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Aplicações da imagem lactente Confocal

Pela festão BEng de Angela

A microscopia de Epifluorescent é capaz de gerar imagens de determinadas amostras fluorescentes; contudo, a amostra parecerá indistinta se a amostra alcança uma espessura maior do que micrômetros. Isto é porque algumas partes da mentira da amostra fora do plano focal. Uma aproximação nova da imagem lactente foi exigida para superar este desafio.

A aproximação confocal foi conduzida pelo desejo de Marvin Minsky às redes neurais da imagem em preparações unstained de cérebros vivos, e é considerado extensamente como o inventor do microscópio confocal em 1955. O princípio original é usado ainda no microscópio confocal moderno.

Este formulário da imagem lactente empresta-se a muitas áreas das ciências da vida devido a sua capacidade para obter imagens de alta resolução e a natureza da exploração do processo da imagem lactente.

Imagem lactente viva da pilha

Ao considerar a imagem lactente de pilhas vivas, a iluminação das pilhas deve ser uma consideração. Quando as pilhas fluorescentes são entusiasmado, pode conduzir a photobleaching, tendo por resultado dano de pilha. A natureza inerente da imagem lactente confocal diminui este risco, porque somente o ponto que é imaged é iluminado, que diminui a exposição adicional às pilhas do fundo.

Este método de excitar a amostra conduz a uma limitação de dano de pilha. Quando partnered com um mais de alta resolução, que seja causado com a eliminação fora do brilho do foco, a imagem lactente confocal é excepcional em capturar detalhes de pilhas vivas.

A técnica foi encontrada para poder fornecer altamente imagens do tempo real do olho, na ampliação 630x, bastante definição determinar o detalhe anatômico a nível celular.

A imagem lactente Confocal foi mostrada igualmente para descrever in vivo processos fisiológicos na córnea, no rim e no fígado. Igualmente mostrou-se para poder ilustrar a cura das feridas em quatro dimensões (x, y, z, t) a nível celular. Isto sugere que este método possa fornecer um paradigma novo para a imagem lactente na biologia experimental.

Com o uso de um agente fluorescente, fluoresceína, foi possível identificar directamente áreas de ferimento córneo. O uso da imagem lactente confocal mostrou a capacidade para avaliar in vivo estas áreas feridas.

Este método permitiu que os estudos determinem a irritação das drogas e dos excipientes ao olho. Os resultados deste estudo classificaram surfactants e puderam mostrar que os surfactants cationic eram os mais irritantes e non-ionics o menos.

O cientista que investigavam o número de nucleosomes nas pilhas vivas podia combinar a imagem lactente confocal com a espectroscopia da correlação da fluorescência. Esta combinação de métodos permitiu que traçassem as imagens resultantes da imagem lactente confocal em mapas nucleosome calibrados da densidade.

Isto foi feito com a calibração da imagem de alta resolução da imagem lactente confocal com o rendimento da fluorescência do único marcador fluorescente como derivado da espectroscopia da correlação da fluorescência.

Live Cell Confocal Imaging

Aplicações na odontologia

os cimentos Resina-alterados do vidro-ionomer são usados na odontologia, porém a relação do dente com estes materiais é compreendida deficientemente. A relação foi investigada, com particular destaque na relação com dentina, com uma série dos cimentos.

As amostras do dente/relação material foram examinadas usando a microscopia confocal. As amostras mostraram que em algumas das amostras, havia da “uma camada absorção” qual foi determinado se relacionar ao fluxo da água entre o cimento de amadurecimento e a polpa no dente.

A imagem lactente Confocal foi usada para estudar os efeitos dos antimicrobianos na chapa dental. Era possível determinar a vitalidade da chapa, como uma porcentagem, com a análise das imagens das três camadas da chapa, o exterior, médio e interno.

Encontrou-se que o tratamento do chlorhexidine era significativo nas seis amostras da hora e somente na camada exterior das quarenta e oito amostras da hora. Mostrou-se que esta aproximação era possível para dosar e visualizar os efeitos do tratamento no biofilm.

A imagem lactente Confocal pode ser aplicada a muitas áreas da pesquisa dental, incluindo a propagação de rachadura da imagem lactente em matérias biológicos dentais, interacções dentais de alta velocidade da estaca e colocação dos materiais dentais.

Caracterização de sistemas farmacêuticos

A microscopia de exploração Confocal do laser foi usada na caracterização de muitos sistemas farmacêuticos, incluindo tabuletas, revestimentos do filme e sistemas coloidais. Foi usada igualmente para estudar a interacção de barreiras biológicas da pele, o olho e o epithelia intestinal, e a eficácia de formulários de dosagem em entregar as drogas através destas barreiras.

A aspereza de superfície das tabuletas foi investigada com o uso da imagem lactente confocal - esta foi encontrada para ser uma ferramenta eficaz quando veio aos defeitos de superfície de investigação em tabuletas filme-revestidas e na relação do filme-núcleo. A comparação da imagem lactente confocal à profilometria do laser e à análise óptica da aspereza podia validar estes resultados.

A imagem lactente Confocal foi utilizada para investigar a estrutura e a tempo-evolução dos geles transientes, que são formados nas misturas dos colóide-polímeros. Mostrou que pode haver umas grandes diferenças dentro de uma estrutura local em um único sistema.

O uso da imagem lactente confocal neste contexto melhora extremamente em cima de toda a tentativa usando a luz ou a microscopia de fluorescência convencional, que fariam extremamente difícil executar um estudo deste tipo.

Os caminhos transcellular através de que os nanocapsules diferentes penetram a córnea foram identificados com uma série de in vivo e ex vivo testando com imagem lactente confocal. A imagem lactente estes caminhos podia mostrar a influência de revestimentos diferentes dos nanocapsules, na taxa de penetração e no biodistribution.

A informação recolhida deste estudo permitiu a determinação de uma estratégia potencial em relação aos agentes terapêuticos específicos do local.

Fontes:

  1. http://science.sciencemag.org/content/300/5616/82
  2. http://jcs.biologists.org/content/joces/94/2/175.full.pdf
  3. http://jdr.sagepub.com/content/77/9/1749.short
  4. http://jdr.sagepub.com/content/80/5/1436.short
  5. http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/sca.4950160302/pdf
  6. http://europepmc.org/abstract/MED/2407380
  7. http://europepmc.org/abstract/MED/8309657
  8. http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0022283603010775
  9. https://www.microscopyu.com/techniques/confocal/introductory-confocal-concepts
  10. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2114888/pdf/jc105141.pdf
  11. http://www.bristol.ac.uk/synaptic/research/techniques/confocal.html
  12. http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0169409X07001871
  13. http://www.physics.emory.edu/faculty/weeks//lab/papers/ebbe05.pdf

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Last Updated: Feb 26, 2019

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