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Problèmes courants dans la culture cellulaire

La culture cellulaire est le procédé d'isoler des cellules d'un organisme et de grandissant les dans scientifiquement un environnement contrôlé. La contamination est un problème courant dans la culture cellulaire, et les contaminants comprennent le mycoplasme, la levure, les bactéries, et les produits chimiques.

Par Anamaria MejiaCrédit d'image : Anamaria Mejia/Shutterstock

Origines de la culture cellulaire

La pratique de la culture cellulaire a commencé comme culture de tissu en l'année 1907 où Ross Harrison, un biologiste américain et pionnier dans la biologie expérimentale, a développé « la technique suspendante de goutte ».

Harrison a enlevé les fibres nerveuses d'une grenouille et les a mises dans un sérum contenant moyen de sel. Il a observé que les cellules pouvaient se développer facilement dans l'environnement neuf. C'était le début de la culture de cellule animale. Depuis la découverte de Harrison, il y a eu plusieurs avances dans des techniques de culture cellulaire.

Types de culture cellulaire

Les différentes techniques de culture cellulaire sont culture d'organe, culture cellulaire adhérente, culture de suspension, culture primaire, et lignées cellulaires continues.

Culture d'organe

Dans la culture d'organe, l'organe entier explanted, préservant des interactions cellule-cellule. Il est difficile employer culture d'organe pour la détermination quantitative, car la variation entre différents lots expérimentaux est plus élevée.

Culture cellulaire adhérente

La culture cellulaire adhérente comporte la croissance des cellules en tant que couches unitaires adhérentes. Les cellules dépendent du substrat (couche basique) pour la prolifération, par conséquent l'arrêt adhérent de couches unitaires se divisant une fois que deux cellules entrées dans entrent en contact les uns avec les autres.

Culture de suspension

Dans une culture de suspension, l'obligation entre les cellules ou entre les cellules et le substrat sont décomposées utilisant des enzymes protéolytiques pour moissonner davantage.

Culture primaire

Les cultures primaires comportent l'isolement des cellules directement de l'animal.

Ces cellules meurent éventuel et un tissu neuf doit être obtenu de nouveau à partir de l'animal pour préparer une culture neuve. C'est parce que les cellules qui se divisent dans la culture cesseront éventuellement de se diviser sur la sous-culture répétée, réfléchissant le procédé de la sénescence qui se produit habituellement à toutes les cellules in situ.

Lignées cellulaires continues

Pour contrer la question de la sénescence, des lignées cellulaires continues ont été développées. Ces lignées cellulaires sont habituellement obtenues en cultivant des cellules tumorales et n'exigent pas n'importe quel substrat pour leur accroissement.

Problèmes courants dans la culture cellulaire

Il y a beaucoup de pratiques pour traiter des lignées cellulaires, des medias de culture cellulaire et des réactifs pour éviter la contamination transversale. Certaines des éditions courantes faites face sont indiquées ci-dessous :

Contamination par des bactéries, des champignons, et la levure

Ce type de contamination peut se produire par le matériel de laboratoire, réactifs, et même par le cheveu, les mains, l'haleine, ou le vêtement du conducteur. Les retombées radioactives particulaires ou les retombées radioactives d'aérosol pendant n'importe quelle étape de la cultivation mèneront à la contamination biologique.

De plus, les installations de laboratoire telles que les modules laminaires de flux d'air, dioxyde de carbone ont humidifié des incubateurs, et les bains de l'eau sont des sources pour la contamination biologique indépendamment d'en raison entraîné par contamination de la poussière, des aérosols, ou de la présence des crevasses. Le flacon avec les capuchons desserrés et les plaques de culture incorrect scellées préparent le terrain pour que les contaminants rampent, de nagent, et se développer dans les cultures.

Contamination de mycoplasme

Connu comme « crabgrass » des cultures cellulaires, les mycoplasmas ont la capacité de modifier le fonctionnement de cellules de la culture d'hôte provoquant des effets cytopathes.

Contamination chimique

Les constitutions incorrectes des réactifs ou la qualité inférieure de l'eau, des sérums, ou des récipients utilisés pour préparer les réactifs sont quelques raisons de contamination chimique d'une culture cellulaire.

Les endotoxines, le dérivé des bacilles gram négatifs, sont parfois trouvées en sérums et d'autres additifs qui affectent l'accroissement d'une culture.

Prévention de la contamination de culture

Les mesures suivantes peuvent être prises pour réduire le risque de contamination de culture :

  • Utilisation de bonnes techniques aseptiques ;
  • Réduisant des accidents, tels que des effusions dans la zone de manoeuvre ;
  • Maintenant le laboratoire et environnant les zones de manoeuvre nettoient ;
  • Utilisation judicieuse des antibiotiques d'éviter la formation des tensions résistant aux antibiotiques ;
  • Vérifications courantes de qualité pour la contamination ; et
  • L'utilisation stratégique des dépôts gelés de cellules sont certaines des opérations pour régler la contamination.
Aseptic Techniques: Cell Culture Basics

Mettre des mesures adéquates de réduire la contamination de culture peut sauvegarder l'industrie de recherches des pertes monétaires énormes ainsi que prévenir des risques sanitaires dans le personnel de laboratoire qui sont par habitude exposés aux virus efficaces (VIH, hépatite B, Epstein Barr, herpès), aux bactéries et à d'autres microbes.

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Last Updated: Oct 3, 2018

Deepthi Sathyajith

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Deepthi Sathyajith

Deepthi spent much of her early career working as a post-doctoral researcher in the field of pharmacognosy. She began her career in pharmacovigilance, where she worked on many global projects with some of the world's leading pharmaceutical companies. Deepthi is now a consultant scientific writer for a large pharmaceutical company and occasionally works with News-Medical, applying her expertise to a wide range of life sciences subjects.

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