Vista geral da cromatografia

A cromatografia nos meios gregos ao ` escreve com cores.' É uma técnica de separação versátil desenvolvida em 1903 por Mikhail Tswett, um botânico do russo. Separou pigmentos coloridos da planta usando uma coluna do carbonato de cálcio. Depois sua descoberta, a cromatografia evoluiu como uma ferramenta poderosa no laboratório para a separação e a identificação de compostos diferentes em uma mistura.

Fingerprinting genético da cromatografia - imagem Copyright: foto/Shutterstock da ciência

Fingerprinting genético da cromatografia - imagem Copyright: foto/Shutterstock da ciência

O princípio de cromatografia

A cromatografia explora a diferença na polaridade de moléculas diferentes em uma mistura. Nesta técnica, um líquido actua enquanto uma fase móvel e varrem sobre uma base das partículas chamadas a fase estacionária. Uma solução da amostra que contem a mistura a ser separada é introduzida na fase móvel que se move com a fase estacionária estável. Os componentes na mistura são separados basearam em sua afinidade relativa às duas fases. Moléculas que têm uma afinidade maior ao curso da fase estacionária mais lento do que esses com pouca afinidade. As moléculas separadas então são comparadas aos padrões conhecidos e identificadas.

As vantagens da cromatografia

  • A separação, as análises, e a purificação precisas são possíveis usando a cromatografia.
  • Exige volumes de amostra muito baixos.
  • Trabalha em uma vasta gama de amostras que incluem drogas, partículas do alimento, plásticos, insecticidas, amostras do ar e de água, e extractos de tecido.
  • Os componentes da mistura separados pela cromatografia podem ser recolhidos individualmente.
  • Pode ser usada para separar misturas altamente complexas.

Os tipos de cromatografia

A cromatografia evoluiu ao longo dos anos baseado nas necessidades de variação para a separação molecular. Diversos tipos de cromatografia estão sendo usados hoje para fins diferentes nos laboratórios através do mundo. Alguns tipos importantes são discutidos momentaneamente abaixo:

Cromatografia de papel - o papel embebido em um líquido está usado como uma fase estacionária quando um solvente líquido actuar como a fase móvel. Os componentes separados aparecem como pontos no papel uma vez que é secado.

Cromatografia líquida - esta técnica usa o silicone e a alumina como a fase estacionária e solventes orgânicos como a fase móvel.

Cromatografia fina da camada - aqui, uma folha plástica ou de vidro é revestida com uma camada fina de adsorvente tal como a alumina (Al2O3) ou o silicone (SiO2). Os componentes são separados basearam em sua afinidade ao adsorvente e aparecem como pontos individuais na folha após a separação cromatográfica.

Cromatografia de coluna - a cromatografia de coluna é similar à cromatografia fina da camada usando a mesma fase estacionária e móvel. A diferença aqui é que ambas as fases estão contidas dentro de uma coluna de vidro vertical e o processo de separação é demorado.

Cromatografia de gás (GC) - no GC, um gás inerte (hélio, nitrogênio, argônio) é usado porque uma fase móvel e um sólido ou um líquido compo geralmente de polímeros do silicone são a fase estacionária. A mistura da amostra é introduzida à coluna alinhada com a fase estacionária e fixada selectivamente. As moléculas separadas estão identificadas usando um detector enquanto saem da coluna.

Cromatografia líquida do elevado desempenho (HPLC) - a HPLC é um formulário avançado da cromatografia de coluna. Na HPLC, uma mistura da amostra é introduzida na fase móvel (frequentemente um solvente) e esta é bombeada então em uma coluna analítica apertado-embalada na alta pressão para a separação rápida das moléculas da amostra. Esta separação confia na afinidade das moléculas para amba a fase móvel e partículas que revestem a coluna (a fase estacionária). É chamado igualmente a cromatografia líquida de alta pressão. Cromatografia de afinidade - este método é usado para separar misturas bioquímicas com base na afinidade específica entre componentes cognate diferentes tais como a enzima e carcaça, antígeno e anticorpo, ou receptor e ligante.

Cromatografia da troca iónica - isto é realizado para separar íons e moléculas polares com base em sua afinidade a um cambista do íon. Ajuda na separação de moléculas cobradas tais como proteínas, ácidos aminados, e nucleotides. Aqui, a fase móvel é frequentemente uma solução condutora (determinada pela concentração de sal). A adsorção das moléculas da amostra a um apoio contínuo oposta cobrado é conduzida por propriedades iónicas específicas por exemplo o número e o lugar das cargas na molécula.

A separação envolve variar condições tais como a concentração iónica e o pH de modo que as moléculas do solute sejam liberadas da coluna no pedido de suas forças da ligação, as substâncias o mais fraca limitadas que estão sendo eluted primeiramente.

As aplicações da cromatografia

As aplicações importantes da cromatografia em várias indústrias estão listadas abaixo:

  • Para monitorar a qualidade do ar e testar a água potável
  • Na detecção de drogas na urina e nos outros líquidos de corpo
  • Usado no fingerprinting e na identificação químicos da espécie
  • Na indústria farmacêutica:
    • para refinar materiais e analisar compostos químicos para contaminadores do traço
    • para separar compostos chiral
  • Para o controle da qualidade na indústria alimentar:
    • separação e análise dos aditivos, dos preservativos, das vitaminas, e das proteínas
    • para detectar toxinas e contaminadores no alimento

Referências

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Last Updated: Feb 26, 2019

Susha Cheriyedath

Written by

Susha Cheriyedath

Susha has a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Chemistry and Master of Science (M.Sc) degree in Biochemistry from the University of Calicut, India. She always had a keen interest in medical and health science. As part of her masters degree, she specialized in Biochemistry, with an emphasis on Microbiology, Physiology, Biotechnology, and Nutrition. In her spare time, she loves to cook up a storm in the kitchen with her super-messy baking experiments.

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