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Aplicações da mancha do cromogéneo de Immunoenzymatic

Por Gillian D'Souza, CAM

A mancha do cromogéneo de Immunoenzymatic é uma técnica de mancha da imunologia usada para detectar visualmente marcadores dois ou mais antigénicos dentro de uma única amostra de tecido (colocalization).

Crédito: Tenha uma foto do dia agradável/Shutterstock.com

Com a ajuda dos cromogéneos, os pesquisadores usam esta técnica para observar antígenos do interesse em uma amostra biológica sob a microscopia brilhante do campo. A mancha do cromogéneo de Immunoenzymatic tem um número de vantagens, especialmente quando comparada à imunofluorescência.

Identificação clara das pilhas

Ao tratar muitos anticorpos, é às vezes difícil diferenciar-se entre pilhas positivas e negativas. Por exemplo, ao observar núcleos positivos com o marcador Ki67 da proliferação, se não pode claramente verificar que tipo da pilha está proliferando realmente.

Em uma experiência demancha (tal como a mancha immunoenzymatic), o anticorpo do interesse é misturado com um anticorpo contra um marcador estrutural para detectar tipos da pilha epitelial, linfócitos, granulocytes, eosinophils, macrófagos, pilhas endothelial e pilhas de nervo, entre outros.

Para anticorpos recentemente desenvolvidos, torna-se vital saber que tipo da pilha é o alvo principal e se ajuste biológico dos dados das pilhas' com a localização suspeitada do tecido. Isto é o lugar onde o dobro que mancha com mancha immunoenzymatic supor a grande importancia.

Melhor compreensão do comportamento da pilha

A mancha immunoenzymatic multicolorido do cromogéneo permite que os pesquisadores identifiquem visualmente tipos/populações específicos da pilha ou determinem a derivação da pilha. Permite a identificação dos processos específicos que acontecem dentro daquelas pilhas - em espécimes bem conservados, inteiros do tecido de vários estados.

Quando as técnicas de mancha múltiplas (com os até quatro marcadores diferentes) são combinadas eficazmente com a análise espectral da imagem lactente, as avenidas em compreender relacionamentos complexos e entre em vários processos celulares podem ser abertas.

Combine e compare feito fácil

Combinar a mancha immunoenzymatic com outros testes bioquímicos permite uma comparação directa de marcadores antigénicos através dos parâmetros diferentes. Por exemplo, quando combinados com o ADN para a hibridação in situ, os pesquisadores podem ganhar a introspecção no fenótipo celular de pilhas viral-contaminadas. Similarmente, combinar a mancha immunoenzymatic com a hibridação in situ do factor do RNA permite a comparação de um antígeno particular a mRNA e níveis da proteína em uma única secção do tecido.

Uso limitado da amostra de tecido

Nas situações onde um número limitado de espécimes do tecido está disponível para a histologia e analisa experiências, a mancha múltipla permite o estudo de mais marcadores dentro de uma única amostra - esta salvar em recursos a um grande grau.

Facilidade da observação

O cromogéneo de Immunoenzymatic que mancha permite não somente a observação microscópica fácil com o olho sem ajuda, mas igualmente assegura-se de que a secção manchada do tecido seja permanentemente fixa, com sua qualidade de mancha mantida por diversos anos.

Ao contrário da imunofluorescência os cromogéneos usados na mancha immunoenzymatic podem ser vistos simultaneamente na conclusão do ensaio, usando a fotomicroscopia padrão. Além disso, podem ser vistos repetidamente sem alterar resultados de mancha. Estes benefícios oferecem o valor significativo aos pesquisadores, especialmente nas fases adiantadas de um estudo.

A introdução de promessas espectrais da imagem lactente de tomar as técnicas de mancha immunoenzymatic ao nível seguinte, oportunidades possivelmente de oferecimento para a análise do tecido do multi-marcador. Unmixing espectral tem o potencial demonstrar o colocalization como uma imagem exclusiva, além do que mais a análise e a dosagem das imagens componentes unmixed das amostras de tecido IHC-manchadas triplas ou mesmo quádruplas.

Fontes:

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Last Updated: Feb 26, 2019

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