Advertencia: Esta página es una traducción de esta página originalmente en inglés. Tenga en cuenta ya que las traducciones son generadas por máquinas, no que todos traducción será perfecto. Este sitio Web y sus páginas están destinadas a leerse en inglés. Cualquier traducción de este sitio Web y su páginas Web puede ser imprecisa e inexacta en su totalidad o en parte. Esta traducción se proporciona como una conveniencia.

Cytometry de flujo y descubrimiento de la droga

El cytometry de flujo es un método analítico que permite que las células sean analizadas y que categorizaas rápidamente los laseres mientras que pasan en único-archivo. La manera de la cual se dispersa la luz laser se puede utilizar para deducir un grado de información con respecto a la célula, tal como talla, complejidad interna, y granulosidad de la célula, mientras que una identificación más específica de la estructura puede ser lograda incorporando fluorophores y microscopia fluorescente en el proceso.

Otros métodos de la caracterización tales como espectrometría de masa se pueden incorporar directamente en el equipo del cytometry de flujo para permitir que la caracterización refinada sea emprendida in situ.

Descubrimiento de la droga

Haber de imagen: paulista/Shutterstock.com

Cytometry de flujo en la identificación del objetivo

El cytometry de flujo se ha utilizado en cada escenario del proceso de descubrimiento de la droga, de la identificación del objetivo para llevar el revelado. Los objetivos válidos de la droga en células casi abarcan la plétora entera de estructuras biomoleculares disponibles: la membrana celular, cualquier proteína implicada en la función o la transmisión de señales mecánica, DNA hacia abajo al nivel del gen, y otras moléculas más pequeñas tales como mRNA.

La caracterización de las poblaciones grandes y variadas de la célula de una alta manera de la producción es útil en la identificación inicial del objetivo, permitiendo que las células (enfermas) disfuncionales sean separadas para un análisis más profundo por otras técnicas. Este proceso puede ser optimizado más a fondo marcando características con etiqueta moleculares dentro de la célula sospechosa para estar implicado en enfermedad con las antenas fluorescentes, y de esta manera, las características estructurales de la célula tales como la abundancia de una proteína determinada o la integridad de la membrana celular pueden ser fijadas rápidamente.

La identificación de siguiente del objetivo y la generación de una droga llevan la eficacia y la toxicidad de la droga se puede investigar por cytometry de flujo. Es posible deducir rápidamente estos resultados por la numeración celular de la alto-producción, aunque las células a menudo entonces clasificación basadas en el escenario del apoptosis.

Entre varios otros métodos que marquen fuera la activación de mecanismos celulares determinados, el apoptosis se puede vigilar usando el annexin fluoróforo V de la proteína, que ata a la fosfatidilserina del fosfolípido. Este componente de la membrana celular viene a la superficie de la célula en la alta concentración durante los primeros tiempos del apoptosis, permitiendo las células que experimentan toxicidad de la terapia bajo investigación que se determinará.

Cytometry de flujo en el revelado del guía

Semejantemente, las células que experimentan último apoptosis se pueden determinar por su estructura permeable de la membrana, y así una variedad de fluorophores que luchen para penetrar la membrana intacta pero la ligazón con las estructuras de célula internas tales como DNA es de uso frecuente marcar fuera estas células. El yoduro de Propidium es un tal tinte DNA-obligatorio, que se puede también utilizar para distinguir entre el escenario del ciclo celular que la célula está actualmente hacia adentro.

Las células en las fases de G2 o de M tienen solamente una copia de la DNA, mientras que las células que experimentan la mitosis en las fases G0 o G1 soportan dos copias, y la intensidad de la fluorescencia se puede utilizar así para calibrar el escenario. Una pausa en el ciclo celular puede ser indicativa de eficacia o de toxicidad de la droga, dependiendo de si la célula que es analizada está considerada el objetivo de la terapia.

