Usos de BiFC

En casi todos los procesos celulares, implica un red complejo de la proteína. Varias tecnologías de la investigación de la alto-producción son funcionando para descubrir las redes enormes de la acción recíproca de la proteína. El análisis bimolecular de la complementación de la fluorescencia (BiFC) se ha utilizado extensivamente para descubrir la acción recíproca entre las proteínas en células vivas. El análisis de BiFC es útil para visualizar acciones recíprocas entre un alcance de proteínas en posiciones subcelulares diversas numerosas y entre muchos otros organismos. Los estudios han probado los usos más amplios del análisis de BiFC.

Haber: Vshivkova/Shutterstock.com

Usando los análisis de BiFC, varios sistemas del vector fueron desarrollados en instalaciones. En thaliana del A., una alta investigación de la producción fue hecha usando análisis y BiFC de YTH para correlacionar la acción recíproca de la proteína con las proteínas del ciclo celular de la base. BiFC se adapta probablemente para cualquier estudio que implica las células crecidas aerobio y los organismos que se podrían genético modificar para expresar las proteínas de la fusión.

Encontrar la localización subcelular

El uso simple del análisis de BiFC es descubrir si la acción recíproca puede ocurrir entre dos proteínas en una célula viva. El análisis de BiFC determina generalmente la localización subcelular de los complejos de la proteína. En todas las divisiones subcelulares principales de células mamíferas tales como lisosomas, se han visualizado el golgi, varias estructuras subnuclear, la membrana de plasma, las mitocondrias, el lamellipodia, el retículo endoplásmico, las gotitas del lípido, y las partículas virales, complejos de BiFC. Los complejos de BiFC han mostrado discernimiento importante en las reglas complejas de la localización que incluyen el desplazamiento nuclear también.

Los resultados han probado que los complejos de BiFC se pueden formar en divisiones celulares diversas en diversos ambientes. Es interesante observar que el análisis de BiFC no tiene en cuenta los apremios topológicos de las proteínas como las acciones recíprocas que incluyen las proteínas integrales de la membrana se estudian usando el análisis de BiFC.

Acciones recíprocas individuales de visualización

Muchas proteínas actúan así como el gran número de socios disímiles. Mientras que obran recíprocamente, la cantidad de acciones recíprocas genera una red compleja de relaciones y las señales se imponen ante una única proteína, que se extienden completamente la red. En esta red compleja, la visualización de una acción recíproca individual ofrecerá discernimiento en la asociación entre una acción recíproca determinada y sobre las señales que ajustan su localización y eficacia. El análisis de BiFC es útil para visualizar muchas acciones recíprocas que impliquen los componentes difusibles de estas redes y de los receptores de la membrana.

Descubrir la acción recíproca de la proteína en Cytokinesis

Usando el análisis de BiFC, el complejo creado por Grr1 y Hof1 se visualiza. Durante el ciclo, en el escenario G2-M, la acción recíproca de Grr1 con Hof1 ocurrirá. Debido a este lazo, degradación de Hof1 suceso. Los procesos subsiguientes pueden ser visualizados demostrando que el análisis de BiFC es útil en encontrar fuera la formación compleja temporal y espacial controlada.

Acciones recíprocas del andamio

Varias proteínas se podían traer más cerca juntas debido al atascamiento de la porción similar del socio de la acción recíproca como andamio para el montaje de los complejos del multiprotein. Con excepción de las proteínas, estos andamios son aplicables para los hidratos de carbono, los ácidos nucléicos, y otras macromoléculas celulares. El análisis de BiFC descubre este el atascamiento simultáneo de las dos proteínas en proximidad de una otro en el mismo andamio. Usando este principio, el atascamiento del ARN es descubierto fundiendo fragmentos fluorescentes de la proteína a las dos proteínas ARN-obligatorias. La aproximación para diseñar las proteínas de la fusión que podrían atar a un único tipo de molécula del ARN se utiliza para rastrear el ARN dentro de las células vivas.

Estudiar organismos

Muchos organismos de la célula unicelular y multi se han estudiado usando el análisis de BiFC. Varias acciones recíprocas se han visualizado en las bacterias - los tumefaciens, Escherichia Coli, y bacillus subtilis de la agrobacteria; y hongos - chrysogenum de Acremonium, grisea de Magnaporthe, nidulans de Saccharomyces Cerevisiae, y del aspergillus. Muchas especies de instalaciones se han estudiado usando el análisis de BiFC para visualizar las acciones recíprocas abundantes que ocurren entre estos organismos eucarióticos más altos. Usando el análisis de BiFC, los elegans de Caenorhabditis con acciones recíprocas de la proteína pueden también visualizado.

Herramienta de la investigación

Los análisis de BiFC encuentran su uso en determinar socios posibles de la acción recíproca y modificantes de acciones recíprocas determinadas, así actuando como una herramienta de la investigación. Esta estrategia ha ayudado a determinar a muchos socios nuevos de la acción recíproca. Los pequeños moduladores de la molécula también se revisan usando el análisis de BiFC. Fue encontrado que el análisis de BiFC es una estrategia práctica para determinar las pequeñas moléculas en la célula viva que está alterando los complejos determinados de la proteína.

Análisis multicolor de BiFC: Visualización simultánea

La mayor parte de las proteínas tienen muchos socios posibles de la acción recíproca. En muchos casos, una proteína obra recíprocamente con una molécula de proteína específica, es decir, las acciones recíprocas son mutuamente - exclusiva. Usando el análisis multicolor de BiFC, es posible visualizar las acciones recíprocas entre complejos múltiples de la proteína de la misma célula simultáneamente; las distribuciones subcelulares de los complejos numerosos de la proteína (en la misma célula) pueden ser comparadas; la competencia entre (mutuamente - los socios de la acción recíproca de la exclusiva) de atar para un socio universal puede ser analizada.

BiFC ha permitido descubrir y visualizar acciones recíprocas de la proteína-proteína in vivo. Combinando con el último adelanto de la microscopia de fluorescencia, el análisis de BiFC podía ofrecer nuevos discernimientos en acciones recíprocas de regulación de la proteína-proteína del descubrimiento de la droga. Las nuevas aplicaciones para el análisis de BiFC están creciendo rápidamente. El uso de la proteína fluorescente diversa es necesario para realizar el estudio comparativo de los análisis de BiFC para medir sus ventajas.

Fuentes

  1. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4417415/
  2. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2829326/
  3. http://www.vanderbilt.edu/cbi/Presentations/EmPresentation.pdf
  4. http://www.pai.utexas.edu/faculty/isaxena/BIO320/BiFC%20analysis%20as%20a%20probe%20of%20protein%20interactions%20in%20living%20cells%20-%202008.pdf

[Lectura adicional: BiFC]

Last Updated: Feb 26, 2019

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News-Medical.Net.
Post a new comment
Post