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Microscopia de fluorescência contra a fotomicroscopia

A microscopia de fluorescência e a fotomicroscopia representam técnicas de imagem lactente específicas para visualizar pilhas ou componentes celulares, embora com capacidades e usos um tanto diferentes. Em seu núcleo, a microscopia de fluorescência é um formulário da fotomicroscopia que usa muitas características extra para melhorar suas capacidades.

Imagens fluorescentes - por VshivkovaVshivkova | Shutterstock

Que é fotomicroscopia?

A fotomicroscopia faz o muito o que o nome implica: a luz visível e as lentes de ampliação são usadas para ver objetos pequenos. Os fotomicroscópios são o formulário o mais velho de uns dispositivos de imagem lactente mais de alta qualidade, datando dos 1500s, e eram os microscópios com que as primeiras pilhas foram observadas.

Um método comum para visualizar pilhas ou tecido com fotomicroscópios é usar tinturas. O amplamente utilizados puderam pintar os componentes principais, tais como a combinação da tintura de hematoxylin e de eosina, que colore os núcleos violeta e o rosa do citoplasma. Contudo, há umas técnicas igualmente mais especializadas da tintura.

Nos hospitais, o exame rápido das pilhas pode ser crítico para doutores. Em tais situações, a fotomicroscopia pode ser usada com tecidos que foram congelados no dióxido de carbono e seccionados usando um microtome. Este método mais simples pode ser usado urgente nos pacientes que estão na sala de operações guiar o cirurgião.

Que é microscopia de fluorescência?

Enquanto a fotomicroscopia se tornou, mais formulários que usam técnicas diferentes foram inventados. Um dos tipos de microscopia dentro do grupo mais largo da fotomicroscopia é microscopia de fluorescência. Pilhas ou moléculas das imagens da microscopia de fluorescência que foram etiquetadas com uma tintura fluorescente. As substâncias fluorescentes são chamadas os fluorophores, que são integrados na amostra.

Os fluorophores são entusiasmado pela luz no microscópio, que faz com que desprendam a luz com mais baixa energia e de um comprimento de onda mais longo. É esta luz que produz a vista ampliada, um pouco do que a fonte luminosa original. Isto significa que os usos fluorescentes da microscopia reflectiram um pouco do que a luz transmitida.

Por exemplo, uma etiqueta de uso geral é a proteína fluorescente verde (GFP), que é entusiasmado com luz azul e se emite a luz verde com um comprimento de onda mais longo. Os filtros em torno da amostra podem separar a luz fluorescente da radiação circunvizinha.

A microscopia de fluorescência é aplicada frequentemente nas estruturas de pilha da imagem lactente ou nas características estruturais, verificando a viabilidade das pilhas, o material genético da imagem lactente (ADN e RNA), e pilhas particulares da imagem lactente em uma população maior.

Fluorescence Microscopy Animation

Comparando a fotomicroscopia e a microscopia de fluorescência

Como os fotomicroscópios mencionados, que são usados para a fotomicroscopia empregue a luz visível para ver as amostras. Esta luz está na escala de 400-700 nanômetro, visto que a microscopia de fluorescência usa a luz com intensidade muito mais alta.

A utilidade da fotomicroscopia tradicional é impedida pelo facto de que usa a luz visível, porque usar a luz visível limita a definição obtida das amostras. Por outro lado, a microscopia de fluorescência não é enfrentada com esta limitação, desde que se usa o que luz excita os fluorophores.

Os fotomicroscópios tradicionais são amplamente utilizados, e exigem frequentemente umas tinturas mais simples visualizar o contraste que não é naturalmente visível. Esta é tipicamente uma técnica mais simples do que a microscopia de fluorescência. Devido a isto, é usada em ajustes clínicos, como para a imagem lactente imediata de amostras feitas a biópsia nos hospitais e para manchas cervicais.

A microscopia de fluorescência pode ser usada conjuntamente com outros tipos de fotomicroscopia. Devido ao facto de que cria imagens da luz refletida (um pouco do que a luz directa), pode ser usada com técnicas tais como a microscopia do contrato da fase.

Além disso, há as técnicas da fotomicroscopia que podem imagem viver e amostras fixas, mas pode haver umas trocas entre a relação de relação sinal-ruído e o dano da amostra durante o processo da observação. Durante a microscopia de fluorescência, as pilhas submetem-se ao descoramento, em que a fluorescência diminui durante períodos prolongados de observação. Para concluir, lá é flexibilidade em ambos os grupos da microscopia.

Fontes

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Last Updated: Nov 27, 2018

Sara Ryding

Written by

Sara Ryding

Sara is a passionate life sciences writer who specializes in zoology and ornithology. She is currently completing a Ph.D. at Deakin University in Australia which focuses on how the beaks of birds change with global warming.

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