El objetivo de una composición de la droga es a menudo romper o aumentar la vinculación a un objetivo específico o entre las moléculas específicas, y la intensidad de la fluorescencia descubierta de la célula correlaciona así bien con acciones recíprocas entre la composición marcada con etiqueta del interés y el objetivo específico dentro de la célula.

la prueba in vitro del Amplio-espectro de una variedad de células bajo un alcance de condiciones y análisis por cytometry de flujo también ayuda a investigadores a determinar el grado óptimo in vivo prueba para ser realizada más adelante, prestando la atención determinada a la toxicidad determinando las células que experimentan apoptosis o la detención del ciclo celular.

Usos futuros

El cytometry de flujo también se utiliza para estudiar eficacia y seguro vaccíneos en varias capacidades, tales como cuantificación de la carga viral, identificación de los anticuerpos de IgG y de IgM, y medición de las reacciones del t y del linfocito B.

En un ejemplo del último caso, la reacción del linfocito T del CD4+ y de CD8+ de individuos vacunados en contra de los péptidos del pico SARS-CoV-2 fue fijada en individuos vacunados por el jarro y otros (2020) usando el cytometry de flujo, donde las células en primer lugar fueron manchadas con un cóctel de los anticuerpos anti-humanos de la proteína de la superficie del linfocito T y de los cytokines anti-humanos.

La presencia de proteínas implicadas en la activación del linfocito T y la secreción de cytokines inflamatorios es pruebas de la eficacia vaccínea, y la naturaleza de la alto-producción del cytometry de flujo ha probado altamente beneficioso para tales usos desde el brote del pandémico COVID-19.

Los cytometers de gama alta modernos del flujo utilizados en la industria farmacéutica son capaces de tramitar decenas de miles de células por segundo de una manera totalmente automatizada, aunque cuando la empresa de grados más altos de análisis de la caracterización es dramáticamente más lenta.

Los biorreactores del funcionamiento generan contínuo las células para probar que se puede entonces exponer a una variedad de condiciones y categorizar más adelante por cytometry de flujo, incluyendo el uso de la tubería especializada que repliega las fuerzas de resistencia encontradas en vasos sanguíneos.

La automatización creciente, la velocidad de tramitación de la célula, y una variedad de técnicas de la caracterización incorporadas directamente en el equipo del cytometry de flujo serán probablemente el ir observado adelante. Además de perfeccionar eficiencia y por lo tanto exactitud, como mayor número de células puede ser probado y analizado detalladamente, esto también permitirá que perfiles de seguro más robustos sean desarrollados para las nuevas composiciones, con una mayor variedad de células probadas en condiciones relevantes.

Referencias:

Further Reading

Last Updated: Nov 12, 2021

Michael Greenwood

Written by

Michael Greenwood

Michael graduated from Manchester Metropolitan University with a B.Sc. in Chemistry in 2014, where he majored in organic, inorganic, physical and analytical chemistry. He is currently completing a Ph.D. on the design and production of gold nanoparticles able to act as multimodal anticancer agents, being both drug delivery platforms and radiation dose enhancers.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Greenwood, Michael. (2021, November 12). Cytometry de flujo y descubrimiento de la droga. News-Medical. Retrieved on January 22, 2022 from https://www.news-medical.net/life-sciences/Flow-Cytometry-and-Drug-Discovery.aspx.

  • MLA

    Greenwood, Michael. "Cytometry de flujo y descubrimiento de la droga". News-Medical. 22 January 2022. <https://www.news-medical.net/life-sciences/Flow-Cytometry-and-Drug-Discovery.aspx>.

  • Chicago

    Greenwood, Michael. "Cytometry de flujo y descubrimiento de la droga". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/Flow-Cytometry-and-Drug-Discovery.aspx. (accessed January 22, 2022).

  • Harvard

    Greenwood, Michael. 2021. Cytometry de flujo y descubrimiento de la droga. News-Medical, viewed 22 January 2022, https://www.news-medical.net/life-sciences/Flow-Cytometry-and-Drug-Discovery.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News Medical.