Applicazioni di GFP

Da Jeyashree Sundaram, MBA

In biochimica e biologia cellulare, la proteina il più altamente studiata e sviluppata è proteina fluorescente verde (GFP), che è derivata dalle meduse Aequorea Victoria. GFP ha una capacità notevole di irradiare efficientemente fluorophore interno visibile che è estremamente prezioso e naturalmente attraente. Le probabilità innovarici sono create dal sistema cristallino ad alta definizione di GFP per decifrare e gestire l'associazione fra la struttura e la funzione spettroscopica delle proteine.

Aequorea Victoria. Credito: LagunaticPhoto/Shutterstock.com

GFP è stato riconosciuto come indicatore in celle intatte per espressione genica e l'ottimizzazione della proteina. Negli studi biologici, è usato estesamente come indicatori fluorescenti geneticamente codificati. Questo indicatore fluorescente permette al contrassegno multicolore ed è utilizzato nello studio sulle interazioni fra le proteine.

GFP ed i sui derivati con differenti colori sono utilizzati in parecchie applicazioni quali lo studio sulla funzione e l'organizzazione dei sistemi viventi in proteina che etichetta, nell'espressione genica d'esame ed in varie selezioni biologiche. GFP fornisce ai ricercatori una tavolozza ricca dei derivati caratteristici spettrali e biochimici differenti.

GFP in biologia cellulare e biotecnologia

Le intere celle viventi o organismo è stata usata come sistema sperimentale sopra una vasta gamma di campi (biologia cellulare e biomedicina) dall'arrivo di GFP (proteina autofluorescent). Dal 1994, GFP sta servendo da agente di uno scienziato nel campo di biotecnologia mentre ha bisogno soltanto dell'ossigeno e di una fonte di energia di funzionare. La proteina fluorescente si è trasformata nella prima riga di ricerca sulle aree indefinite. È utilizzata nelle varie applicazioni di biotecnologia quali le fusioni della proteina, immaginando l'intero organismo ed i reporter trascrizionali.

GFP nello studio sulla localizzazione batterica della proteina

Come reporter per la localizzazione della proteina e del DNA, GFP ha offerto gli approcci altamente sensibili ed innovatori per studiare l'organizzazione batterica delle cellule. Ciò piombo alle nuove percezioni nei vari trattamenti cellulari. GFP possiede parecchie caratteristiche utili per gli studi batterici localizzati. L'alternativa ad una microscopia dell'immunofluorescenza, l'espressione genica di GFP è utilizzata per esaminare le funzioni cellulari primarie quali il replicazione del dna, la traduzione della proteina e la trasduzione del segnale.

Facendo uso di GFP fluorophore, ora è possibile riflettere la localizzazione della proteina e del DNA che rivela le proteine essenziali in questione nella sporulazione e divisione cellulare e lo sviluppo che sono identificate dinamicamente durante il ciclo cellulare.

L'uso di GFP nelle multi-componenti di contrassegno all'interno di un unicellulare e per il video del materiale genetico persiste per rendere a questo approccio uno strumento apprezzato per indirizzare le incertezze complicate relative ai batteri.

GFP nella ricerca di interazione dell'host-agente patogeno

GFP ha un uso potenziale nello studio sulla patogenesi batterica. L'interazione del host-parassita della pseudotuberculosi batterica del salmonella typhimurium, di Yersinia di tre agenti patogeni e del marinum del micobatterio è stata studiata facendo uso di GFP. L'uso di GFP nello studio dell'host-agente patogeno riesce ampiamente poiché è una proteina citoplasmica tossica bassa, capace della sintetizzazione continuamente e, pertanto, dell'effetto diminuente di diluizione del fluorescenza-segnale sulla replica batterica ed è facilmente imaged e computato relativamente alle celle viventi ed ai tessuti.

GFP funge da elemento tracciante biologico che permette la comprensione della colonizzazione, della proliferazione, della tenacia e della diffusione dell'agente patogeno in animali vivi.

Uso di GFP come gene del reporter

GFP è considerato come lo strumento più importante e più potente riflettere l'espressione genica nei generi differenti di celle. È usato favorevole come gene del reporter poiché non richiede alcun supplemento di un substrato supplementare. GFP è utilizzato per la mappatura dell'espressione genica mec-7 in vivo nei piccoli elegans di Caenorhabditis del nematode. Se mostre un modo di promessa riflettere il risparmio di temi del trasferimento del gene in animali ed in embrioni transgenici.

GFP come indicatore attivo

Questa proteina è capace di fungere da indicatore dell'ambiente circostante o nell'organello. I siti di fosforilazione di GFP sono costruiti per fornire le modifiche nelle proprietà fluorescenti in una circostanza particolare. Il GFP costruito con il canale del potassio è il primo sensore ottico geneticamente da codificare nel potenziale di membrana.

GFP come tag di fusione

L'applicazione più prospera di GFP sta considerandolo come un partner geneticamente fusioned delle proteine ospite di osservare la loro localizzazione e destino. Il gene di GFP è fuso con il gene che codifica la proteina di interesse ed è espresso nella cella. L'incorporazione di GFP può essere fatta all'estremità amminica o carbossilica di una proteina. La proteina fusa mantiene la sua funzione normale con la proprietà fluorescente acquistata con GFP che esprime il gene. Con GFP, tutti gli organelli importanti delle cellule quale la membrana di plasma, l'apparato di Golgi, il nucleo ed il reticolo endoplasmatico sono mirati a.

Prospettive future

In generale, GFP può essere usato per prevedere la cella specifica digita dentro gli animali intatti, gli organi ed i tessuti. Questa prospettiva è significativamente utile nei campi quali l'immunologia, la neurobiologia, lo sviluppo e la carcinogenesi. La scoperta dei mutanti di GFP di parecchie varianti colorate piombo al progresso continuo degli strumenti della fluorescenza per la rappresentazione e la rilevazione cellulari. L'innovazione di stimolazione di GFPs novello da altre specie ha illuminato l'applicazione futura della tecnologia di GFP nello studio sulla scoperta cellulare, molecolare e della droga.

Sorgenti:

  1. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9759496
  2. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9335045
  3. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11682170
  4. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8707055
  5. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12768245
  6. https://file.scirp.org/pdf/ABB_2014052311185257.pdf
  7. https://www.researchgate.net/publication/297613515_GREEN_FLUORESCENT_PROTEIN_AND_THEIR_APPLICATIONS_IN_ADVANCE_RESEARCH_1_2

[Ulteriore lettura: Proteina fluorescente verde (GFP)]

Last Updated: Feb 26, 2019

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