Cromatografía a contracorriente

La cromatografía a contracorriente (CCC) se puede definir como “técnica de la separación cromatográfica basada en la partición de solutos entre dos diversas fases líquidas que no consigue mezclada junta. Las dos fases son fase movible y fase estacionaria (el líquido apoyo-libre)”.

Investigadores que analizan haber líquido de los datos del chromotography: Dimitry Kalinovsky/Shutterstock.com

Este tipo de cromatografía se conoce de otra manera como la “cromatografía de dos líquidos” (LLC) y él utiliza olumnas especiales pues ambas las fases son líquidos y no se utiliza ninguna matriz sólida para conservar la fase estacionaria.

Estas fases líquidas utilizan un tubo fino para obrar recíprocamente con uno a bajo campo creado por la fuerza gravitacional o centrífuga con la cual se lleva a cabo la fase estacionaria mientras que la fase movible se hace para entrar en ella. La estabilidad de la fase estacionaria suceso solamente hasta la existencia del campo centrífugo.

Principio y proceso del CCC

Los trabajos a contracorriente de la cromatografía basados en el principio de la división de los líquidos en los cuales los líquidos inmiscibles juntos y entonces se combinan separaron varias veces. El aislamiento de cada soluto individual se hace en base del “coeficiente de la partición” de eso composición determinada presente en la fase solvente comparado con la fase los diluente.

El coeficiente “K” de la partición es obtenido tomando la índice de la distribución del soluto entre las dos fases solventes mutuamente equilibradas.

  • Divida el coeficiente, K = la cantidad de soluto en la fase estacionaria/la cantidad de soluto en fase movible

En esta tecnología, la fase estacionaria, que se permite en una olumna que haga girar a una velocidad rotatoria razonable, es llevada a cabo por la fuerza centrífuga generada. La fase movible que contiene los solutos que deben ser separados entonces se introduce en la olumna y después se activa a la fase estacionaria.

Así, ambas las fases consiguen mezcladas. El intercambio de moléculas suceso entre las fases durante este tiempo y los solutos consiguen separados basado en el coeficiente específico de la partición de cada soluto individual.

La fase que es movible consigue decantada en los enchufes de cada célula que la llevan a la célula subsiguiente. Los restos ambas las fases después de que la elución que contienen los solutos purificados individuo entonces se recolecte durante un período que coloque a partir de algunos minutos a las horas.

Historia y adelanto del CCC

La idea de la primera máquina a contracorriente de la cromatografía fue propuesta por Craig y el poste a finales de los años 40. Consistió en un poco más que una serie de conos de separación de cristal interconectados esperados con (gravedad de la tierra) la fuerza gravitacional 1g.

Esta fuerza era escasa para estabilizar la fase estacionaria y podía utilizar solamente la fase más densa como estacionaria. Aunque tardó días para terminar el experimento con esta máquina, tenía la capacidad para resolver mezclas altamente complejas. Pues la técnica es apacible y dio la alta resolución, fue utilizada en la purificación de productos de alto valor como remedio chino y otros productos naturales.

La cromatografía a contracorriente de la gotita (DCCC) es otra técnica desarrollada por Ito en 1970. Esta técnica también utilizó la fuerza gravitacional 1g para estabilizar la fase estacionaria, mientras que la fase movible fue bombeada a través de la olumna.

El único adelanto de este método el anterior era que permitió el usar de dos fases unas de los como la fase estacionaria. Sin embargo, la estabilización de la fase estacionaria seguía siendo pobre incluso a los regímenes del flujo bajo y tardó días para terminar el experimento. La fase-mezcla pobre era otra desventaja de este método.

La posibilidad de usar la fuerza centrífuga para estabilizar fase estacionaria fue experimentada por Ito en los años 70. Él y sus personas desarrollaron una centrifugadora planetaria hidrodinámica de la bobina hecha con Teflon o los tubos del acero hieren espiral en capas en una bobina rotatoria. Esta técnica fue nombrada como la cromatografía a contracorriente de alta velocidad o HSCCC, pues la duración experimental era solamente 3 a 4 horas.

De acuerdo con el principio de DCCC, Sanki (compañía de ingeniería del instrumento) desarrolló la cromatografía centrífuga de la partición (CPC) en los años 80. El CPC es una técnica hidrostática que contiene una serie de células interconectadas de la separación conectadas por los capilares en una ordenación radial puesta alrededor de un disco. Gira en el único avión produciendo alrededor de 80g de la fuerza centrífuga.

La invención de la cromatografía a contracorriente de alto rendimiento (HPCCC) fue hecha en el 2000s temprano. Esta tecnología se ejecuta con una fuerza centrífuga de 240g y utiliza flujos más altos para producir el resultado en aproximadamente 10 minutos. Pues la fuerza es más alta, la estabilidad de la fase estacionaria es también más alta aquí.

Cese

Hay muchas ventajas para una técnica de la cromatografía que utilice un líquido como la fase estacionaria. Algunas de ellas son:

  • alta capacidad de cargamento
  • un mecanismo simple de la retención
  • uso de cualquiera de las fases como fase movible
  • falta de problemas pH-relacionados
  • desnaturalización biológica inferior del soluto
  • falta de adsorción irreversible del soluto.

Todas estas ventajas hacen más preferible que otras técnicas cromatográficas.

El CCC, especialmente cromatografía a contracorriente de alto rendimiento, debido a su tiempo experimental de alta resolución y más corto es una técnica cromatográfica extensamente validada en actuales épocas. Los productos médicos, naturales, y tradicionales se pueden purificar fácilmente en un modo eficaz y en poco tiempo una envergadura usando esta tecnología.

Fuentes:

  1. https://gfp.people.uic.edu/countercurrent/content/theory.htm
  2. https://core.ac.uk/download/pdf/337496.pdf
  3. http://www.mariecurie.org/annals/volume4/chem1.pdf
  4. http://dynamicextractions.com/SharedFiles/Download.aspx?pageid=26&mid=79&fileid=51
  5. http://www.kromaton.com/en/the-cpc/technologies
  6. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4032468/
  7. https://gfp.people.uic.edu/ccc2016/pdf/CCC2012_BookOfAbtracts.pdf
  8. http://lipidlibrary.aocs.org/Analysis/content.cfm?ItemNumber=40802
  9. www.wjpr.net/download/article/1467267439.pdf
  10. http://www.ijpra.com/File_Folder/353-360(ijpra).pdf

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Last Updated: Aug 23, 2018

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