In vivo microscopie à fluorescence

In vivo la microscopie à fluorescence est une technique d'imagerie qui emploie la fluorescence aux cellules d'image dans les organismes sous tension. Ce type de microscopie fournit hautement des résultats exacts et tient compte de l'observation du développement de certains procédés.

Un embryon se développant de melanogaster de drosophile avec trois journalistes différents de fluorescence. Projections maximum dUn embryon se développant de melanogaster de drosophile avec trois journalistes différents de fluorescence. Projections maximum d'intensité. (Weber de Micha | Shutterstock)

Quelle est in vivo microscopie à fluorescence ?

Les expériences de physiologie visent à comprendre une fonction cellulaire dans le cadre d'un organisme vivant. Ceci a été au commencement réalisé par des examens histologiques des cellules en tissus. L'analyse en temps réel a été rendue possible utilisant la microscopie intravital, qui tient compte de l'étude des procédés physiologiques en détail et donne des résultats exacts.

La fluorescence est très efficace et peut être appliquée à beaucoup de molécules ou de cellules d'intérêt. Les événements de cellules qui peuvent être étudiés utilisant in vivo la microscopie à fluorescence comprennent la prolifération cellulaire, le transfert, la différenciation, ou les actions intracellulaires d'ion.

Les deux en grande partie techniques d'imagerie intravital utilisées sont :

  • Microscopie à fluorescence confocale
  • microscopie de Deux-photon

la microscopie de Deux-photon fournit un accès plus profond aux tissus que la technique confocale. Elle a également moins photobleaching et photodamage, car la technique ne produit aucune lumière d'à l'extérieur-de-orientation.

La microscopie à fluorescence confocale se fonde sur le double système s'orientant de `' qui concerne réussir un faisceau laser par un trou d'épingle devant la source lumineuse et des des autres devant le détecteur. Troue l'orientation la lumière correctement sur l'échantillon et le détecteur, respectivement.  

En discutant des avantages d'employer in vivo la microscopie à fluorescence, il doit mettre l'accent sur que modélise ex vivo normalement des corps étrangers de cause qui mène aux résultats trompeurs. D'autre part, in vivo les modèles ont un cas réduit des corps étrangers, pour cette raison ils sont meilleurs pour cette raison.

Supplémentaire, in vivo les expériences tiennent compte de l'observation des modifications physiologiques avec une heure. C'est utile pour étudier des procédés tels que le développement, la physiologie de cellule souche, et les pathogeneses.

Comment préparer des tissus pour in vivo la microscopie à fluorescence

La plupart des tissus exigent de la préparation de permettre l'accès optique. Le modèle de peau-aileron comporte le démontage d'une correction de la peau qui permet l'accès chirurgical aux organes et aux tissus ci-dessous. Après que l'expérience/chirurgie, la correction de la peau soit allumée arrière suturée à son emplacement originel.

Le modèle de peau-aileron a un risque modéré de nécrose de tissu, et tient compte pour que principalement le derme et les tissus sous-cutanés inférieurs soient atteints. L'ablation chirurgicale de la peau peut endommager les organes et les tissus d'intérêt car elle est très évasive.

des sondes Micro-endoscopiques peuvent être employées pour rendre le système optique plus petit, mais cette méthode réduit la définition et le champ de vision des images acquises. Supplémentaire, les animaux déménageant et respirant entraîne les corps étrangers tremblants pendant la représentation qui compromet les résultats. Les tissus d'intérêt peuvent être fixés pour réduire ceci.

Applications in vivo de microscopie à fluorescence

La microscopie d'Intravital du cortex de cerveau est employée en neurologie pour étudier l'activité des réseaux neuronaux. Une étude notable a mesuré les points de reprise importants (tels que l'extravasation, l'arrestation trouvée aux points de branchement vasculaires, et a prolongé le contact dans les vaisseaux sanguins micro) vers la macro-instruction-métastase dans le cerveau utilisant une cellule métastatique unique. L'effet des lésions de la moelle épinière et l'étape progressive de la régénération ont été également étudiés utilisant la microscopie intravital.

En outre, l'ophthalmoscopy confocal a été employé pour étudier la rétine et pour rendre compte des modifications aux microstructures avec une heure. Les microstructures examinées comprennent les nerfs optiques, les capillaires, et les cellules ganglionnaires.

D'autres utilisations ont été aussi bien notées ; par exemple, un hublot abdominal de représentation a été développé pour suivre l'accroissement d'une cellule de cancer colorectal dans le foie de souris. La formation de la micro-métastase a été observée, et cette expérience a employé la représentation intra-muros de dix heures de laps de temps qui a indiqué la migration cellulaire avec la pré-métastase.

Le même transfert n'a pas été vu dans micro et la macro-instruction-métastase. Inhibition pharmacologique de ce transfert réduit le fardeau métastatique des cellules de foie, lui effectuant un objectif potentiel pour des traitements anticancéreux.

En conclusion, in vivo la microscopie à fluorescence a été employée pour étudier l'homéostasie des cellules souche dans le créneau intestinal de cellule souche. On l'a découvert que les cellules souche centrales (situées dans la base de crypte) étaient décentrées vers la survie et les cellules souche de bordure (situées dans la partie supérieure du créneau) étaient décentrées vers la perte et le remontage.

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Last Updated: Nov 21, 2018

Written by

Samuel Mckenzie

Sam graduated from the University of Manchester with a B.Sc. (Hons) in Biomedical Sciences. He has experience in a wide range of life science topics, including; Biochemistry, Molecular Biology, Anatomy and Physiology, Developmental Biology, Cell Biology, Immunology, Neurology  and  Genetics.

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