Applications de GFP

Par Jeyashree Sundaram, MBA

En biochimies et biologie cellulaire, la protéine le plus fortement étudiée et développée est une protéine fluorescente verte (GFP), qui est dérivée des méduses Aequorea Victoria. Le GFP a une capacité remarquable de rayonner efficacement fluorophore interne visible qui est extrêmement précieux et naturellement attrayant. Des occasions novatrices sont produites par la structure cristalline à haute résolution du GFP pour déchiffrer et régler l'association entre la structure et le fonctionnement spectroscopique des protéines.

Aequorea Victoria. Crédit : LagunaticPhoto/Shutterstock.com

Le GFP a été identifié comme borne en cellules intactes pour l'expression du gène et la désignation d'objectifs de protéine. Dans des études biologiques, il est considérable employé en tant que bornes fluorescentes génétiquement codées. Cette borne fluorescente active le marquage en couleurs et est employée dans l'étude des interactions entre les protéines.

Le GFP et ses dérivés avec différentes couleurs sont utilisés dans plusieurs applications telles que l'étude du fonctionnement et l'organisme des systèmes vivants en protéine étiquetant, dans l'expression du gène de examen, et dans choix biologiques variés. Le GFP fournit à des chercheurs une palette riche de différents dérivés spectraux et de caractéristique biologique.

GFP en biologie cellulaire et biotechnologie

Les cellules vivantes ou l'organisme entières a été employées comme système expérimental au-dessus d'un large éventail d'inducteurs (biologie cellulaire et biomédecine) depuis l'avènement de GFP (protéine autofluorescent). Depuis 1994, le GFP avait servi d'agent d'un scientifique dans le domaine de la biotechnologie pendant qu'il a besoin seulement de l'oxygène et d'une source d'énergie pour fonctionner. La protéine fluorescente est devenue la première ligne de la recherche sur des endroits indéfinis. Elle est employée dans applications variées de la biotechnologie telles que des fusions de protéine, imaginant l'organisme entier, et les journalistes transcriptionnels.

GFP dans l'étude de la localisation bactérienne de protéine

En tant que journaliste pour l'ADN et la localisation de protéine, le GFP a offert extrêmement sensible et des approches novatrices pour étudier l'organisme bactérien de cellules. Ceci mène aux perceptions neuves dans des processus cellulaires variés. Le GFP possède plusieurs caractéristiques utiles pour des études bactériennes localisées. L'alternative à une microscopie d'immunofluorescence, l'expression du gène de GFP est utilisée pour examiner les fonctions cellulaires primaires telles que la réplication de l'ADN, la traduction de protéine et la transduction du signal.

Utilisant le GFP fluorophore, il est maintenant possible de surveiller l'ADN et la localisation de protéine indiquant les protéines essentielles impliquées dans la sporulation et la division cellulaire et le développement qui sont dynamiquement recensées pendant le cycle cellulaire.

L'utilisation du GFP dans les multi-composantes de marquage dans une cellule et pour surveiller le matériel génétique persistent pour effectuer à cette approche un outil de valeur pour adresser les incertitudes compliquées liées aux bactéries.

GFP dans la recherche d'interaction d'hôte-agent pathogène

Le GFP a une utilisation potentielle dans l'étude de la pathogénie bactérienne. L'interaction hôte-parasite du marinum bactérien de salmonella typhimurium, de yersinia pseudotuberculose, et de mycobactérie de trois agents pathogènes a été étudiée utilisant le GFP. L'utilisation du GFP dans l'étude d'hôte-agent pathogène est largement couronnée de succès puisque c'est une protéine cytoplasmique toxique inférieure, capable du synthésisation continuement et, en conséquence, de l'effet décroissant de dilution de fluorescence-signe sur la réplication bactérienne, et est facilement imagée et calculée par rapport aux cellules vivantes et aux tissus.

Le GFP agit en tant que traceur biologique qui permet la compréhension de la colonisation, de la prolifération, de la ténacité, et de l'écart de l'agent pathogène chez les animaux vivants.

Utilisation de GFP comme gène de journaliste

Le GFP est considéré comme plus important et puissant outil pour surveiller l'expression du gène dans différents genres de cellules. Il est favorablement employé comme gène de journaliste puisqu'il n'exige aucun supplément d'un substrat complémentaire. Le GFP est employé pour tracer l'expression du gène mec-7 in vivo dans le petit Caenorhabditis elegans de nématode. Si documents une voie prometteuse de surveiller le rendement du transfert de gène dans les animaux transgéniques et les embryons.

GFP en tant qu'indicateur actif

Cette protéine est capable d'agir en tant qu'indicateur de l'environnement environnant ou dans l'organelle. Des sites de phosphorylation du GFP sont conçus pour fournir des modifications dans les propriétés fluorescentes dans une condition particulière. Le GFP conçu avec la glissière de potassium est le premier détecteur optique à coder génétiquement dans le potentiel de membrane.

GFP comme balise de fusion

L'application la plus prospère du GFP la considère comme un associé génétiquement fusioned des protéines d'hôte observer leur localisation et destin. Le gène de GFP est protégé par fusible avec le gène codant la protéine d'intérêt et exprimé en cellule. La constitution du GFP peut être faite au terminus aminé ou carboxylique d'une protéine. La protéine protégée par fusible met à jour son fonctionnement normal avec la propriété fluorescente acquise par le GFP exprimant le gène. Par le GFP, toutes les organelles importantes de cellules telles que la membrane de plasma, les appareillages de Golgi, le noyau, et le réticulum endoplasmique sont visées.

Futurs points de vue

De façon générale, le GFP peut être employé pour concevoir la cellule spécifique saisit les animaux intacts, les organes, et les tissus. Cette espérance est sensiblement utile dans les domaines tels que l'immunologie, la neurobiologie, le développement, et la carcinogenèse. La découverte des mutants de GFP de plusieurs variantes colorées a mené au progrès supporté des instruments de fluorescence pour la représentation cellulaire et le dépistage. L'innovation stimulante du roman GFP d'autres substances a éclairé la future application de la technologie de GFP dans l'étude de cellulaire, de moléculaire, et la découverte de médicaments.

Last Updated: Feb 26, 2019

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