Parámetros mensurables del Cytometry de flujo

El hecho de que el cytometry de flujo habilite la medición simultánea de parámetros celulares múltiples es uno de los aspectos más potentes de esta tecnología. La técnica tiene una amplia gama de usos incluyendo la identificación de antígenos dentro o en de la superficie de una célula, análisis de la DNA y del ARN y varias otras aplicaciones del potencial. Algunos ejemplos de los parámetros que se pueden fijar usando cytometry de flujo son descritos más abajo.

Análisis funcional

El cytometry de flujo se puede utilizar para evaluar los cambios que ocurren en células durante un corto período de tiempo. Actividades biológicas tales como variación en contenido del calcio en respuesta a las drogas; la generación de especie reactiva del oxígeno o de cambios mitocondriales de la membrana durante regímenes del apoptosis y de la fagocitosis usando bacterias etiqueta, puede todos ser fijada usando cytometry de flujo.

Viabilidad

Un tinte del atascamiento de la DNA se puede agregar a una población de la célula para fijar viabilidad de la célula después de la introducción de un organismo patógeno. Cuando la integridad de la membrana de plasma se compromete, una célula llega a ser necrótica y permite que los tintes de la viabilidad la entren en. Las células muertas se pueden ahora determinar en el temprano o los últimos escenarios de la necrosis usando un alcance de los tintes de la viabilidad, de la cuantificación de la DNA y con la medición de la dispersión lateral de la membrana sondan el Bis-oxonal.

Apoptosis

La autodestrucción de una célula según lo dado instrucciones por los genes se refiere como apoptosis. El cytometry de flujo se puede utilizar para descubrir los cambios morfológicos y bioquímicos característicos que ocurren durante apoptosis. Los ejemplos de cambios morfológicos incluyen cambios en forma de la célula, la baja de estructuras en la superficie de la célula, el destacamento de la célula, la condensación del citoplasma, la contracción de la célula, la fagocitosis de residuos celulares y cambios en el envolvente nuclear. Algunos ejemplos de cambios bioquímicos incluyen proteólisis, la desnaturalización de la DNA, la deshidratación de la célula, la interconexión de la proteína, y una subida en los iones libres del calcio.

Necrosis

Las mediciones de la necrosis se pueden derivar de procesos de la fagocitosis del oncosis, del apoptosis y del uno mismo. Oncosis refiere a necrosis como resultado de una acción que haga la célula hincharse bastante que se encoge (como ocurre en apoptosis). Durante oncosis, la célula y los organelos dentro él inflamación. La membrana de plasma rompe y es seguida eventual por el escenario necrótico donde la célula libera las enzimas proteolíticas que dañan el tejido circundante. La célula encoge (apoptosis) y los cambios ocurren en el potencial mitocondrial de la estructura y de la transmembrana. La cromatina también condensa.

Análisis del ciclo celular

La proliferación celular puede ser fijada midiendo los diversos escenarios del ciclo celular en una población de células. El contenido de la DNA varía con cada fase del ciclo celular y esto se puede fijar usando los tintes fluorescentes del atascamiento de la DNA y los anticuerpos monoclonales para descubrir la expresión de antígenos. Pues la histona H3 experimenta la fosforilación entre el prophase y la anafase, esta proteína se puede utilizar para distinguir entre G2 y las fases de m al fijar el ciclo celular.

Algunos otros ejemplos de los parámetros que se pueden fijar usando cytometry de flujo son mencionados abajo:

  • Medición de los pigmentos de la célula tales como clorofila o ficoeritrina
  • Medición de la variación del número de copia de la DNA usando los Flujo-PESCADOS (hibridación "in-situ" fluorescente) o la tecnología de las BACs-en-Molduras
  • Medición de antígenos intracelulares tales como cytokines o mediadores secundarios
  • Medición de la actividad enzimática
  • Medición de la explosión oxidativa
  • Detección del glutatión
  • Medición de la adhesión de la célula

Fuentes

  1. www2.massgeneral.org/aids/flow_cytometry/documents/IntrotoFlow.pdf
  2. http://crl.berkeley.edu/IntroductionWeb.pdf
  3. http://facs.scripps.edu/BRJIM.pdf
  4. www.biozentrum.unibas.ch/.../Introduction_to_Flow_Cytometry-2012.pdf
  5. files.nyu.edu/.../introduction.pdf
  6. http://www.icms.qmul.ac.uk/flowcytometry/uses/viability/index.html
  7. http://www.medicine.virginia.edu/research/cores/FlowCytometry/training/document-files/Intro-to-Flow-Cytometry-notes.pdf
  8. http://cytometry.arl.arizona.edu/content/capabilities-and-applications
  9. http://www.bioinformin.net/cytometry.php
  10. http://bitesizebio.com/13695/basic-measurements-of-flow-cytometer-forward-side-scatter-quantitative-flow-cytometry/

[Lectura adicional: Cytometry de flujo]

Last Updated: Aug 23, 2018

Sally Robertson

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Sally Robertson

Sally has a Bachelor's Degree in Biomedical Sciences (B.Sc.). She is a specialist in reviewing and summarising the latest findings across all areas of medicine covered in major, high-impact, world-leading international medical journals, international press conferences and bulletins from governmental agencies and regulatory bodies. At News-Medical, Sally generates daily news features, life science articles and interview coverage.

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