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Efeitos da contaminação do Mycoplasma na pesquisa

A contaminação do Mycoplasma é uma infecção bacteriana das culturas celulares nos laboratórios. Estas bactérias são difíceis de detectar e podem facilmente espalhar de uma cultura a outra uma vez dentro de um laboratório.

Cientista do laboratório que introduz com pipeta media de cultura do prato de petri da cultura celular.Crédito de imagem: PolakPhoto/Shutterstock

Quando o mycoplasma for um tanto comensal na natureza, podem ter efeitos severos na proliferação de pilha e na saúde da cultura. Isto, por sua vez, afecta os resultados experimentais e pode enviesar a investigação científica. Devido a isto, a contaminação do mycoplasma é tratada muito seriamente.

Culturas celulares

O regulamento aumentado do teste animal conduziu cada vez mais grupos de investigação girar para culturas celulares. Isto permite que os mecanismos celulares sejam estudados independentemente de um animal vivo, porque as pilhas são isoladas e crescidas em um ajuste ambiental controlado.

Quando benéficas de várias maneiras, as culturas celulares são expor mais às ameaças ambientais devido a faltar um sistema de defesa fisiológico completo. Muitos contaminadores bacterianos e fungosos podem mais facilmente ser detectados porque crescem mais obviamente, mas os mycoplasmas são mais subtler e conseqüentemente detectar mais duramente.

De facto, alguns pesquisadores sugeriram que a contaminação do mycoplasma fosse tão difundida e difícil detectar que é a norma, não a exceção, ao crescer culturas celulares.

Independentemente de estudar a fisiologia da pilha, as culturas celulares são usadas para criar substâncias biologicamente activas, tais como vacinas. Em tais ajustes, a contaminação do mycoplasma pode causar a falha vacinal. As vacinas são produzidas nas culturas celulares preliminares, que muitas, mas não tudo, países exigem ser verificadas para ver se há a contaminação de mycoplasma antes que a vacina possa ser liberada para o uso em seres humanos.

Contaminação

A contaminação do Mycoplasma de culturas celulares é chocante comum. Quando somente 1% de culturas celulares preliminares e 5% de culturas celulares adiantadas da passagem forem contaminadas, umas 15-35% calculado de linha celular humanas ou animais contínuas estão contaminadas.

Contudo, o crescimento do mycoplasma é relativamente lento. Independentemente de uma estadia de geração longa de em qualquer lugar 1 a 9 horas, seus meios longos da fase lactente pode tomar sobre uma semana da contaminação inicial até que uma cultura esteja visível.

Uma vez que o mycoplasma contaminou uma cultura e cresceu bastante, o crescimento excedente pode causar a deterioração das pilhas na cultura e na perda subseqüente da cultura.

Apesar disto, desde que o comportamento do mycoplasma é diferente nas culturas celulares do que em organismos vivos, não há nenhum relatório consistente de como o mycoplasma afecta pilhas nas culturas. Os efeitos podem igualmente variar segundo o tipo de pilha contaminado.

Efeitos metabólicos

Mycoplasmas pode fermentar, significando eles degrada açúcares simples para obter a energia. Contudo, este processo cria os metabolitos ácidos que são prejudiciais para pilhas circunvizinhas, alterando a função da pilha ou induzindo efeitos cytopathic.  

Algumas espécies do mycoplasma são acreditadas para utilizar um caminho do deiminase da arginina para obter a energia. Isto tem diversos efeitos prejudiciais para culturas celulares contaminadas.

A redução na arginina no media de cultura em conseqüência deste caminho conduz às anomalias de crescimento em pilhas cultivadas, na viabilidade reduzida, no destacamento da pilha da superfície da embarcação de cultura, e na granulação celular.

Um dos efeitos comuns da contaminação do mycoplasma é a aberração cromossomática, que é trazida sobre pela falta da arginina. Esta falta da arginina é prejudicial à produção do histone no núcleo. Conseqüentemente, o metabolismo do mycoplasma pode ser ambos directa e indirectamente prejudiciais ao funcionamento da pilha de anfitrião.

Além do que a arginina reduzida no ambiente, há alguma evidência que o deiminase da arginina pode directamente modular o ciclo de pilha. O deiminase da arginina pode prender pilhas a fase em G1 e no G2 no ciclo de pilha durante a réplica. A apreensão na fase G1 do ciclo de pilha é ligada igualmente ao apoptosis.

Tem estado algumas relações que mostram que o apoptosis da pilha pode ser devido ao deiminase da arginina que prende pilhas no G1. Esta pode então ser uma maneira em que apoptosis da causa do mycoplasma e destruição da cultura celular.

Degradação do ADN

Mycoplasmas é as bactérias relativamente escassas que faltam a capacidade para sintetizar seus próprios precursores do material genético. Conseqüentemente props-se que os mycoplasmas utilizassem nucleases para degradar o ADN de pilhas circunvizinhas. Os Endonucleases produzidos pelo mycoplasma podem permanecer localizados na membrana ou ser segregados no espaço extracelular.

Para confirmar a suspeita que os endonucleases do mycoplasma podem, e faz, degradação do ADN da causa, uma experiência foi conduzida onde os endonucleases do mycoplasma foram refinados parcialmente. Os Endonucleases foram demonstrados então para fender directamente a cromatina dentro dos núcleos da carcaça.

Isto pode ser acompanhado do apoptosis, e assim da destruição subseqüente da cultura. Por este motivo, a contaminação do mycoplasma pode ser incredibly prejudicial à pesquisa que refere-se o apoptosis, desde que pode dar resultados falsos sobre nucleases.

Mesmo sugeriu-se que, dado a taxa alta de contaminação do mycoplasma, muitos nucleases apoptotic relatados das linhas da cultura celular não pudessem ser da origem eucariótica de todo.  

Fontes:

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Last Updated: Feb 26, 2019

Sara Ryding

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Sara Ryding

Sara is a passionate life sciences writer who specializes in zoology and ornithology. She is currently completing a Ph.D. at Deakin University in Australia which focuses on how the beaks of birds change with global warming.

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