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Microscopie à fluorescence contre la photomicroscopie

La microscopie à fluorescence et la photomicroscopie représentent des techniques d'imagerie spécifiques de concevoir des cellules ou des éléments cellulaires, quoiqu'avec des capacités et des utilisations quelque peu différentes. À son faisceau, la microscopie à fluorescence est une forme de la photomicroscopie qui emploie beaucoup de fonctionnalités supplémentaires pour améliorer ses capacités.

Images fluorescentes - par VshivkovaVshivkova | Shutterstock

Quelle est photomicroscopie ?

La photomicroscopie fait le beaucoup ce que le nom implique : la lumière visible et des lentilles d'agrandissement sont employées pour voir des petits objets. Les photomicroscopes sont la forme la plus ancienne des dispositifs imageurs plus de haute qualité, remontant aux 1500s, et étaient les microscopes avec lesquels on a observé les premières cellules.

Une méthode classique pour concevoir les cellules ou le tissu avec les photomicroscopes est d'employer des teintures. Les très utilisés pourraient peindre les composantes principales, telles que la combinaison de teinture de la hématoxyline et de l'éosine, qui colore les noyaux violet et le rose de cytoplasme. Cependant, il y a également des techniques plus spécialisées de teinture.

Dans les hôpitaux, l'inspection rapide des cellules peut être critique pour des médecins. Dans de telles situations, la photomicroscopie peut être employée avec les tissus qui ont été gelés en dioxyde de carbone et ont été sectionnés utilisant un microtome. Cette méthode plus simple peut être employée instamment sur les patients qui sont dans la salle d'opération de guider le chirurgien.

Quelle est microscopie à fluorescence ?

Pendant que la photomicroscopie se développait, plus de formes utilisant différentes techniques ont été inventées. Un des types de microscopie dans le groupe plus grand de photomicroscopie est microscopie à fluorescence. Cellules ou molécules d'images de microscopie à fluorescence qui ont été étiquetées avec une teinture fluorescente. Les substances fluorescentes sont des fluorophores appelés, qui sont intégrés dans l'échantillon.

Les fluorophores sont excités par la lumière dans le microscope, qui les fait dégager la lumière avec de l'énergie inférieure et d'une plus longue longueur d'onde. C'est cette lumière qui produit la vue magnifiée, plutôt que la source lumineuse originelle. Ceci signifie que les utilisations fluorescentes de microscopie se sont réfléchies plutôt que la lumière transmise.

Par exemple, une marque utilisée généralement est une protéine fluorescente verte (GFP), qui est excitée avec la lumière bleue et émet la lumière verte avec une plus longue longueur d'onde. Les filtres autour de l'échantillon peuvent séparer la lumière fluorescente de la radiothérapie environnante.

La microscopie à fluorescence est souvent appliquée dans des structures cellulaires de représentation ou des caractéristiques structurelles, vérifiant la viabilité des cellules, le matériel génétique de représentation (ADN et ARN), et les cellules particulières de représentation dans une plus grande population.

Fluorescence Microscopy Animation

Comparer la photomicroscopie et la microscopie à fluorescence

En tant que photomicroscopes mentionnés et qui sont utilisés pour la photomicroscopie utilisez la lumière visible pour voir les échantillons. Cette lumière est dans la gamme de 400-700 nanomètre, alors que la microscopie à fluorescence emploie la lumière avec une intensité beaucoup plus normale.

L'utilité de la photomicroscopie traditionnelle est entravée par le fait qu'elle emploie la lumière visible, comme utilisant la lumière visible limite la définition obtenue à partir des échantillons. D'autre part, la microscopie à fluorescence n'est pas confrontée à cette limitation, puisqu'elle emploie Qu'est ce que lumière excite les fluorophores.

Les photomicroscopes traditionnels sont très utilisés, et exigent souvent des teintures plus simples de concevoir le contraste qui n'est pas naturellement visible. C'est type une technique plus simple que la microscopie à fluorescence. Pour cette raison, elle est employée dans les réglages cliniques, comme pour la représentation immédiate des échantillons biopsiés dans les hôpitaux et pour les prélèvements cervicales.

La microscopie à fluorescence peut être employée conjointement avec d'autres types de photomicroscopie. Étant donné qu'il produit des images de la lumière réfléchie (plutôt que la lumière directe), elle peut être employée avec des techniques telles que la microscopie de contrat de phase.

En outre, il y a des techniques de photomicroscopie qui peuvent image vivre et échantillons fixes, mais il peut y a un compromis entre le rapport signal/bruit et les dégâts d'échantillon pendant le procédé d'observation. Pendant la microscopie à fluorescence, les cellules subissent le blanchiment, dans lequel la fluorescence diminue au cours des périodes étendues d'observation. Pour conclure, là est souplesse dans les deux groupes de microscopie.

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Last Updated: Nov 27, 2018

Sara Ryding

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Sara Ryding

Sara is a passionate life sciences writer who specializes in zoology and ornithology. She is currently completing a Ph.D. at Deakin University in Australia which focuses on how the beaks of birds change with global warming.

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