Advertencia: Esta página es una traducción de esta página originalmente en inglés. Tenga en cuenta ya que las traducciones son generadas por máquinas, no que todos traducción será perfecto. Este sitio Web y sus páginas están destinadas a leerse en inglés. Cualquier traducción de este sitio Web y su páginas Web puede ser imprecisa e inexacta en su totalidad o en parte. Esta traducción se proporciona como una conveniencia.

Elegir una superficie de la fase estacionaria para HILIC

La composición química de la fase estacionaria en HILIC es a menudo más compleja que la cromatografía líquida de alto rendimiento tradicional (HPLC) y utiliza una combinación de diversas moléculas que obren recíprocamente con analitos para lograr la separación máxima a través de varios parámetros.

Moléculas para la separación en HILICAris Suwanmalee | Shutterstock

Casi cualquier superficie cromatográfica polar se puede utilizar en HILIC, que consiste en a menudo el sílice pelado. El sílice puede ser modificado agregando a los grupos funcionales superficiales para aumentar o bajar la fuerza de la acción recíproca entre la fase estacionaria y el analito o el disolvente se puede utilizar para ajustar tiempo de retención y para perfeccionar la separación entre las composiciones.

Maneras de la separación

Muchas acciones recíprocas fisicoquímicas se pueden explotar en HILIC para separar las moléculas en una muestra. La opción de la fase estacionaria depende de las moléculas que se separarán y del disolvente (fase movible), pues la separación ocurre con fuerzas de la retención que difieren entre las moléculas con la fase estacionaria.  

Separación basada en acciones recíprocas químicas y físicas

Las acciones recíprocas químicas que contribuyen al tiempo de retención dentro de la olumna de HILIC incluyen la vinculación del hidrógeno entre las acciones recíprocas de un donante del protón y del aceptor y del donante-aceptor del hidrógeno entre el aceptor del electrón de la base de Lewis y el donante emparejan.

Las acciones recíprocas físicas entre las moléculas de la muestra y la fase movible con la fase estacionaria consisten en acciones recíprocas electrónicas entre un dipolo y un segundo dipolo o ión, y las fuerzas de Van der Waals. Este tipo de acción recíproca se utiliza al separar especie cargada y polar.

Las fuerzas hidrofóbicas e hidrofílicas, fundamentales a HILIC, también se consideran ser acciones recíprocas físicas. Los analitos se separan en orden de polaridad por fases estacionarias (polares) hidrofílicas.

Fases estacionarias del sílice

El gel de sílice es el substrato más común del cual las fases estacionarias se hacen en todos los tipos de cromatografía de olumna, debido a su estructura porosa. El sílice pelado se puede utilizar como fase estacionaria en HILIC debido a la formación de grupos del silanol en superficies expuestas, haciéndolo altamente polar. Los tres tipos comunes de gel de sílice, difiriendo en su preparación, se llaman el tipo A, B, y C.

Pulse el gel de sílice de A

Pulse los geles de sílice de A contienen impurezas del metal como se precipitan de la solución del silicato sin la eliminación de los agentes contaminadores. La presencia de iones del metal activa a grupos del silanol, y pueden formar complejos con ciertos solutos que quelatan. Esto puede ser explotada al trabajar con algunos péptidos, pues son a menudo altamente inestable y se rompen aparte fácilmente sin la quelación.

Pulse los geles de sílice de B

El tipo geles de sílice de B se prepara con la agregación de las soluciones coloidales del sílice en aire y así que contenga lejos menos impurezas. Las composiciones polares son separadas bien por el tipo geles de B. El pH de la fase movible se puede también ajustar para animar a los grupos del silanol de la ionización en la superficie del sílice, haciendo intercambio catiónico un factor importante en tiempo de retención.

Pulse los geles de sílice de C

El tipo geles de sílice de C se modifica para poseer una superficie hydrosilated compuesta de grupos no polares del hidruro del silicio. Esto es útil cuando una fase movible con la alta composición del disolvente orgánico debe ser utilizada, y analitos más polares se enjuagan más rápidamente de este tipo de olumna.

Fases estacionarias del sílice revestido

Las fases estacionarias del gel de sílice se pueden modificar con una variedad de grupos funcionales para ajustar fino la fuerza de la retención dependiendo de factores, tales como hydrophobicity o pH. Una modificación común a los geles de sílice pelados es la incorporación de un grupo de oxhidrilo a la superficie expuesta del silanol para crear un grupo del diol.

Los grupos del diol son altamente polares, protegido contra la ionización, y tienen propiedades fuertes de la vinculación del hidrógeno. Así, la polaridad y la vinculación del hidrógeno son los factores primarios en la retención de la olumna.

Los geles de sílice functionalized aniónicos, obtenidos por la adición de grupos aminados, también se utilizan con frecuencia en HILIC. El crea la especie cargada de a negativo - superficie cargada que las causas positivo - que se conservará más fuertemente que composiciones básicas.

Las fases estacionarias de Zwitterionic se han utilizado cada vez más en HILIC y consisten en el substrato del sílice o del polímero con las moléculas zwitterionic expuestas por ejemplo, sulfoalkylbetaine. Las fases estacionarias de Zwitterionic son altamente polares y las acciones recíprocas de intercambio iónico son comunes. Demuestran mayor eficiencia de la olumna y la separación excelente comparadas a otros tipos de olumna.

Fuente

Further Reading

Last Updated: Feb 1, 2019

Michael Greenwood

Written by

Michael Greenwood

Michael graduated from Manchester Metropolitan University with a B.Sc. in Chemistry in 2014, where he majored in organic, inorganic, physical and analytical chemistry. He is currently completing a Ph.D. on the design and production of gold nanoparticles able to act as multimodal anticancer agents, being both drug delivery platforms and radiation dose enhancers.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Greenwood, Michael. (2019, February 01). Elegir una superficie de la fase estacionaria para HILIC. News-Medical. Retrieved on September 27, 2021 from https://www.news-medical.net/life-sciences/Choosing-a-Stationary-Phase-Surface-for-HILIC.aspx.

  • MLA

    Greenwood, Michael. "Elegir una superficie de la fase estacionaria para HILIC". News-Medical. 27 September 2021. <https://www.news-medical.net/life-sciences/Choosing-a-Stationary-Phase-Surface-for-HILIC.aspx>.

  • Chicago

    Greenwood, Michael. "Elegir una superficie de la fase estacionaria para HILIC". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/Choosing-a-Stationary-Phase-Surface-for-HILIC.aspx. (accessed September 27, 2021).

  • Harvard

    Greenwood, Michael. 2019. Elegir una superficie de la fase estacionaria para HILIC. News-Medical, viewed 27 September 2021, https://www.news-medical.net/life-sciences/Choosing-a-Stationary-Phase-Surface-for-HILIC.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.