La souillure de gramme est un type de différentiel souillant utilisé pour distinguer les groupes bactériens grampositifs et gramnégatifs, basé sur des différences inhérentes dans leurs constituants de paroi cellulaire.
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Contraste d'augmentation de souillures permettant à des bactéries d'être observé avec la grande simplicité. La souillure de gramme dépend de l'interaction entre négativement - la surface chargée des bactéries et les ions positifs dans les souillures courantes.
Les bacilles gram négatifs sont souvent pathogènes et contiennent des endotoxines dans leurs membranes extérieures. La structure de paroi cellulaire des bacilles gram négatifs s'entretient également une capacité accrue de résister à des antibiotiques. Escherichia coli est un exemple d'un bacille gram négatif courant.
Procédure de coloration Gram
La procédure de coloration Gram a été élaborée par Hans Christian Gram pendant les 1800s et était l'une des premières techniques enseignées aux stagiaires dans des laboratoires de microbiologie. Une prélèvement bactérienne sèche est noyée avec une souillure de violette en cristal avant que de l'iode soit ajouté pour fixer la souillure dans un composé insoluble.
La prélèvement De-est souillée utilisant une solution d'alcool ou d'acétone pour enlever la souillure faible liée, avant de counterstained avec la teinture rouge, safranin. Le guide est rincé entre chaque opération procédurale avec le lavage final agissant en tant que préparation pour l'observation sous un microscope.
On observe des bactéries grampositives en tant que cellules colorées bleues ou violettes (ayant maintenu la souillure) tandis que les bacilles gram négatifs semblent roses à cause du counterstain.
Structure de paroi cellulaire de bacilles gram négatifs
Des bacilles gram négatifs sont caractérisés par la présence de l'espace périplasmique, qui est un à une seule couche de peptidoglycan serré entre la membrane cytoplasmique et la membrane extérieure. Peptidoglycan, également connu sous le nom de murein, est un polymère qui se compose d'un réseau général et des acides aminés d'hydrate de carbone.
Des réseaux de peptide dans la structure peptidoglycan sont partiellement réticulés dans les bacilles gram négatifs, différant des réseaux fortement réticulés de peptide des bactéries grampositives.
La membrane extérieure contient le lipopolysaccharide, une grande molécule qui est toxique aux animaux. Pendant le gramme souillant, la membrane extérieure des bacilles gram négatifs détériore de l'alcool ajouté à l'échantillon et la couche mince de peptidoglycan ne peut pas maintenir la souillure de violette en cristal.
Le counterstain est ajouté pour fournir le contraste en souillant les bacilles gram négatifs décolorés par la couche peptidoglycan mince tandis qu'étant assez léger ne pas toucher à la violette en cristal souillant sur les bactéries grampositives.
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Bacilles gram négatifs comme agents pathogènes
Les bacilles gram négatifs sont souvent pathogènes et comprennent Escherichia coli, une cause classique de l'intoxication alimentaire et des cholerae de vibrio, l'agent pathogène porté par les eaux responsable des manifestations de choléra. La capacité pathogène des bacilles gram négatifs est provoquée par leurs composantes constitutives de membrane.
L'endotoxine de lipopolysaccharide qui demeure dans la membrane extérieure peut entraîner une réaction toxique ou une réaction immunitaire intense chez l'animal d'hôte. Les bacilles gram négatifs qui entrent dans l'appareil circulatoire peuvent relâcher des lipopolysaccharides dans assez grand s'élève pour déclencher une réaction immunitaire qui est nuisible aux organes et aux tissus de l'hôte.
Les lipopolysaccarides de diffusion trouvés dans le flot de sang des patients souffrant de la sepsie indique que les endotoxines sont un objectif important de médicament pour la prévention et demande de règlement de choc infectieux.
Bacilles gram négatifs et résistance aux antibiotiques
Les bacilles gram négatifs sont moins susceptibles des antibiotiques à cause de leur membrane extérieure. C'est parce que la membrane extérieure assure la protection contre les demandes de règlement qui endommageraient normalement la membrane intérieure. Des souches de bactéries résistant aux antibiotiques ont été notées pour manifester des modifications dans la composition de lipide ou de protéine de la membrane extérieure.
Les petits antibiotiques hydrophiles visent des porins, les glissières de protéine qui fournissent une voie par la membrane extérieure. La résistance aux antibiotiques a été jointe à une réduction du régime de l'entrée pour des antibiotiques par des porins par l'intermédiaire des modifications au profil extérieur de membrane ou à la perméabilité réduite provoquée par des mutations spécifiques.
Observé par Gillian De Souza, GCS
Sources :
- Beveridge, T.J. 2001. Utilisation de la souillure de gramme en microbiologie, Biotechnic et histochimie, 76, Pp. 111-118.
- Institut national d'allergie et de maladie infectieuse : Bacilles gram négatifs.
- Opale, S.M. et Glück, T. 2003. Endotoxine comme objectif de médicament, médicament critique de soins, 31, Pp. 57-64.
- Delcour, A.H. 2009. Acta extérieur de perméabilité du membrane et de résistance aux antibiotiques, de Biochimica et de Biophysica, 1794, Pp. 808-816.
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