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Microscopia de fluorescencia comparado con microscopia liviana

La microscopia de fluorescencia y la microscopia liviana representan técnicas de proyección de imagen específicas para visualizar las células o los componentes celulares, no obstante con capacidades y aplicaciones algo diferentes. En su base, la microscopia de fluorescencia es una forma de la microscopia liviana que utiliza muchas características extras para perfeccionar sus capacidades.

Imágenes fluorescentes - por VshivkovaVshivkova | Shutterstock

¿Cuál es microscopia liviana?

La microscopia liviana hace mucho qué el nombre implica: la luz visible y las lentes que magnifican se utilizan para ver pequeños objetos. Los microscopios livianos son la más vieja forma de dispositivos de proyección de imagen más de alta calidad, datando de los 1500s, y eran los microscopios con los cuales las primeras células fueron observadas.

Un método común para visualizar las células o el tejido con los microscopios livianos es utilizar los tintes. Los ampliamente utilizados pudieron pintar los componentes principales, tales como la combinación del tinte del hematoxylin y de la eosina, que colorea los núcleos violeta y el festonear del citoplasma. Sin embargo, hay también técnicas especializadas del tinte.

En hospitales, el examen rápido de células puede ser crítico para los doctores. En tales situaciones, la microscopia liviana se puede utilizar con los tejidos que han sido congelados en dióxido de carbono y se han seccionado usando un micrótomo. Este método más simple se puede utilizar urgente en los pacientes que están en la sala de operaciones de conducir al cirujano.

¿Cuál es microscopia de fluorescencia?

Mientras que la microscopia liviana se convirtió, más formas usando diversas técnicas fueron inventadas. Uno de los tipos de microscopia dentro del grupo más amplio de la microscopia liviana es microscopia de fluorescencia. Células o moléculas de las imágenes de la microscopia de fluorescencia que se han marcado con etiqueta con un tinte fluorescente. Las substancias fluorescentes se llaman los fluorophores, que son integrados en la muestra.

Los fluorophores son excitados por la luz en el microscopio, que los hace emitir la luz con una energía más inferior y de una longitud de onda más larga. Es esta luz que produce la visión magnificada, bastante que la fuente de luz original. Esto significa que las aplicaciones fluorescentes de la microscopia reflejaron bastante que luz transmitida.

Por ejemplo, una escritura de la etiqueta de uso general es la proteína fluorescente verde (GFP), que se excita con la luz azul y emite la luz verde con una longitud de onda más larga. Los filtros alrededor de la muestra pueden separar la luz fluorescente de la radiación circundante.

La microscopia de fluorescencia se aplica a menudo en las estructuras de célula de la proyección de imagen o las características estructurales, verificando la viabilidad de células, el material genético de la proyección de imagen (DNA y ARN), y las células determinadas de la proyección de imagen en una población más grande.

Comparar microscopia liviana y microscopia de fluorescencia

Como microscopios mencionados, livianos que se utilicen para la microscopia liviana emplee la luz visible para ver las muestras. Esta luz está en el alcance de 400-700 nanómetro, mientras que la microscopia de fluorescencia utiliza la luz con una intensidad mucho más alta.

La utilidad de la microscopia liviana tradicional es obstaculizada por el hecho de que utiliza la luz visible, como usando luz visible limita la resolución obtenida de muestras. Por otra parte, la microscopia de fluorescencia no se hace frente con esta limitación, puesto que utiliza cualquier luz excita los fluorophores.

Los microscopios livianos tradicionales son ampliamente utilizados, y requieren a menudo tintes más simples visualizar el contraste que no es naturalmente visible. Esto es típicamente una técnica más simple que microscopia de fluorescencia. Debido a esto, se utiliza en fijaciones clínicas, por ejemplo para la proyección de imagen inmediata de muestras hechas una biopsia en hospitales y para las manchas cervicales.

La microscopia de fluorescencia se puede utilizar conjuntamente con otros tipos de microscopia liviana. Debido al hecho de que cree imágenes de la luz reflejada (bastante que la luz directa), puede ser utilizada con técnicas tales como microscopia del contrato de la fase.

Además, hay las técnicas de la microscopia liviana que pueden imagen vivir y las muestras fijas, pero puede haber un equilibrio entre el ratio señal/ruido y el daño de la muestra durante el proceso de la observación. Durante microscopia de fluorescencia, las células experimentan el blanqueo, en el cual la fluorescencia disminuye durante períodos extendidos de la observación. Para concluir, allí es adaptabilidad en ambos grupos de la microscopia.

Fuentes

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Last Updated: Nov 27, 2018

Sara Ryding

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Sara Ryding

Sara is a passionate life sciences writer who specializes in zoology and ornithology. She is currently completing a Ph.D. at Deakin University in Australia which focuses on how the beaks of birds change with global warming.

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