Fundamentos do projecto e da revelação do ensaio

Um ensaio é um procedimento analítico capaz de quantitativa ou qualitativa determinando a presença, a concentração, ou a actividade de um analyte do alvo em uma amostra.

Por Jarun OntakraiCrédito de imagem: Jarun Ontakrai/Shutterstock

Os ensaios são usados em uma escala diversa dos campos dentro das ciências da vida, e têm o trabalho rotineiro tornado em laboratórios judiciais, farmacêuticos, e da microbiologia.

Considerações para o projecto do ensaio

Ao projetar um ensaio para toda a finalidade, o processo inteiro dos trabalhos da coleção da amostra à análise de dados deve ser considerado.

A primeira consideração é a molécula e o parâmetro exactos sob a investigação. As moléculas e as biomoléculas podem vir em vários formulários, quimicamente e fisicamente distinto de um outro, assim o ensaio deve ser capaz da diferenciação entre eles.

Adicionalmente, o projecto do ensaio pode diferir segundo o parâmetro sob a investigação, tal como a diferença em determinar a concentração de uma enzima em uma amostra comparada com a determinação da actividade de uma enzima em uma amostra.

Os ensaios pretendidos para o uso no campo, ou outros ambientes do não-laboratório, podem ser pretendidos detectar meramente a presença de uma molécula particular de modo que as amostras possam ser passadas sobre para uma investigação mais séria. Conseqüentemente, a capacidade para determinar todas as outras propriedades da amostra é desnecessária.

A fonte da amostra deve igualmente ser considerada, porque a amostra pode precisar de se submeter às etapas antes que o ensaio possa ocorrer, volumes do pré-tratamento de amostra pode ser limitada ou escassa, as amostras podem ser instáveis durante períodos de armazenamento, ou outros factores podem impactar o projecto do ensaio.

O número e a variedade de amostras a ser analisadas devem igualmente ser considerados, como uma multi-etapa, ensaio trabalho-intensivo são claramente inoportunos se os milhares de amostras devem ser testados, quando este puder ser apropriado como um ensaio novo com somente algumas amostras.

Pontos-chave no projecto do ensaio

Nenhuma matéria a função ou o mecanismo pretendido de um ensaio, diversos pontos-chave permanece relevante e deve ser endereçada.

Especificidade

Determinando o analyte do alvo de um ensaio, a especificidade do ensaio para essa molécula deve ser confirmada. Se outras moléculas na amostra podem interagir com o ensaio em uma maneira que seja indistinguível da molécula do alvo, a seguir os falsos positivos podem ser um resultado sem intenção freqüente.

Sensibilidade

A sensibilidade de um ensaio pode ser ajustada segundo as exigências dos dados produzidos, do tipo de molécula do interesse, e da quantidade de amostra disponível. Importante, o ensaio deve ser sensível bastante que a concentração da molécula cai dentro do alcance dinâmico do ensaio. O alcance dinâmico é a escala de concentração em que a resposta do ensaio é directamente proporcional à concentração da molécula do alvo, permitindo que a quantidade de analyte actual seja determinada.

Reprodutibilidade

Os ensaios devem poder robustos e seguros, produzir o mesmo resultado dos testes repetidos apesar das mudanças na preparação e na manipulação da amostra, circunstâncias ambientais, ou o indivíduo que executa o procedimento.

Se a intenção do ensaio é medir o absolute, um pouco do que o parente, uma quantidade de uma molécula em uma amostra então um padrão aceitado dessa molécula no ensaio particular deve ser estabelecida.

Compostos do repórter

As moléculas que interagem com o analyte do alvo são empregadas frequentemente nos ensaios, e nestes devem ser asseguradas para interagir não igualmente com outras moléculas actuais na amostra. As amostras analisadas desta maneira devem frequentemente ser dispor depois do ensaio, conduzindo à alternativa, os ensaios etiqueta-livres a ser tornados. Estes evitam alguns dos produtos manufacturados causados pela presença de compostos do repórter, e permitem-nos a selecção das moléculas em células estaminais preliminares doença-relevantes.

Fontes

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Last Updated: Feb 26, 2019

Michael Greenwood

Written by

Michael Greenwood

Michael graduated from Manchester Metropolitan University with a B.Sc. in Chemistry in 2014, where he majored in organic, inorganic, physical and analytical chemistry. He is currently completing a Ph.D. on the design and production of gold nanoparticles able to act as multimodal anticancer agents, being both drug delivery platforms and radiation dose enhancers.

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