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Problemas comunes en cultivo celular

El cultivo celular es el proceso de aislar las células de un organismo y de crecerlas en un ambiente científico controlado. La contaminación es un problema común en cultivo celular, y los contaminantes incluyen micoplasma, la levadura, bacterias, y las substancias químicas.

Por Anamaria MejiaHaber de imagen: Anamaria Mejia/Shutterstock

Orígenes del cultivo celular

La práctica del cultivo celular comenzó como cultura del tejido en el año 1907 en que Ross Harrison, biólogo americano y pionero en biología experimental, desarrolló “la técnica de la caída de la ejecución”.

Harrison quitó las fibras de nervio de una rana y las colocó en un suero que contenía mediano de la sal. Él observó que las células podían crecer fácilmente en el nuevo ambiente. Éste era el principio del cultivo celular animal. Desde el descubrimiento de Harrison, ha habido varios avances en técnicas del cultivo celular.

Tipos de cultivo celular

Las diversas técnicas del cultivo celular son cultura de órgano, cultivo celular adherente, cultura de suspensión, cultura primaria, y variedades de células contínuas.

Cultura de órgano

En cultura de órgano, el órgano entero explanted, preservando acciones recíprocas de la célula-célula. La cultura de órgano es difícil de utilizar para la determinación cuantitativa, pues la variación entre diversas mezclas experimentales es más alta.

Cultivo celular adherente

El cultivo celular adherente implica el incremento de células como capas monomoleculares adherentes. Las células son relacionadas en la capa inferior (capa básica) para la proliferación, por lo tanto el parada adherente de las capas monomoleculares dividiendo una vez que dos células entradas en contacto con uno a.

Cultura de suspensión

En una cultura de suspensión, la ligazón entre las células o entre las células y la capa inferior se analiza usando las enzimas proteolíticas para más lejos cosechar.

Cultura primaria

Las culturas primarias implican el aislamiento de células directamente del animal.

Estas células mueren final y un nuevo tejido necesita ser obtenido del animal de nuevo para preparar un nuevo cultivo. Esto es porque las células que dividen en cultura dejarán eventual de dividir sobre crear una subcultura relanzado, reflejando el proceso de la senectud que ocurre generalmente a todas las células in situ.

Variedades de células contínuas

Para contradecir la aplicación la senectud, las variedades de células contínuas fueron desarrolladas. Estas variedades de células son obtenidas cultivando las células del tumor y no requieren generalmente ninguna capa inferior para su incremento.

Problemas comunes en cultivo celular

Hay muchas prácticas para manejar variedades de células, ambientes del cultivo celular y los reactivos para evitar la contaminación cruzada. Algunas de las entregas comunes hechas frente se declaran abajo:

Contaminación por las bacterias, los hongos, y la levadura

Este tipo de contaminación puede suceso a través del equipo de laboratorio, reactivos, e incluso a través del pelo, de las manos, de la respiración, o de la ropa del operador. El polvillo radiactivo de partículas o el polvillo radiactivo del aerosol durante cualquier escenario de cultivar llevará a la contaminación biológica.

Además, las instalaciones del laboratorio tales como cabinas del flujo de aire laminar, dióxido de carbono humedecieron las incubadoras, y los baños del agua son fuentes para la contaminación biológica aparte de debido causada contaminación sacudir, los aerosoles, o la presencia de hendeduras. El matraz con los casquillos flojos y las placas de cultura incorrectamente tapadas pavimentan la manera para que los contaminantes se arrastren, naden, y crezcan en las culturas.

Contaminación del micoplasma

Conocido como el “garranchuelo” de los cultivos celulares, los mycoplasmas tienen la capacidad de alterar la función de la célula de la cultura del ordenador principal que causa efectos citopáticos.

Contaminación química

Las constituciones incorrectas de reactivos o la calidad inferior al nivel normal del agua, de los sueros, o de los contenedores usados para hacer los reactivos son algunas razones de la contaminación química de un cultivo celular.

Las endotoxinas, el subproducto de bacterias gramnegativas, se encuentran a veces en los sueros y otros añadidos que afectan al incremento de una cultura.

Prevención de la contaminación de la cultura

Las medidas siguientes se pueden tomar para reducir el riesgo de contaminación de la cultura:

  • Uso de buenas técnicas asépticas;
  • Reduciendo accidentes, tales como derramamientos en área de trabajo;
  • Guardando el laboratorio y el trabajo circundante las áreas limpian;
  • Uso juicioso de antibióticos de prevenir la formación de deformaciones resistentes a los antibióticos;
  • Comprobaciones para rutinarias de la calidad la contaminación; y
  • El uso estratégico de los depósitos congelados de la célula es algunos de los pasos para controlar la contaminación.
Aseptic Techniques: Cell Culture Basics

Poner dimensiones adecuadas de reducir la contaminación de la cultura puede salvar la industria de la investigación de bajas monetarias enormes así como prevenir los peligros para la salud en los personales del laboratorio que se exponen rutinario a los virus potentes (VIH, hepatitis B, Epstein Barr, herpes), a las bacterias y a otros microbios.

Fuentes:

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Last Updated: Oct 3, 2018

Deepthi Sathyajith

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Deepthi Sathyajith

Deepthi spent much of her early career working as a post-doctoral researcher in the field of pharmacognosy. She began her career in pharmacovigilance, where she worked on many global projects with some of the world's leading pharmaceutical companies. Deepthi is now a consultant scientific writer for a large pharmaceutical company and occasionally works with News-Medical, applying her expertise to a wide range of life sciences subjects.

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