Techniques d'expression du gène

L'expression du gène est un mécanisme fortement réglé qui règle le fonctionnement et l'adaptabilité de toutes les cellules vivantes comprenant des prokaryotes et des eucaryotes. Plusieurs techniques existent pour l'expression du gène de étude et de mesure et son règlement. Certaines de ces techniques sont vieilles et bien établies tandis que d'autres sont des techniques relativement neuves et multiplex.

L'inducteur de l'analyse de l'expression des gènes a subi des avancées majeures dans la recherche biomédicale. Les méthodes traditionnelles se sont concentrées sur mesurer l'expression d'un gène à la fois et pas dans n'importe quel contexte biologique particulier. Cependant, aujourd'hui, les techniques d'expression d'ARNm ont mené aux améliorations de l'identification de gènes et de la sous-catégorie de la maladie, par exemple.

Techniques d'expression du gène

Des méthodes analytiques peuvent être employées pour examiner des niveaux d'expression d'ARNm ou l'expression différentielle d'ARNm. Quelques exemples de ces techniques sont cotés ci-après.

Techniques qui sont inférieures à mi-plex

Gène de journaliste

Un gène contient deux segments fonctionnels. On est une séquence d'ADN de codage, qui contient les directives pour effectuer une protéine. L'autre est une séquence d'ADN appelée un promoteur, qui est lié à cette région codante et règle la transcription du gène, en activant ou en supprimant son expression.

Une analyse de gène de journaliste est employée pour déterminer le potentiel de réglementation d'une séquence d'ADN qui est inconnue. Ceci concerne une séquence de promoteur étant liée à un gène détectable de journaliste tel que le luciferase, la β-galactosidase ou le β-glucuronidase. Les exemples des méthodes employées pour déterminer la protéine exprimée de gène de journaliste sont fluorescence, absorbance et luminescence.

Transfert de Northern

C'est une technique employée pour trouver les molécules d'ARN spécifiques actuelles dans un mélange d'ARN. Le transfert de Northern est utilisé dans l'analyse d'un échantillon d'ARN provenant d'un type ou d'un tissu de cellules afin de déterminer l'expression d'ARN de certains gènes.

Western blotting

Le Western blotting est une technique pour trouver les molécules de protéine spécifiques dans un mélange de protéine. Ce mélange pourrait comprendre toutes les protéines qui sont associées à un certain type ou tissu de cellules. La technique peut aider à déterminer la taille d'une protéine, et quelle quantité de lui est exprimé.

Hybridation in situ fluorescente (FISH)

C'est une technique cytogénétique qui peut être employée pour recenser et localiser des séquences du gène spécifiques. Des POISSONS peuvent être employés pour concevoir des aberrations de numéro de copie telles que l'omission, la translocation ou l'amplification des chromosomes. La technique est employée dans le diagnostic prénatal et fournit également un outil utile dans le diagnostic et le pronostic prévu des sarcomes variés. La technique est également employée en dermatologie pour aider à évaluer les naevi atypiques.

Amplification en chaîne par polymérase de transcription inverse (RT-PCR)

C'est la plupart de technique sensible procurable pour trouver et mesurer l'ARNm. Utilisant le RT-PCR, des tailles de l'échantillon extrêmement petites peuvent être employées dans la quantification de l'ARNm et la technique peut en fait faire ceci utilisant juste une cellule.

Techniques qui sont un plex plus élevé

Analyse séquentielle d'expression du gène (SAUGE)

La SAUGE est une technique employée pour produire une bibliothèque des balises de courte séquence qui peuvent chacun être employées pour trouver une transcription. Le niveau d'expression de la transcription peut être déterminé en évaluant combien de fois chaque balise est trouvé. Cette technologie active l'analyse de l'expression complète en travers du génome.

Puce ADN d'ADN

Également su comme de la biopuce ou de la frite d'ADN, une puce ADN d'ADN est une surface solide à laquelle une collection d'endroits microscopiques d'ADN sont fixées. Les puces ADN sont employées pour déterminer des niveaux d'expression en travers d'un grand nombre de gènes ou pour exécuter le génotypage en travers de différentes régions d'un génome.

ARN Seq

Ceci se rapporte à des méthodes employées pour mesurer la séquence des molécules d'ARN. Les exemples comprennent l'ordonnancement de fusil de chasse des molécules d'ADNc acquises de l'ARN par la transcription inverse et les technologies employées pour ordonnancer des molécules d'ARN d'un échantillon biologique de sorte que la séquence et l'abondance primaires de chaque molécule d'ARN puissent être déterminées.

Carrelage des choix

Un choix de carrelage est un type de frite de puce ADN, avec les objectifs marqués d'ADN ou d'ARN hybridés aux sondes fixées à une surface solide. Cependant, les sondes utilisées diffèrent à ceux utilisées avec des puces ADN traditionnelles. Plutôt que des séquences connues ou des gènes prévus étant sondés, en couvrant de tuiles des choix sondez pour des séquences connues pour être présent dans une région contigious. Ceci peut fournir des informations au sujet des régions qui sont ordonnancés mais pour ce qui les fonctionnements locaux sont en grande partie inconnus.

Last Updated: May 24, 2019

Sally Robertson

Written by

Sally Robertson

Sally has a Bachelor's Degree in Biomedical Sciences (B.Sc.). She is a specialist in reviewing and summarising the latest findings across all areas of medicine covered in major, high-impact, world-leading international medical journals, international press conferences and bulletins from governmental agencies and regulatory bodies. At News-Medical, Sally generates daily news features, life science articles and interview coverage.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Robertson, Sally. (2019, May 24). Techniques d'expression du gène. News-Medical. Retrieved on June 19, 2019 from https://www.news-medical.net/life-sciences/Gene-Expression-Techniques.aspx.

  • MLA

    Robertson, Sally. "Techniques d'expression du gène". News-Medical. 19 June 2019. <https://www.news-medical.net/life-sciences/Gene-Expression-Techniques.aspx>.

  • Chicago

    Robertson, Sally. "Techniques d'expression du gène". News-Medical. https://www.news-medical.net/life-sciences/Gene-Expression-Techniques.aspx. (accessed June 19, 2019).

  • Harvard

    Robertson, Sally. 2019. Techniques d'expression du gène. News-Medical, viewed 19 June 2019, https://www.news-medical.net/life-sciences/Gene-Expression-Techniques.aspx.

Comments

The opinions expressed here are the views of the writer and do not necessarily reflect the views and opinions of News-Medical.Net.
Post a new comment
Post