Usos de GFP

Por Jeyashree Sundaram, MBA

En bioquímica y biología celular, la proteína lo más altamente posible estudiada y desarrollada es la proteína fluorescente verde (GFP), que se deriva de las medusas Aequorea Victoria. GFP tiene una capacidad notable de irradiar eficientemente fluoróforo interno visible que sea extremadamente valioso y naturalmente atractivo. Las ocasiones innovadoras son creadas por la estructura cristalina de alta resolución de GFP para descifrar y de controlar la asociación entre la estructura y la función espectroscópica de proteínas.

Aequorea Victoria. Haber: LagunaticPhoto/Shutterstock.com

GFP se ha reconocido como marcador en las células intactas para la expresión génica y el alcance de la proteína. En estudios biológicos, se utiliza extensivamente como marcadores fluorescentes genético codificados. Este marcador fluorescente habilita la etiqueta multicolora y se utiliza en el estudio de acciones recíprocas entre las proteínas.

GFP y sus derivados con diversos colores se utilizan en varios usos tales como estudio de la función y organización de los sistemas vivos en la proteína que marca con etiqueta, en la expresión génica de examen, y en diversas selecciones biológicas. GFP provee de investigadores una paleta rica de diversos derivados característicos espectrales y bioquímicos.

GFP en biología celular y biotecnología

Las células vivas o el organismo enteras se ha utilizado como sistema experimental sobre una amplia gama de campos (biología celular y biomedecina) desde el advenimiento de GFP (proteína autofluorescent). Desde 1994, GFP ha estado sirviendo como agente de un científico en el campo de la biotecnología mientras que necesita solamente el oxígeno y una fuente de energía funcionar. La proteína fluorescente se ha convertido en la primera línea de la investigación en áreas indefinidas. Se utiliza en diversos usos de la biotecnología tales como fusiones de la proteína, imaginándose el organismo entero, y a reporteros transcriptivos.

GFP en el estudio de la localización bacteriana de la proteína

Como reportero para la localización de la DNA y de la proteína, GFP ha ofrecido aproximaciones altamente sensibles e innovadoras para estudiar la organización bacteriana de la célula. Esto lleva a las nuevas opiniones en diversos procesos celulares. GFP posee varias características útiles para los estudios bacterianos localizados. La opción a una microscopia de la inmunofluorescencia, la expresión génica de GFP se utiliza para examinar las funciones celulares primarias tales como réplica de la DNA, traslación de la proteína y transducción de la señal.

Usando GFP fluoróforo, es posible ahora vigilar la localización de la DNA y de la proteína que revela las proteínas esenciales implicadas en la esporulación y la división celular y el revelado que se determinan dinámicamente durante el ciclo celular.

El uso de GFP en multi-componentes de etiqueta dentro de una célula y para vigilar el material genético persiste para hacer esta aproximación una herramienta valiosa para dirigir las incertidumbres complicadas relacionadas con las bacterias.

GFP en la investigación de la acción recíproca el ordenador principal-patógeno

GFP tiene un uso potencial en el estudio de la patogenesia bacteriana. La acción recíproca del ordenador principal-parásito de tres salmonelas bacterianas los patógeno typhimurium, marinum de la Yersinia pseudotuberculosis, y de la micobacteria fue estudiada usando GFP. El uso de GFP en estudio el ordenador principal-patógeno es extensamente acertado puesto que es una proteína citoplásmica tóxica inferior, capaz de la sintetización contínuo y, por lo tanto, del efecto de disminución de la dilución de la fluorescencia-señal sobre la réplica bacteriana, y es fácilmente reflejado y calculado en relación a las células vivas y a los tejidos.

GFP actúa como trazador biológico que permita la comprensión de la colonización, de la proliferación, de la tenacidad, y de la extensión del patógeno en animales vivos.

Uso de GFP como gen del reportero

GFP se considera como la herramienta más importante y más potente vigilar la expresión génica en diversas clases de células. Se utiliza favorable como gen del reportero puesto que no requiere ningún suplemento de un substrato adicional. GFP se utiliza para correlacionar la expresión génica mec-7 in vivo en los pequeños elegans de Caenorhabditis del nematodo. Si piezas de convicción una manera prometedora de vigilar la eficiencia de la transferencia del gen en animales y embriones transgénicos.

GFP como indicador activo

Esta proteína es capaz de actuar como indicador del ambiente circundante o del organelo. Los sitios de la fosforilación de GFP se dirigen para ofrecer modificaciones en propiedades fluorescentes bajo condición determinada. El GFP dirigido con el canal del potasio es el primer sensor óptico genético que se codificará en potencial de la membrana.

GFP como etiqueta de la fusión

El uso más próspero de GFP la está considerando como un socio genético fusioned de las proteínas del ordenador principal observar su localización y destino. El gen de GFP se funde con el gen que codifica la proteína del interés y se expresa en la célula. La incorporación de GFP se puede hacer en el término amino o carboxilo de una proteína. La proteína fundida mantiene su función normal junto con propiedad fluorescente detectada con GFP que expresa el gen. Con GFP, todos los organelos importantes de la célula tales como membrana de plasma, aparatos de Golgi, núcleo, y retículo endoplásmico se apuntan.

Perspectivas futuras

Total, GFP se puede utilizar para visualizar la célula específica pulsa hacia adentro animales, órganos, y tejidos intactos. Esta perspectiva es importante útil en campos tales como inmunología, neurobiología, revelado, y carcinogénesis. El descubrimiento de los mutantes de GFP de varias variantes coloreadas ha llevado al progreso continuo de los instrumentos de la fluorescencia para la proyección de imagen y la detección celulares. La innovación estimulante de GFPs nuevo de la otra especie ha aclarado el uso futuro de la tecnología de GFP en el estudio del descubrimiento celular, molecular, y de la droga.

Fuentes:

  1. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9759496
  2. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9335045
  3. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11682170
  4. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8707055
  5. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12768245
  6. https://file.scirp.org/pdf/ABB_2014052311185257.pdf
  7. https://www.researchgate.net/publication/297613515_GREEN_FLUORESCENT_PROTEIN_AND_THEIR_APPLICATIONS_IN_ADVANCE_RESEARCH_1_2

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Last Updated: Feb 26, 2019

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