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Usos de la coloración del cromógeno de Immunoenzymatic

Por Gillian D'Souza, MSc

La coloración del cromógeno de Immunoenzymatic es una técnica de coloración de la inmunología usada para descubrir visualmente marcadores dos o más antigénicos dentro de una única muestra de tejido (colocalization).

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Con la ayuda de los cromógenos, los investigadores utilizan esta técnica para observar los antígenos del interés en una muestra biológica bajo microscopia brillante del campo. La coloración del cromógeno de Immunoenzymatic tiene varias ventajas, especialmente cuando está comparada a la inmunofluorescencia.

Identificación sin obstrucción de células

Al tratar de muchos anticuerpos, es a veces difícil distinguir entre las células positivas y negativas. Por ejemplo, mientras que observa núcleos positivos con el marcador Ki67 de la proliferación, uno no puede comprobar sin obstrucción qué tipo de la célula está proliferando real.

En un experimento de doble-coloración (tal como coloración immunoenzymatic), el anticuerpo del interés se mezcla con un anticuerpo contra un marcador estructural para descubrir los tipos de la célula epitelial, linfocitos, granulocytes, eosinófilos, macrófagos, células endoteliales y células nerviosas, entre otros.

Para los anticuerpos desarrollados recientemente, llega a ser vital saber qué tipo de la célula es el objetivo principal y si ajuste biológico de los datos de las células' con la localización sospechosa del tejido. Aquí es donde el doble que mancha con la coloración immunoenzymatic asume gran importancia.

Una mejor comprensión del comportamiento de la célula

La coloración immunoenzymatic multicolora del cromógeno permite que los investigadores determinen visualmente tipos/las poblaciones específicos de la célula o que determinen la derivación de la célula. Habilita la identificación de los procesos específicos suceso dentro de esas células - en los especímenes bien conservados, enteros del tejido de diversos estados.

Cuando las técnicas de coloración múltiples (con hasta cuatro diversos marcadores) se combinan efectivo con análisis espectral de la proyección de imagen, las avenidas en la comprensión de lazos complejos en y entre diversos procesos celulares pueden ser abiertas.

Combine y compare hecho fácil

Combinar la coloración immunoenzymatic con otras pruebas bioquímicas permite una comparación directa de marcadores antigénicos a través de diversos parámetros. Por ejemplo, cuando están combinados con la DNA para el hibridación in situ, los investigadores pueden ganar discernimiento en el fenotipo celular de células viral-infectadas. Semejantemente, combinar la coloración immunoenzymatic con el hibridación in situ del factor del ARN permite la comparación de un antígeno determinado en el mRNA y los niveles de la proteína en una única sección del tejido.

Uso limitado de la muestra de tejido

En situaciones donde está disponible para la histología y ensaya un número limitado de especímenes del tejido experimentos, la coloración múltiple permite el estudio de más marcadores dentro de una única muestra - ésta salva en recursos a un gran grado.

Facilidad de la observación

El cromógeno de Immunoenzymatic que mancha no sólo permite la observación microscópica fácil con el aro sin ayuda, pero también se asegura de que la sección manchada del tejido es permanente fija, con su calidad de coloración mantenida por varios años.

A diferencia de inmunofluorescencia los cromógenos usados en la coloración immunoenzymatic se pueden ver simultáneamente en la realización del análisis, usando microscopia liviana estándar. Por otra parte, pueden ser vistos en varias ocasiones sin la alteración de resultados de coloración. Estas ventajas ofrecen valor importante a los investigadores, especialmente en las fases tempranas de un estudio.

La introducción de promesas espectrales de la proyección de imagen de llevar las técnicas de coloración immunoenzymatic el nivel siguiente, oportunidades posiblemente de ofrecimiento para el análisis del tejido del multi-marcador. El unmixing espectral tiene potencial de demostrar el colocalization como imagen exclusiva, además más lejos de analizar y de cuantificar las imágenes componentes puras de muestras de tejido IHC-manchadas triples o aún cuádruples.

Fuentes:

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Last Updated: Feb 26, 2019

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