Paramètres mesurables de cytométrie de flux

Le fait que la cytométrie de flux active la mesure simultanée des paramètres cellulaires multiples est l'un des aspects les plus puissants de cette technologie. La technique a un large éventail d'applications comprenant l'identification des antigènes dans ou sur la surface d'une cellule, analyse d'ADN et d'ARN et un certain nombre d'autres utilisations de potentiel. Quelques exemples des paramètres qui peuvent être évalués utilisant la cytométrie de flux sont décrits ci-dessous.

Analyse fonctionnelle

La cytométrie de flux peut être employée pour évaluer les modifications qui se produisent en cellules sur une courte période. Activités biologiques telles que la variation de la teneur en calcium en réponse aux médicaments ; le rétablissement des espèces réactives de l'oxygène ou des modifications mitochondriales de membrane pendant l'apoptose et des régimes de phagocytose utilisant les bactéries marquées, peuvent tout être évalués utilisant la cytométrie de flux.

Viabilité

Une teinture d'obligatoire d'ADN peut être ajoutée à une population cellulaire pour évaluer la viabilité de cellules après l'introduction d'un organisme pathogène. Quand l'intégrité de la membrane de plasma est compromise, une cellule devient nécrotique et permet à des teintures de viabilité de l'écrire. Des cellules mortes peuvent maintenant être recensées au tôt ou les étapes tardives de la nécrose utilisant une gamme des teintures de viabilité, de quantification d'ADN et en mesurant la diffusion latérale de la membrane sondent BRI-oxonal.

Apoptose

Le suicide d'une cellule comme instruit par des gènes désigné sous le nom de l'apoptose. La cytométrie de flux peut être employée pour trouver le morphologique et les modifications biologiques caractéristiques qui se produisent pendant l'apoptose. Les exemples des modifications morphologiques comprennent des changements de forme de cellules, de perte de structures sur la surface de cellules, de détachement de cellules, de condensation du cytoplasme, de rétrécissement de cellules, de phagocytose des résidus cellulaires et de changements de l'enveloppe nucléaire. Quelques exemples des modifications biologiques comprennent la protéolyse, la dénaturation d'ADN, la déshydratation de cellules, l'édition absolue de protéine, et une augmentation dans les ions calcium libres.

Nécrose

Des mesures de nécrose peuvent être dérivées de l'oncosis, de l'apoptose et des procédés de phagocytose d'individu. Oncosis se réfère à la nécrose suite à un événement qui fait gonfler la cellule plutôt que rétrécissent (comme se produit dans l'apoptose). Pendant l'oncosis, la cellule et les organelles à l'intérieur il houle. La membrane de plasma éventuellement rompt et est suivie de l'étape nécrotique où la cellule relâche les enzymes protéolytiques qui endommagent le tissu environnant. La cellule rétrécit (l'apoptose) et les modifications se produisent dans le potentiel mitochondrial de structure et de transmembrane. La chromatine se condense également.

Analyse de cycle cellulaire

La prolifération cellulaire peut être évaluée en mesurant les différentes étapes du cycle cellulaire dans une population des cellules. Le teneur d'ADN varie avec chaque phase du cycle cellulaire et ceci peut être évalué utilisant les teintures fluorescentes et les anticorps monoclonaux d'obligatoire d'ADN pour trouver l'expression des antigènes. Car le H3 d'histone subit la phosphorylation entre le prophase et l'anaphase, cette protéine peut être employée pour distinguer G2 et phases de m en évaluant le cycle cellulaire.

Quelques autres exemples des paramètres qui peuvent être évalués utilisant la cytométrie de flux sont cotés ci-dessous :

  • Mesure des pigments de cellules tels que la chlorophylle ou la phycoérythrine
  • Mesure de la variation de numéro de copie d'ADN utilisant des Flux-POISSONS (hybridation in-situ fluorescente) ou la technologie de BAC-sur-Talons
  • Mesure des antigènes intracellulaires tels que des cytokines ou des médiateurs secondaires
  • Mesure d'activité enzymatique
  • Mesure de paquet d'impulsions oxydant
  • Dépistage de glutathion
  • Mesure d'adhérence de cellules

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Last Updated: Aug 23, 2018

Sally Robertson

Written by

Sally Robertson

Sally has a Bachelor's Degree in Biomedical Sciences (B.Sc.). She is a specialist in reviewing and summarising the latest findings across all areas of medicine covered in major, high-impact, world-leading international medical journals, international press conferences and bulletins from governmental agencies and regulatory bodies. At News-Medical, Sally generates daily news features, life science articles and interview coverage.

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