Aviso: Esta página é uma tradução automática da página original em inglês. Por favor note uma vez que as traduções são geradas por máquinas, não tradução tudo será perfeita. Este site e suas páginas da Web destinam-se a ler em inglês. Qualquer tradução deste site e suas páginas da Web pode ser imprecisas e imprecisos no todo ou em parte. Esta tradução é fornecida como uma conveniência.

Técnicas do Cytometry de fluxo usadas na medicina e na pesquisa

O cytometry de fluxo é uma técnica útil para a análise de grandes populações das pilhas. Este artigo descreve a combinação de cytometry de fluxo com outras técnicas (tais como a pilha que classifica) e as aplicações destas técnicas na medicina e na pesquisa.

Este artigo cobrirá:

O cytometry de fluxo pode ser usado para analisar amostras de sangue. Esta imagem mostra a variedade de pilhas que estam presente no córrego do sangue humano.Sebastian Kaulitzki | Shutterstock

classificação Fluorescência-ativada da pilha (FACS)

o cytometry da pilha da classificação (FACS) Fluorescência-ativada e de fluxo é usado frequentemente como termos permutáveis. Contudo, FACS é um método especializado do cytometry de fluxo que ajude a classificar fisicamente uma mistura da pilha em populações diferentes.

Em primeiro lugar, um anticorpo que seja específico a uma proteína da superfície da pilha é etiquetado com uma molécula fluorescente e adicionado à população das pilhas. Então, como as pilhas passam através do laser, um eléctrodo actual na máquina de FACS impor uma carga elétrica em cada pilha baseada sobre se a pilha é fluorescente ou não-fluorescente. Subseqüentemente, os electroímãs são empregados para classificar as pilhas nas embarcações diferentes baseadas em suas diferenças da carga. Este método pode ser usado para determinar vários parâmetros, tais como o índice do RNA e do ADN de uma pilha.

Contadores de relha

Um contador de relha é um dispositivo que seja usado para contar e fazer sob medida partículas suspendidas. Este método de contagem pode ser usado para pilhas, bactérias, pilhas prokaryotic, vírus, etc. Este método veio ser reconhecido como o método de referência para analisar o tamanho e as partículas de partícula.

O método da relha é baseado em mudanças de medição na impedância elétrica que é gerada pelas partículas que são não-condutoras e suspendida no eletrólito. A impedância é a oposição actual em um circuito à corrente quando uma tensão é aplicada, similar à resistência encontrada na C.C. circuita.

O contador consiste em duas câmaras que contêm as soluções do eletrólito separadas por um microcanal. O líquido junto com as partículas ou as pilhas são desenhados no microcanal. Enquanto a partícula ou a pilha se movem através do microcanal, desloca seu volume de eletrólito. Este volume deslocado é detectado como um pulso de tensão onde a altura do pulso seja proporcional ao volume da pilha.

Disposição Cytometric do grânulo

A disposição cytometric do grânulo é uma aplicação do cytometry de fluxo onde os usuários podem simultaneamente determinar proteínas múltiplas. Uma série de grânulos minúsculos que têm intensidades discretas da fluorescência é usada para detectar analytes solúveis múltiplos das amostras, tais como um únicas soro, plasma, ou amostras do supernatant da cultura do tecido.

Os grânulos específicos são misturados com os anticorpos phycoerythrin-conjugados da detecção e incubados com as amostras, formando complexos do sanduíche. Este método usa a sensibilidade da detecção da fluorescência pelo cytometry de fluxo para medir os parâmetros de analytes solúveis usando um immunoassay.

Aplicações do cytometry de fluxo na medicina e na pesquisa

Há umas aplicações numerosas do cytometry de fluxo, tal como a detecção e a medida da expressão da proteína e de alterações cargo-translational, incluindo proteínas fendidas e phosphorylated. Immunotyping é uma outra aplicação, onde os anticorpos fluorescência-conjugados sejam usados para detectar proteínas específicas na superfície das pilhas. Isto pode igualmente ser usado para determinar a eficiência do transfection de expressar um gene usando um marcador, tal como GFP.

A presença de antígenos específicos é usada igualmente para diagnosticar leucemia agudas, doenças lymphoproliferative crônicas, e linfomas malignos. Diversos métodos cytometric são usados para detectar a morte celular e a necrose programadas no curso de uma experiência, ou durante estados doentes. A intensidade da fluorescência do ADN é usada durante o cytometry de fluxo para determinar a quantidade de progressão celular do ciclo do ADN e de pilha.

Ao usar antibióticos, este método pode ser usado para determinar a taxa de morte bacteriana. Por exemplo, as pilhas vivas consistem nas membranas intactos e são assim impermeáveis às tinturas como o iodeto do propidium. No caso da morte celular, a integridade da membrana de pilha é rompida, conduzindo à tintura que escapa na pilha. Isto ajuda detecta a ràpida e confiantemente pilhas vivas e inoperantes.

O cytometry de fluxo é usado igualmente para medir as mudanças biológicas que ocorrem dentro das pilhas sobre durações do curto período de tempo. Estes incluem mudanças no índice do cálcio na presença das drogas e dos agonistas, em mudanças potenciais da membrana, e em níveis reactivos da espécie do oxigênio durante a morte celular.

Fontes:

Further Reading

Last Updated: Jun 28, 2019

Dr. Surat P

Written by

Dr. Surat P

Dr. Surat graduated with a Ph.D. in Cell Biology and Mechanobiology from the Tata Institute of Fundamental Research (Mumbai, India) in 2016. Prior to her Ph.D., Surat studied for a Bachelor of Science (B.Sc.) degree in Zoology, during which she was the recipient of an Indian Academy of Sciences Summer Fellowship to study the proteins involved in AIDs. She produces feature articles on a wide range of topics, such as medical ethics, data manipulation, pseudoscience and superstition, education, and human evolution. She is passionate about science communication and writes articles covering all areas of the life sciences.  

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    P, Surat. (2019, June 28). Técnicas do Cytometry de fluxo usadas na medicina e na pesquisa. News-Medical. Retrieved on March 05, 2021 from https://www.news-medical.net/life-sciences/Flow-Cytometry-Techniques-used-in-Medicine-and-Research.aspx.

  • MLA

    P, Surat. "Técnicas do Cytometry de fluxo usadas na medicina e na pesquisa". News-Medical. 05 March 2021. <https://www.news-medical.net/life-sciences/Flow-Cytometry-Techniques-used-in-Medicine-and-Research.aspx>.

  • Chicago

    P, Surat. "Técnicas do Cytometry de fluxo usadas na medicina e na pesquisa". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/Flow-Cytometry-Techniques-used-in-Medicine-and-Research.aspx. (accessed March 05, 2021).

  • Harvard

    P, Surat. 2019. Técnicas do Cytometry de fluxo usadas na medicina e na pesquisa. News-Medical, viewed 05 March 2021, https://www.news-medical.net/life-sciences/Flow-Cytometry-Techniques-used-in-Medicine-and-Research.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.