Applications de BiFC

Dans presque tous les processus cellulaires, là concerne un réseau complexe de protéine. Plusieurs technologies d'examen critique de haut-débit sont en service pour découvrir les énormes réseaux d'interaction de protéines. L'analyse bimoléculaire de complémentation de fluorescence (BiFC) a été considérable employée pour découvrir l'interaction parmi des protéines en cellules vivantes. L'analyse de BiFC est utile pour concevoir des interactions parmi une gamme des protéines dans de nombreuses diverses positions sous-cellulaires et parmi beaucoup d'autres organismes. Les études ont prouvé les applications plus larges de l'analyse de BiFC.

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Utilisant des analyses de BiFC, plusieurs systèmes de vecteur ont été développés aux centrales. Dans la thaliana d'A., un examen critique élevé de débit a été fait utilisant l'analyse et le BiFC de YTH pour tracer l'interaction de protéines avec les protéines de cycle cellulaire de faisceau. BiFC approprié probablement à n'importe quelle étude concernant les cellules développées en conditions aérobies et les organismes qui pourraient être génétiquement modifiés pour exprimer des protéines de fusion.

Conclusion de la localisation sous-cellulaire

L'application simple de l'analyse de BiFC est de découvrir si l'interaction peut avoir lieu parmi deux protéines dans une cellule vivante. Généralement l'analyse de BiFC recense la localisation sous-cellulaire des composés de protéine. En tous les compartiments sous-cellulaires principaux des cellules mammifères tels que des lysosomes, le golgi, plusieurs structures subnuclear, la membrane de plasma, les mitochondries, le lamellipodia, le réticulum endoplasmique, des gouttelettes de lipide, et les particules virales, composés de BiFC ont été conçus. Les composés de BiFC ont montré l'analyse significative dans les règlements complexes de localisation qui comprennent la translocation nucléaire aussi bien.

Les résultats ont prouvé que des composés de BiFC peuvent être formés en divers compartiments cellulaires dans environnements variés. Il est intéressant de noter que l'analyse de BiFC ne tient pas compte des contraintes topologiques des protéines comme interactions qui comprennent les protéines intégrales de membrane sont étudiées utilisant l'analyse de BiFC.

Différentes interactions de visualisation

Beaucoup de protéines agissent avec le grand nombre des associés différents. Tandis qu'elles agissent l'un sur l'autre, la quantité d'interactions produit d'un réseau complexe des rapports et les signes sont imposés à une protéine unique, qui sont écartés complètement le réseau. Dans ce réseau complexe, la visualisation d'une interaction individuelle fournira l'analyse dans l'association parmi une interaction particulière et au sujet des signes qui règlent sa localisation et efficacité. L'analyse de BiFC est utile pour concevoir beaucoup d'interactions qui concernent les composantes diffusibles de ces réseaux et des récepteurs de membrane.

Trouver l'interaction de protéines dans le Cytokinesis

Utilisant l'analyse de BiFC, le composé produit par Grr1 et Hof1 est conçu. Pendant le cycle, dans l'étape G2-M, l'interaction de Grr1 avec Hof1 aura lieu. En raison de cette relation, dégradation de Hof1 se produira. Les procédés suivants peuvent être conçus expliquant que l'analyse de BiFC est utile en trouvant à l'extérieur la formation complexe temporellement et dans l'espace commandée.

Interactions d'échafaudage

Plusieurs protéines ont pu être réunies plus étroitement en raison du grippement de la portion assimilée d'associé d'interaction comme échafaudage pour l'ensemble de composés de multiprotein. Autre que des protéines, ces échafaudages s'appliquent pour des hydrates de carbone, des acides nucléiques, et d'autres macromolécules cellulaires. L'analyse de BiFC trouve ces le grippement simultané des deux protéines à proximité d'une un un autre sur le même échafaudage. Utilisant ce principe, gripper d'ARN est trouvé en protégeant par fusible les éclats fluorescents de protéine aux deux protéines ARN-grippantes. L'approche pour concevoir les protéines de fusion qui pourraient gripper à un type unique de molécule d'ARN est employée pour suivre l'ARN dans les cellules vivantes.

Étude des organismes

Beaucoup d'organismes de la cellule unicellulaire et multi ont été étudiés utilisant l'analyse de BiFC. Plusieurs interactions ont été conçues dans les bactéries - les tumefaciens, l'Escherichia coli, et le bacillus subtilis d'agrobactérie ; et champignons - chrysogenum d'Acremonium, grisea de Magnaporthe, nidulans de saccharomyces cerevisiae, et d'aspergillus. Beaucoup d'espèces de centrales ont été étudiées utilisant l'analyse de BiFC pour concevoir les interactions abondantes qui ont lieu parmi ces organismes eucaryotiques plus élevés. Utilisant l'analyse de BiFC, le Caenorhabditis elegans avec des interactions de protéines met en boîte également conçu.

Outil de dépistage

Les analyses de BiFC trouvent son usage en recensant les associés possibles d'interaction et les modificateurs des interactions recensées, de ce fait agissant comme un outil de dépistage. Cette stratégie a aidé à recenser beaucoup d'associés nouveaux d'interaction. Des modulateurs de petite molécule sont également examinés utilisant l'analyse de BiFC. On l'a constaté que l'analyse de BiFC est une stratégie pratique pour recenser des petites molécules en cellule vivante qui modifie les composés particuliers de protéine.

Analyse en couleurs de BiFC : Visualisation en simultané

La plupart des protéines ont beaucoup d'associés possibles d'interaction. Dans de nombreux cas, une protéine agit l'un sur l'autre avec une molécule de protéine spécifique, c.-à-d., les interactions sont mutuellement - exclusivité. Utilisant l'analyse en couleurs de BiFC, il est possible de concevoir les interactions parmi les composés multiples de protéine de la même cellule simultanément ; les distributions sous-cellulaires des nombreux composés de protéine (dans la même cellule) peuvent être comparées ; la concurrence parmi (mutuellement - les associés d'interaction d'exclusivité) de gripper pour un associé universel peut s'analyser.

BiFC a permis pour trouver et concevoir des interactions protéine-protéine in vivo. Par la combinaison avec le dernier avancement dans la microscopie à fluorescence, l'analyse de BiFC a pu offrir des analyses neuves dans des interactions protéine-protéine de réglementation de découverte de médicaments. Les demandes neuves d'analyse de BiFC se développent rapidement. L'usage de la diverse protéine fluorescente est nécessaire pour réaliser l'étude comparative des analyses de BiFC pour mesurer leurs avantages.

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Last Updated: Feb 26, 2019

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