR-FTIR?

Um acrônimo para a reflexão total atenuada Fourier-Transforma a espectroscopia infravermelha, ATF-FTIR é uma técnica da análise que possa ser usada para analisar espécimes biológicos em uma maneira barata, econômica. Este método de trabalhos de análise medindo algumas mudanças que ocorrerem em um feixe interno-refletido do IR quando entrarem o contacto com uma amostra biológica. Um feixe do IR é guiado altamente em um cristal do R.I., em um ângulo do grupo. As reflexões internas resultantes deste feixe conduzem a uma onda transiente que alcances na amostra da superfície do cristal.

Únicos métodos de análise actuais da pilha

Nos últimos anos, uma selecção de técnicas do isolamento da único-pilha, como: a divisão em compartimentos, o micromanipulation, a diluição, o microfluidics, e o cytometry de fluxo, foram desenvolvidos.

Estes métodos podem ser utilizados para propagar os micro-organismos de que tinha sido cultivado nunca antes, para avaliar e função e fisiologia da pilha de trilha, assim como para fazer a varredura para produtos bioquímicos originais.

Outros métodos, tais como a hibridação in situ, manchando, e aqueles que utilizam proteínas da auto-fluorescência, são combinados frequentemente com os métodos acima descritos segundo o alvo do estudo na pergunta.

Como ATR-FTIR é usado para a única análise da pilha?

Transflection e a microscopia do IR da transmissão do tecido e as pilhas indicam tipicamente as distorções da linha de base, devido à dispersão de Mie ressonante. Este efeito pode igualmente mudar as formas de picos espectrais, assim como o posicionamento de picos espectrais, que faz as interpretações finais incertas e difíceis.

Um algoritmo projetado para a correcção destes erros: dispersão de Mie ressonante a correcção multiplicativo estendida do sinal, tem sido refinada recentemente que poderia ser utilizada para eliminar as distorções.

Este algoritmo tem dois essenciais, os parâmetros definidos pelo utilizador que determinam a certeza das correcções resultantes. O primeiro parâmetro importante é a soma das repetições usadas para ganhar o resultado o mais desejável, ou o número de corridas.

O segundo parâmetro significativo é a decisão final do espectro recomendado necessário para este procedimento. A selecção daqueles dois parâmetros determina o tempo computacional.

Este interesse é não aquele significativo para corrigir séries de dados pequenas de um par cem espectros, ou espectros individuais, mas torna-se um factor significativo ao fazer a correcção aos espectros das imagens do IR ganhadas usando os detectores maiores da disposição do focal-plano, que poderiam conter milhares de espectros.

As aplicações actuais de ATR-FTIR escolhem a análise da pilha

A camada ultraperiférica de pele humana, se não conhecida como o corneum do estrato, é um tipo importante de tecido, com sua função crítica que é actuar como um limite protector contra a entrada de moléculas solúveis em água, e evitar a perda transepidermal de água.

Estas responsabilidades são executadas pela camada incredibly fina de tecido do corneum do estrato - dar uma espessura média de 20 milímetros. O prejuízo/ruptura do corneum do estrato é a causa a mais comum de uma variedade de doenças de pele - como o estafilococo - celulite áurea e impetigo.

Estafilococo - áureo (MRSA). Crédito de imagem: Tatiana Shepeleva/Shutterstock
Estafilococo - áureo (MRSA). Crédito de imagem: Tatiana Shepeleva/Shutterstock

Esta camada específica de pele não foi analisada em detalhe contudo através da espectroscopia do IR. O relatório actual Fourier dos estudos transforma a análise micro-espectroscópica infravermelha de ambos o corneum do estrato, e pilhas singulares do corneocyte - o alvo final que é identificar alguns componentes biomoleculares específicos que ajuda em seu próprio espectro do IR.

Pelo contrário à luz regular microscopia-baseou técnicas, a aproximação do IR não precisa amostra demorada que mancha, nem exige a fixação. Conseqüentemente, Fourier transforma a análise micro-espectroscópica infravermelha é rápido e uma técnica não invasora da bio-análise.

Adicionalmente, os vários espécimes do corneum do estrato foram analisados através da espectroscopia de ATR-FTIR, onde as faixas idiossincrásicas do biomarker foram encontradas igualmente.

A secção que compreende principalmente de lipidos pode facilmente ser determinada pela faixa do éster do carbonilo, assim como pelo metileno intenso esticar as vibrações, ambo não foram encontradas esta presente nos espectros iniciais de M-FTIR-MSP do espécime singular do corneocyte. Ambas as absorções metílicas simétricas, e as faixas do amido 1 e 2 são atribuídas claramente à fracção protenous, que pode então ser utilizada para a identificação da proteína do tecido.

Também, a fracção compo dos corneocytes pode igualmente ser identificada através de uma das faixas, localizado ao redor 3070 cm1 , que poderiam ser associados com a vibração do amido B. A avaliação e a observação do este os espectros infravermelhos revelam a sensibilidade significativa da aproximação do IR, devido às mudanças óbvias na bioquímica do tecido do espécime, assim como em variações na organização e na arquitetura do tecido do corneum do estrato.

Fontes

Further Reading

Last Updated: Sep 5, 2019

Written by

Phoebe Hinton-Sheley

Phoebe Hinton-Sheley has a B.Sc. (Class I Hons) in Microbiology from the University of Wolverhampton. Due to her background and interests, Phoebe mostly writes for the Life Sciences side of News-Medical, focussing on Microbiology and related techniques and diseases. However, she also enjoys writing about topics along the lines of Genetics, Molecular Biology, and Biochemistry.

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    Hinton-Sheley, Phoebe. (2019, September 05). ATR-FTIR para a única análise da pilha. News-Medical. Retrieved on January 22, 2021 from https://www.news-medical.net/life-sciences/ATR-FTIR-for-Single-Cell-Analysis.aspx.

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