Synthèse de chromatographie

La chromatographie dans les moyens grecs au ` écrivent avec des couleurs.' C'est une technique de séparation polyvalente développée en 1903 par Mikhail Tswett, un botaniste russe. Il a séparé les pigments colorés de centrale utilisant un fléau de carbonate de calcium. Depuis sa découverte, la chromatographie a évolué comme puissant outil dans le laboratoire pour la séparation et l'identification de différents composés dans un mélange.

Empreinte digitale génétique de chromatographie - droit d'auteur d'image : photo/Shutterstock de la science

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Le principe de la chromatographie

La chromatographie exploite la différence dans la polarité de différentes molécules dans un mélange. Dans cette technique, un liquide agit en tant que phase mobile et il balaye au-dessus d'un bâti des particules appelées la phase stationnaire. Une solution témoin contenant le mélange à séparer est introduite dans la phase mobile qui déménage par la phase stationnaire stable. Les composantes dans le mélange sont séparées ont basé sur leur affinité relative aux deux phases. Molécules ayant une affinité plus grande à la course de phase stationnaire plus lente que celle avec peu d'affinité. Les molécules séparées sont alors des normes connues comparées et recensé.

Les avantages de la chromatographie

  • La séparation, les analyses, et la purification précises est possible utilisant la chromatographie.
  • Elle exige les volumes très inférieurs témoin.
  • Cela fonctionne sur un large éventail d'échantillons comprenant des médicaments, des particules alimentaires, des plastiques, des pesticides, des échantillons d'air et d'eau, et des extraits tissulaires.
  • Des composantes de mélange séparées par la chromatographie peuvent être rassemblées individuellement.
  • Elle peut être employée pour séparer les mélanges hautement complexes.

Les types de chromatographie

La chromatographie a évolué au cours des années basées sur les besoins variables de séparation moléculaire. Aujourd'hui plusieurs types de chromatographie sont employés à des fins différentes dans les laboratoires en travers du monde. Quelques types importants sont brièvement discutés ci-dessous :

Chromatographie sur papier - le papier imbibé dans un liquide est employé comme phase stationnaire tandis qu'un solvant liquide agit en tant que phase mobile. Les composantes séparées apparaissent comme endroits sur le papier une fois qu'il est séché.

Chromatographie liquide - cette technique emploie la silice et l'alumine comme phase stationnaire et les solvants organiques comme phase mobile.

Chromatographie sur couche mince - ici, une feuille en plastique ou en verre est enduite d'une couche mince d'adsorbant tel que l'alumine (Al2O3) ou la silice (SiO2). Des composantes sont séparées ont basé sur leur affinité à l'adsorbant et apparaissent en tant que différents endroits sur la feuille après séparation chromatographique.

Chromatographie sur colonne - la chromatographie sur colonne est assimilée à la chromatographie sur couche mince à l'aide de la même phase stationnaire et mobile. La différence ici est que les deux phases sont contenues dans un fléau en verre vertical et le procédé de la séparation est long.

Chromatographie gazeuse (GC) - dans la CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE, un gaz inerte (hélium, azote, argon) est employé car une phase mobile et un solide ou un liquide habituellement composés des polymères de silicium est la phase stationnaire. Le mélange témoin est introduit au fléau garni de la phase stationnaire et est sélecteur adsorbé. Les molécules séparées sont recensées utilisant un détecteur pendant qu'elles partent du fléau.

Chromatographie liquide de haute performance (HPLC) - la CLHP est une forme avancée de chromatographie sur colonne. Dans la CLHP, un mélange témoin est introduit dans la phase mobile (souvent un solvant) et ceci est alors pompé en fléau analytique serré serré à la haute pression pour la séparation rapide des molécules témoin. Cette séparation se fonde sur l'affinité des molécules pour la les deux les phase mobile et particules vêtant le fléau (la phase stationnaire). C'est également chromatographie liquide à haute pression appelée. Chromatographie d'affinité - cette méthode est employée pour séparer les mélanges biochimiques sur la base de l'affinité spécifique entre différentes composantes apparentées telles que l'enzyme et substrat, antigène et anticorps, ou récepteur et ligand.

Chromatographie d'échange ionique - ceci est effectué pour séparer des ions et des molécules polaires sur la base de leur affinité à un échangeur ionique. Il aide dans la séparation des molécules chargées telles que des protéines, des acides aminés, et des nucléotides. Ici, la phase mobile est souvent une solution conductrice (déterminée par concentration en sel). L'adsorption des molécules témoin à un support solide à l'opposé chargé est pilotée par les propriétés ioniques spécifiques par exemple le nombre et l'emplacement de frais sur la molécule.

La séparation concerne varier des conditions telles que la concentration ionique et le pH de sorte que des molécules de corps dissous soient relâchées du fléau dans la commande de leurs forces de gripper, les substances le plus faible liées étant éluées d'abord.

Les applications de la chromatographie

Les applications importantes de la chromatographie dans industries variées sont cotées ci-dessous :

  • Pour surveiller la qualité de l'air et vérifier l'eau potable
  • Dans le dépistage des médicaments en urine et d'autres liquide organiques
  • Utilisé dans l'empreinte digitale et l'identification chimiques de substance
  • Dans l'industrie pharmaceutique :
    • pour épurer des matériaux et analyser des composés chimiques pour des contaminants de trace
    • pour séparer les composés chiraux
  • Pour le contrôle qualité dans l'industrie alimentaire :
    • séparation et analyse des additifs, des agents de conservation, des vitamines, et des protéines
    • pour trouver des toxines et des contaminants en nourriture

Références

[Davantage de relevé : Chromatographie]

Last Updated: Feb 26, 2019

Susha Cheriyedath

Written by

Susha Cheriyedath

Susha has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Chemistry and Master of Science (M.Sc) degree in Biochemistry from the University of Calicut, India. She always had a keen interest in medical and health science. As part of her masters degree, she specialized in Biochemistry, with an emphasis on Microbiology, Physiology, Biotechnology, and Nutrition. In her spare time, she loves to cook up a storm in the kitchen with her super-messy baking experiments.

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